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猪各组织器官内肌生成抑制素基因mRNA表达谱的研究
被引量：
12
1
作者
张锐
孙美榕
+5 位作者
张红莲
杨捷
黄燕
陈绍红
杜慧
欧阳红生
《中国兽药杂志》
2004年第3期16-18,共3页
用Trizol试剂法提取军牧一号猪的骨骼肌、心肌、肝、肾、肺、脾、胰、脂肪的总RNA做RT-PCR和嵌套PCR,结果在军牧一号猪骨骼肌、心肌和脂肪组织内检测到了肌生成抑制素mRNA的表达,而在其他组织中未检测到。
关键词
猪
组织器官
肌生成抑制素
基因表达
MRNA
表达谱
肌肉生成
负调控因子
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职称材料
猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列的表达与纯化
2
作者
张锐
孙美榕
+1 位作者
欧阳红生
张玉静
《云南农业大学学报》
CAS
CSCD
2004年第3期255-259,共5页
猪肌生成抑制素基因myostatin(MSTN)的cDNA去除信号肽后对成熟蛋白编码序列PCR扩增出1.2kb片段,将该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109受体菌细胞,筛选阳性克隆测序分析,结果表明与设计序列完全一致。将该克隆载体的质粒DNA用带有BamHI和...
猪肌生成抑制素基因myostatin(MSTN)的cDNA去除信号肽后对成熟蛋白编码序列PCR扩增出1.2kb片段,将该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109受体菌细胞,筛选阳性克隆测序分析,结果表明与设计序列完全一致。将该克隆载体的质粒DNA用带有BamHI和SalI内切酶识别序列的另一对引物进行PCR扩增,将回收的1 2kbPCR目的片段定向克隆到pET28a(+)表达载体上,成功地构建了猪肌生成抑制素成熟蛋白编码的原核表达载体。对成功构建表达载体阳性克隆在LB液体培养基中用IPTG诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳显示,重组菌表达的MSTN蛋白是以包涵体的形式表达的;SDS-PAGE凝胶经薄层扫描仪扫描分析,表达的MSTN包涵体蛋白占菌体不溶性蛋白含量的27 9%,表达的MSTN分子量为41451 3D.因为所构建的表达载体中含六聚组氨酸标签,则用His-trap亲和柱进行纯化后,纯度可达92 5%.该试验为获得较好的猪肌生成抑制素基因抗原、制备抗体打下了良好的基础。
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关键词
猪肌生成抑制索基因
成熟蛋白编码序列
表达与纯化
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职称材料
题名
猪各组织器官内肌生成抑制素基因mRNA表达谱的研究
被引量：
12
1
作者
张锐
孙美榕
张红莲
杨捷
黄燕
陈绍红
杜慧
欧阳红生
机构
湛江海洋
大学
现代生化中心
深圳科安信公司
中国人民解放军军需大学生物化学与分子生物学教研室
出处
《中国兽药杂志》
2004年第3期16-18,共3页
文摘
用Trizol试剂法提取军牧一号猪的骨骼肌、心肌、肝、肾、肺、脾、胰、脂肪的总RNA做RT-PCR和嵌套PCR,结果在军牧一号猪骨骼肌、心肌和脂肪组织内检测到了肌生成抑制素mRNA的表达,而在其他组织中未检测到。
关键词
猪
组织器官
肌生成抑制素
基因表达
MRNA
表达谱
肌肉生成
负调控因子
Keywords
porcine myostatin gene
mRNA
expression pattern
分类号
S828.2 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列的表达与纯化
2
作者
张锐
孙美榕
欧阳红生
张玉静
机构
湛江海洋
大学
现代生化中心
深圳科安信有限公司
中国人民解放军军需大学生物化学与分子生物学教研室
出处
《云南农业大学学报》
CAS
CSCD
2004年第3期255-259,共5页
基金
国家自然科学基金(30070563)
军队医药卫生青年基金(98Q079)
文摘
猪肌生成抑制素基因myostatin(MSTN)的cDNA去除信号肽后对成熟蛋白编码序列PCR扩增出1.2kb片段,将该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109受体菌细胞,筛选阳性克隆测序分析,结果表明与设计序列完全一致。将该克隆载体的质粒DNA用带有BamHI和SalI内切酶识别序列的另一对引物进行PCR扩增,将回收的1 2kbPCR目的片段定向克隆到pET28a(+)表达载体上,成功地构建了猪肌生成抑制素成熟蛋白编码的原核表达载体。对成功构建表达载体阳性克隆在LB液体培养基中用IPTG诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳显示,重组菌表达的MSTN蛋白是以包涵体的形式表达的;SDS-PAGE凝胶经薄层扫描仪扫描分析,表达的MSTN包涵体蛋白占菌体不溶性蛋白含量的27 9%,表达的MSTN分子量为41451 3D.因为所构建的表达载体中含六聚组氨酸标签,则用His-trap亲和柱进行纯化后,纯度可达92 5%.该试验为获得较好的猪肌生成抑制素基因抗原、制备抗体打下了良好的基础。
关键词
猪肌生成抑制索基因
成熟蛋白编码序列
表达与纯化
Keywords
recombinant porcine myostatin gene
coding sequence for mature MSTN
expression and purifiation
分类号
S828.2 [农业科学—畜牧学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
猪各组织器官内肌生成抑制素基因mRNA表达谱的研究
张锐
孙美榕
张红莲
杨捷
黄燕
陈绍红
杜慧
欧阳红生
《中国兽药杂志》
2004
12
在线阅读
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职称材料
2
猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列的表达与纯化
张锐
孙美榕
欧阳红生
张玉静
《云南农业大学学报》
CAS
CSCD
2004
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