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共表达H5、H7亚型AIV HA基因与鸡IL-18基因的重组鸡痘病毒构建被引量：2: 1; 作者王振国金宁一 +4 位作者马鸣潇费东亮贾雷立金扩世尹革芬《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期408-413,共6页; 以鸡痘病毒（FPV）疫苗株为载体,将H5和H7亚型禽流感病毒血凝素（AIV HA）基因串联后（拥有同一个阅读框）和鸡白细胞介素-18（IL-18）基因分别插入到鸡痘病毒表达载体pUTA-16-LacZ复合启动子（ATI-P7.5×20）和单一启动子1（P7.5... 展开更多; 关键词禽流感病毒血凝素基因重组禽痘病毒鸡白细胞介素-18; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠对HIV-2嵌合结构基因重组鸡痘病毒的免疫反应: 2; 作者李子健张立树 +2 位作者金宁一江文正李昌《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期730-734,共5页; 将HIV-2嵌合结构基因gag-gp105插入到转移载体pUTA2复合启动子ATI-P7.5×20下游,构建出鸡痘病毒重组转移质粒pA-gg;经转染和BrdU加压筛选,以基因组PCR和Western blot法鉴定重组病毒;将获得的重组病毒大量制备并纯化后,肌肉注射免疫B... 展开更多; 关键词人免疫缺陷病毒Ⅱ型(HIV-2) 结构基因重组鸡痘病毒免疫反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

口蹄疫三价重组鸡痘病毒疫苗分子设计及其构建被引量：9: 3; 作者马鸣潇金宁一 +6 位作者刘慧娟沈国顺郑敏金明兰鲁会军霍晓伟马海利《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期288-294,共7页; 针对我国口蹄疫（FMD）流行情况,利用计算机软件模拟分析,构建了口蹄疫病毒（FMDV）复合多表位基因工程疫苗表达盒OAAT。该表达盒以O型、A型FMDV结构蛋白VP1全基因和AsiaⅠ型FMDV2个基因拓扑型的结构蛋白VP1基因上的5个抗原表位基因（其... 展开更多; 关键词复合多表位抗原表达盒 OAAT口蹄疫病毒鸡痘病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人卵透明带蛋白3的制备及其免疫学活性分析被引量：2: 4; 作者郭焱曲晓波金宁一《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1119-1121,共3页; 目的:纯化制备rhuZP3,并分析其免疫学活性。方法:在含重组质粒pGEX4T-1/huZP3的大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达出GST-融合蛋白,蛋白经过一系列的纯化,然后SDS-PAGE电泳鉴定蛋白纯度。rhuZP3免疫小鼠,ELISA法检测抗血清对rhZP3的抗体反... 展开更多; 关键词人卵透明带蛋白3 表达纯化活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

O型口蹄疫病毒O／LZ株拯救被引量：1: 5; 作者马鸣潇金宁一 +6 位作者沈国顺刘慧娟霍晓伟金明兰郑敏鲁会军金扩世《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期333-336,共4页; 以构建的口蹄疫病毒O/LZ株全长cDNA为模板,使用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录,得到病毒RNA。用脂质体转染法将转录物RNA导入BHK细胞,可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病变效应。对收获的病毒分别用RT-PCR、免疫荧光以及免疫电子显微镜... 展开更多; 关键词口蹄疫病毒 CDNA 转录产物 RNA; 在线阅读下载PDF 职称材料

禽流感病毒RT-PCR检测方法的建立被引量：1: 6; 作者马鸣潇金宁一 +6 位作者王振国费东亮郑敏金扩世夏志平葛淑敏金明兰《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期77-81,共5页; 参照国内外已发表的禽流感病毒(Avian Influenza Virus, AIV)的基因序列和AIV相关的RT-PCR检测方法,根据AIV高保守、高特异的M蛋白基因设计了一套通用型引物,通过对相关病毒、棉拭子检测,建立了AIV通用型RT-PCR检测方法.根据AIV HA基因... 展开更多; 关键词 PCR检测方法禽流感病毒流行病学调查基因设计反应体系反应条件 AIV Virus PCR引物基因序列 H9亚型裂解位点疫苗使用通用型国内外相关 M蛋白 V系列致病性基础三联棉; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名共表达H5、H7亚型AIV HA基因与鸡IL-18基因的重组鸡痘病毒构建被引量：2: 1; 作者王振国金宁一马鸣潇费东亮贾雷立金扩世尹革芬; 机构中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心锦州医学院畜牧兽医学院不详; 出处《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期408-413,共6页; 基金国家十五重点攻关项目（2004BA519A12）资助.; 文摘以鸡痘病毒（FPV）疫苗株为载体,将H5和H7亚型禽流感病毒血凝素（AIV HA）基因串联后（拥有同一个阅读框）和鸡白细胞介素-18（IL-18）基因分别插入到鸡痘病毒表达载体pUTA-16-LacZ复合启动子（ATI-P7.5×20）和单一启动子1（P7.5）下游,构建了携带AIV HA基因和鸡白细胞介素-18基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-H5-H7-IL18;用相同的方法构建重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-H5-IL18;将H5亚型AIV HA基因插入到鸡痘病毒表达载体pUTA2复合启动子（ATI-P7.5×20）下游,构建了携带H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTA2-H5.