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Ola1对小鼠早期胚胎体外发育的影响
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作者 罗安凤 张玉清 +2 位作者 王昕昕 杨彩侠 解迪 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4871-4879,共9页
【目的】探究Obg样ATP酶1(Obg-like ATPase 1,Ola1)对小鼠早期胚胎发育的影响。【方法】采用体外受精技术获取小鼠合子并进行胚胎体外发育培养,利用电转siRNA干扰技术敲低Ola 1基因,检测Ola 1基因干扰效率,并统计卵裂率和囊胚率;通过免... 【目的】探究Obg样ATP酶1(Obg-like ATPase 1,Ola1)对小鼠早期胚胎发育的影响。【方法】采用体外受精技术获取小鼠合子并进行胚胎体外发育培养,利用电转siRNA干扰技术敲低Ola 1基因,检测Ola 1基因干扰效率,并统计卵裂率和囊胚率;通过免疫荧光和TUNEL法检测胚胎的DNA损伤情况和早期凋亡情况;利用实时荧光定量PCR检测胚胎多能性和凋亡相关基因的转录水平。【结果】与对照组相比,敲低Ola 1基因后,小鼠胚胎中Ola 1基因相对表达量极显著降低(P<0.01),成功实现小鼠胚胎中敲低Ola 1基因表达。敲低Ola 1基因后,早期胚胎卵裂率与对照组相比无显著差异(P>0.05),但囊胚率极显著低于对照组(P<0.01),γ-H2A.X荧光强度和囊胚凋亡率极显著高于对照组(P<0.01),表明敲低Ola 1基因引起早期胚胎体外发育受阻。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,敲低Ola 1基因后,早期胚胎的多能性相关基因性别决定区Y框蛋白2(SOX2)和多潜能性基因(Nanog)表达量极显著降低(P<0.01),促凋亡基因B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(Caspase3)表达量显著或极显著上调(P<0.05;P<0.01),抗凋亡基因B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达量极显著下调(P<0.05)。【结论】Ola1可能通过调控早期胚胎的多能性相关基因表达,参与DNA损伤和早期胚胎凋亡过程,从而影响早期胚胎发育潜力。 展开更多
关键词 Ola1 小鼠 胚胎发育 DNA损伤 细胞凋亡
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