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白藜芦醇抑制结肠癌干细胞增殖并增强MICA/B的表达 被引量:13
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作者 杨君 刘军权 +1 位作者 吕小婷 费素娟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期889-893,共5页
目的研究白藜芦醇(Res)对结肠癌干细胞(CCSC)增殖、凋亡和免疫原性的影响。方法采用无血清培养法由HCT116结肠癌细胞诱导培养CCSC,通过检测CCSC标志物CD133、CD44进行鉴定。MTT法检测Res对CCSC增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色结合... 目的研究白藜芦醇(Res)对结肠癌干细胞(CCSC)增殖、凋亡和免疫原性的影响。方法采用无血清培养法由HCT116结肠癌细胞诱导培养CCSC,通过检测CCSC标志物CD133、CD44进行鉴定。MTT法检测Res对CCSC增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色结合流式细胞术检测Res对CCSC凋亡的影响;流式细胞术检测Res对CCSC生长周期及主要组织相容性复合体Ⅰ类分子相关链A/B(MICA/B)表达的影响。结果 HCT116细胞在无血清培养下成球生长。球形细胞中CD133+细胞占91.07%±1.79%,CD44+细胞占90.33%±1.78%。与对照组相比,Res能明显抑制CCSC增殖,并且呈时间、剂量依赖性;Res作用48 h后,CCSC细胞周期G0/G1期比例显著升高,S期下降,呈剂量依赖性;随着药物浓度增加,CCSC的凋亡率增加,MICA/B的表达增强。结论从HCT116结肠癌细胞成功诱导培养出CCSC,Res能剂量依赖性地抑制CCSC的增殖,与阻滞细胞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡有关;Res能增强CCSC中MICA/B的表达,增强其免疫原性。 展开更多
关键词 白藜芦醇 结肠癌干细胞 凋亡 细胞周期 主要组织相容性复合体I类分子相关链A/B(MICA/B)
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根皮素对人γδT细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及机制探讨 被引量:9
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作者 刘刚 陈复兴 +2 位作者 刘军权 吕小婷 费素娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期602-606,615,共6页
目的:探讨根皮素对人γδT细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及其机制。方法:IPP法扩增人外周血γδT细胞,不同浓度的根皮素作用于γδT细胞及胃癌SGC-7901细胞48小时后,MTT法检测γδT细胞及SGC-7901细胞的生长曲线,FCM检测γδT细胞PF... 目的:探讨根皮素对人γδT细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及其机制。方法:IPP法扩增人外周血γδT细胞,不同浓度的根皮素作用于γδT细胞及胃癌SGC-7901细胞48小时后,MTT法检测γδT细胞及SGC-7901细胞的生长曲线,FCM检测γδT细胞PFP及GraB的表达;LDH释放法检测γδT细胞对SGC-7901细胞的杀伤活性;Western blot检测γδT细胞中Wnt3a的表达情况。结果:IPP作用10天后,γδT细胞比例由3.12%增加到79.6%。与对照组比较,浓度2.3518.75μg/ml的根皮素作用后γδT细胞的增殖率显著提高(P〈0.05),75μg/ml根皮素对SGC-7901细胞生长抑制率显著提高(P〈0.05),且2.3575μg/ml根皮素作用后的γδT细胞对SGC-7901细胞的杀伤活性明显增强(P〈0.05),γδT细胞中PFP、GraB及Wnt3a的表达较对照组显著增加(P〈0.05)。结论:根皮素能够增强γδT细胞对SGC-7901细胞的杀伤作用,其机制可能与根皮素促进γδT细胞的增殖,提高γδT细胞PFP、GraB表达及活化Wnt信号通路有关。 展开更多
关键词 根皮素 ΓΔT细胞 胃癌 杀伤活性
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一种体外扩增γδT细胞的新方法 被引量:6
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作者 吕小婷 刘军权 +5 位作者 周忠海 陈玲 张娟 张颂 黄菲 陈复兴 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期739-742,747,共5页
目的:建立一种新的γδT细胞扩增方法。方法:从健康人外周血中分离外周血单个核细胞(PBMCs),与用唑来膦酸预处理过的未成熟DCs按10:1混合,在含IL-2 400 U/ml和10%小牛血清的RPMI1640培养基中培养,用MTT法测定细胞增殖倍数。用流式细胞... 目的:建立一种新的γδT细胞扩增方法。方法:从健康人外周血中分离外周血单个核细胞(PBMCs),与用唑来膦酸预处理过的未成熟DCs按10:1混合,在含IL-2 400 U/ml和10%小牛血清的RPMI1640培养基中培养,用MTT法测定细胞增殖倍数。用流式细胞仪对γδT细胞进行表型分析并检测其细胞内的颗粒酶B、穿孔素和CD107a含量。用乳酸脱氢酶释放法(LDH)检测细胞杀伤活性。结果:经唑来膦酸预处理的树突状细胞与自身外周血单个核细胞共培养,到11天时γδT细胞增殖倍数达到(120±15)倍,第8天和11天γδT细胞百分率分别达到70.26%±3.56%、90.11%±4.67%。γδT细胞细胞内颗粒酶B、穿孔素及CD107a在第8天时分别为81.66%±4.32%、86.62%±5.21%和80.12%±3.78%,均高于对照组。培养的γδT细胞对SGC-7901、SW-1990、SW-480肿瘤细胞株杀伤活性至第8天时达到峰值。结论:此法能有效诱导γδT细胞体外扩增,培养的γδT细胞颗粒酶B、穿孔素及CD107a均显著高于对照组,并有较强的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 树突状细胞 唑来膦酸 ΓΔT细胞 免疫治疗