应用脂质体转染法,将重组鸡痘病毒转移载体质粒与282E4株鸡痘病毒共转染鸡胚成纤维细胞（CEF）,经BrdU进行三次加压蚀斑筛选后,以不同代次的细胞mRNA为模板,利用H5亚型AIV HA基因、H7亚型AIV HA基因和鸡IL-18基因特异引物进行RT-PCR和蛋白印迹检测,筛选出H5HA-H7HA融合蛋白基因和鸡IL-18基因共表达的重组鸡痘病毒rFPV-H5HA-H7HA-IL18,H5亚型AIV HA基因和鸡IL-18基因共表达的重组鸡痘病毒rFPV-H5HA-IL18以及单独表达H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒rFPV-H5HA.这些重组鸡痘病毒的构建为AIV活载体疫苗的研制奠定了基础.; 关键词禽流感病毒血凝素基因重组禽痘病毒鸡白细胞介素-18; Keywords avian influenza virus （AIV）, hemagglutinin gene （HA）, recombinant fowlpox virus （rFPV）, interleukin- 18 gene （ IL- 18）; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠对HIV-2嵌合结构基因重组鸡痘病毒的免疫反应: 2; 作者李子健张立树金宁一江文正李昌; 机构北京大学第三医院血管医学研究所中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室华东师范大学生命科学学院; 出处《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期730-734,共5页; 基金 863计划（2003AA219051）、吉林省科技发展计划（20030550-1）资助项目.; 文摘将HIV-2嵌合结构基因gag-gp105插入到转移载体pUTA2复合启动子ATI-P7.5×20下游,构建出鸡痘病毒重组转移质粒pA-gg;经转染和BrdU加压筛选,以基因组PCR和Western blot法鉴定重组病毒;将获得的重组病毒大量制备并纯化后,肌肉注射免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠血清HIV-2抗体,流式细胞仪测定CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞亚类数量,乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测脾特异性CTL杀伤活性.结果表明,成功筛选出一株可稳定表达HIV-2嵌合蛋白Gag-gp105的重组鸡痘病毒rFPV-gg;该重组病毒免疫组小鼠的血清出现HIV-2抗体,脾T细胞亚类数量增加,并产生针对HIV-2靶细胞的特异性CTL杀伤活性.本研究提示,HIV-2 gag-gp105重组病毒能诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫应答.; 关键词人免疫缺陷病毒Ⅱ型(HIV-2) 结构基因重组鸡痘病毒免疫反应; Keywords HIV-2, structural gene, recombinant, fowlpox virus, immune response; 分类号 Q95-331 [生物学—动物学] S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名口蹄疫三价重组鸡痘病毒疫苗分子设计及其构建被引量：9: 3; 作者马鸣潇金宁一刘慧娟沈国顺郑敏金明兰鲁会军霍晓伟马海利; 机构中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室辽宁医学院动物医学院吉林大学畜牧兽医学院; 出处《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期288-294,共7页; 基金国家863计划（2001AA213071）资助项目.; 文摘针对我国口蹄疫（FMD）流行情况,利用计算机软件模拟分析,构建了口蹄疫病毒（FMDV）复合多表位基因工程疫苗表达盒OAAT。该表达盒以O型、A型FMDV结构蛋白VP1全基因和AsiaⅠ型FMDV2个基因拓扑型的结构蛋白VP1基因上的5个抗原表位基因（其中2个抗原表位来源于FMDVIND63/7株,该毒株与我国新疆分离株属于同一基因拓扑型,其余3个抗原表位来源于FMDVYNBS/58株）作为主要免疫原基因,以非结构蛋白上的2个Th2细胞表位基因及结构蛋白上的1个Th2细胞表位基因作为辅助基因。将构建好的表达盒OAAT和猪IL-18基因分别插入到鸡痘病毒（FPV）表达载体pUTA-16-LacZ复合启动子（ATI-P7.5×20）和单一启动子（P7.5）下游,构建了携带OAAT表达盒和猪IL-18基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-OAAT-IL18。应用脂质体转染法,将重组鸡痘病毒转移载体质粒与282E4株FPV共转染鸡胚成纤维细胞（CEF）,经BrdU进行3次加压蚀斑筛选后,以不同代次的细胞mRNA为模板,利用FMDVVP1基因和猪IL-18基因特异引物进行RT-PCR和IFA检测,筛选出OAAT和猪IL-18基因共表达的重组鸡痘病毒rF-PV-OAAT-IL18,该重组鸡痘病毒的构建为新型FMDV活载体疫苗的研究奠定了基础。; 关键词复合多表位抗原表达盒 OAAT口蹄疫病毒鸡痘病毒; Keywords muhiplicity epitope, expression box, OAAT FMDV, FPV; 分类号 S858.