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手术分娩对产妇和新生儿血中NK细胞的影响 被引量:3
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作者 徐德朋 陈复兴 +1 位作者 王全英 周忠海 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1478-1480,共3页
目的:探讨手术分娩对产妇和新生儿血NK细胞数量的影响。方法:足月分娩产妇60例,其中自然分娩(NL)组、择期剖宫产(PCS)组、临产后剖宫产(ECS)组各20例。分别采取分娩即刻的产妇外周血和新生儿脐血,采用流式细胞仪检测血中NK细胞的百分数... 目的:探讨手术分娩对产妇和新生儿血NK细胞数量的影响。方法:足月分娩产妇60例,其中自然分娩(NL)组、择期剖宫产(PCS)组、临产后剖宫产(ECS)组各20例。分别采取分娩即刻的产妇外周血和新生儿脐血,采用流式细胞仪检测血中NK细胞的百分数。结果:血中NK细胞百分数在产妇中3组无差异(P>0.05);PCS组的新生儿血中NK细胞百分数明显低于NL组(P<0.05),同时也低于其母体产妇(P<0.01)。结论:手术分娩不影响产妇血中NK细胞数;择期剖宫产减少新生儿血中NK细胞数,手术分娩儿增加了对病原体的易感性。 展开更多
关键词 分娩 手术 免疫 NK细胞 新生儿
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金丝桃苷增强人NK细胞增殖及功能的研究 被引量:1
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作者 周燏 高小宁 +4 位作者 吕小婷 孙蕾清 陈玲 郑璐 周忠海(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期1569-1572,共4页
目的:研究金丝桃苷对人NK细胞增殖及功能的影响。方法:常规方法扩增健康人外周血NK细胞。用不同浓度的金丝桃苷作用于细胞,CCK-8法检测增殖。流式细胞仪检测NK细胞处理前后颗粒酶、穿孔素的表达。ELISA法检测细胞培养上清中IFN-γ、FasL... 目的:研究金丝桃苷对人NK细胞增殖及功能的影响。方法:常规方法扩增健康人外周血NK细胞。用不同浓度的金丝桃苷作用于细胞,CCK-8法检测增殖。流式细胞仪检测NK细胞处理前后颗粒酶、穿孔素的表达。ELISA法检测细胞培养上清中IFN-γ、FasL、TNF-α的表达。结果:金丝桃苷各浓度组对CD3-CD56+的比例无明显影响,但在1.6~8.0μg/ml时能显著促进NK细胞增殖,并提高颗粒酶和穿孔素的表达。金丝桃苷在1.6~40μg/ml浓度能明显促进NK细胞分泌FasL、IFN-γ,但对TNF-α的分泌无明显影响。结论:一定浓度范围内金丝桃苷能增强NK细胞的增殖及功能。 展开更多
关键词 金丝桃苷 NK细胞 增殖 功能
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经链球菌菌体制剂OK-432刺激的树突状细胞对自然杀伤细胞增殖及功能的影响 被引量:1
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作者 于丽梅 陈剑群 +3 位作者 陈复兴 刘军权 周忠海 陈玲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期517-521,共5页
目的:探讨经链球菌菌体制剂OK-432刺激的树突状细胞(Dendritic cells,DC)对自体自然杀伤细胞(Naturalkiller cells,NK)体外扩增和功能的影响。方法:将DC分为未成熟DC组和OK-432刺激的DC组,48小时后MTT法检测DC增殖情况,FCM检测DC表型CD8... 目的:探讨经链球菌菌体制剂OK-432刺激的树突状细胞(Dendritic cells,DC)对自体自然杀伤细胞(Naturalkiller cells,NK)体外扩增和功能的影响。方法:将DC分为未成熟DC组和OK-432刺激的DC组,48小时后MTT法检测DC增殖情况,FCM检测DC表型CD80、CD83、CD86的表达情况;后将未成熟DC组和OK-432刺激的DC组分别与NK细胞以1∶1、1∶5、1∶10、1∶20、1∶40比例混合继续培养。0、2、4、6天时计算NK细胞扩增倍数;FCM检测NK细胞PFP、GraB、CD107a的表达;LDH释放法检测NK对HepG2细胞的杀伤活性。结果:OK-432(5μg/ml)使DC增殖达到最佳(30%),且能显著增强DC表型表达(P<0.05)。1∶5(OK-DC)组NK细胞扩增倍数达最大(P<0.05);1∶5(OK-DC)组能显著促进NK释放穿孔素(Pore-forming protein,PFP)、颗粒酶(Granzyme B,GraB)、CD107a(P<0.05);1∶5(OK-DC)组对HepG2细胞的杀伤活性(67.12±5.36)%达到最大(P<0.05)。结论:OK-432(终浓度5μg/ml)能促进DC增殖,并促进DC成熟;OK-DC与NK细胞共培养能以剂量依赖的方式增强NK细胞杀伤HepG2细胞功能,可能与增加NK扩增倍数和PFP、GraB、CD107a的表达有关。 展开更多
关键词 OK-432 树突状细胞 自然杀伤细胞 过继免疫治疗
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