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人卵透明带蛋白3的制备及其免疫学活性分析被引量：2: 4; 作者郭焱曲晓波金宁一; 机构长春中医药大学中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1119-1121,共3页; 基金吉林省科技厅科研基金重大项目(20060415); 文摘目的:纯化制备rhuZP3,并分析其免疫学活性。方法:在含重组质粒pGEX4T-1/huZP3的大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达出GST-融合蛋白,蛋白经过一系列的纯化,然后SDS-PAGE电泳鉴定蛋白纯度。rhuZP3免疫小鼠,ELISA法检测抗血清对rhZP3的抗体反应。结果:表达出了可溶性融合蛋白,纯化后的rhuZP3纯度达95%。而且它在ELISA鉴定实验中能被抗rhuZP3抗体识别。结论:通过原核表达系统制备的rhuZP3及其抗体具有免疫学活性。; 关键词人卵透明带蛋白3 表达纯化活性; Keywords Human zona pellucida 3（rhuZP3） Expression Purification Activity; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名O型口蹄疫病毒O／LZ株拯救被引量：1: 5; 作者马鸣潇金宁一沈国顺刘慧娟霍晓伟金明兰郑敏鲁会军金扩世; 机构中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期333-336,共4页; 基金国家“863”项目(2006AA10A204) 辽宁省教育厅(20060527); 文摘以构建的口蹄疫病毒O/LZ株全长cDNA为模板,使用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录,得到病毒RNA。用脂质体转染法将转录物RNA导入BHK细胞,可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病变效应。对收获的病毒分别用RT-PCR、免疫荧光以及免疫电子显微镜观察等方法进行鉴定,结果表明拯救到特定的口蹄疫病毒。同时用空斑试验法观察了拯救病毒及其母本毒株的生长特性,结果表明二者没有明显差异,这将为进一步探索猪口蹄疫病毒致病的分子机制及研制新型口蹄疫疫苗奠定良好的基础。; 关键词口蹄疫病毒 CDNA 转录产物 RNA; Keywords foot-and-mouth disease virus （FMDV） cDNA transcripted product RNA; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽流感病毒RT-PCR检测方法的建立被引量：1: 6; 作者马鸣潇金宁一王振国费东亮郑敏金扩世夏志平葛淑敏金明兰; 机构中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室锦州医学院畜牧兽医学院不详; 出处《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期77-81,共5页; 基金国家科技攻关项目; 文摘参照国内外已发表的禽流感病毒(Avian Influenza Virus, AIV)的基因序列和AIV相关的RT-PCR检测方法,根据AIV高保守、高特异的M蛋白基因设计了一套通用型引物,通过对相关病毒、棉拭子检测,建立了AIV通用型RT-PCR检测方法.根据AIV HA基因设计了H5、H7、H9亚型的联合RT-PCR引物,其上下游引物分别位于裂解位点两侧,在确定各亚型单项RT-PCR检测方法的反应条件和反应体系的基础上,建立、优化了三联RT-PCR检测方法的反应体系和反应条件,并通过相关病毒、质粒、棉拭子检测,建立了AIV三联RT-PCR检测方法.最终建立了AIV系列RT-PCR检测方法,该方法具有快速、敏感、特异等优点,为AIV检测、流行病学调查、致病性分析及疫苗使用等奠定了基础.; 关键词 PCR检测方法禽流感病毒流行病学调查基因设计反应体系反应条件 AIV Virus PCR引物基因序列 H9亚型裂解位点疫苗使用通用型国内外相关 M蛋白 V系列致病性基础三联棉; 分类号 S858.23 [农业科学—临床兽医学] S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	共表达H5、H7亚型AIV HA基因与鸡IL-18基因的重组鸡痘病毒构建	王振国金宁一马鸣潇费东亮贾雷立金扩世尹革芬	《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	小鼠对HIV-2嵌合结构基因重组鸡痘病毒的免疫反应	李子健张立树金宁一江文正李昌	《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	口蹄疫三价重组鸡痘病毒疫苗分子设计及其构建	马鸣潇金宁一刘慧娟沈国顺郑敏金明兰鲁会军霍晓伟马海利	《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心	2007	9	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组人卵透明带蛋白3的制备及其免疫学活性分析	郭焱曲晓波金宁一	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	O型口蹄疫病毒O／LZ株拯救	马鸣潇金宁一沈国顺刘慧娟霍晓伟金明兰郑敏鲁会军金扩世	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	禽流感病毒RT-PCR检测方法的建立	马鸣潇金宁一王振国费东亮郑敏金扩世夏志平葛淑敏金明兰	《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料