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基于抗氧化应激探讨侧柏双参方对雄激素性脱发小鼠促生发的效果
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作者 许佳 许展维 +3 位作者 马旺明 王萍 杨斌 宋坪 《环球中医药》 2025年第4期664-670,共7页
目的观察侧柏双参方对雄激素性脱发(androgenetic alopecia,AGA)模型小鼠的干预效应,基于氧化应激环节探讨其潜在作用机制。方法60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、米诺地尔组及侧柏双参低、中、高剂量组。小鼠脱毛后,除空... 目的观察侧柏双参方对雄激素性脱发(androgenetic alopecia,AGA)模型小鼠的干预效应,基于氧化应激环节探讨其潜在作用机制。方法60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、米诺地尔组及侧柏双参低、中、高剂量组。小鼠脱毛后,除空白组外,其余小鼠均外擦睾酮溶液(5 mg/mL)建立AGA小鼠模型,米诺地尔组外抹5%米诺地尔溶液,侧柏双参低、中、高剂量组分别给予的外涂浓度为50、100、200 mg/mL,各组小鼠均每日给药1次,干预16天,分别观察不同时间点小鼠毛发生长速度。通过拍照、皮肤毛发观察仪、皮肤颜色检测、组织苏木素—伊红(hematoxylin-eosin,HE)病理染色观察小鼠毛发再生及毛囊周期转变情况。采用氧化应激试剂盒检测各组小鼠皮肤组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平。结果干预第9、16天,与模型组相比,米诺地尔组、侧柏双参低、中、高剂量组均能不同程度促进小鼠毛发生长(P<0.05),高剂量效果最为显著;干预第9天,与模型组比较,侧柏双参低剂量组小鼠皮肤组织GSH水平升高(P<0.05),SOD、MDA水平无明显差异,侧柏双参中、高剂量组皮肤组织SOD、GSH水平升高,MDA水平下降(P<0.05);干预第16天,与模型组比较,侧柏双参低剂量组皮肤组织MDA水平下降,GSH水平升高,SOD水平无明显差异,中、高剂量组皮肤组织SOD、GSH水平升高,MDA水平下降(P<0.05)。结论侧柏双参方可以促进AGA模型小鼠毛发再生,其机制可能与抗氧化应激相关。 展开更多
关键词 雄激素性脱发 侧柏双参方 氧化应激 人参 丹参 吴茱萸
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侧柏叶提取物对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移、血管生成蛋白表达的影响
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作者 许佳 李玮婕 +1 位作者 杨斌 宋坪 《环球中医药》 2025年第4期649-654,共6页
目的探讨侧柏叶提取物对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖、迁移和血管生成的影响,为侧柏叶治疗雄激素性脱发(androgenetic alopecia,AGA)提供新的理论依据。方法取对数生长期的HUVECs细胞株,分别... 目的探讨侧柏叶提取物对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖、迁移和血管生成的影响,为侧柏叶治疗雄激素性脱发(androgenetic alopecia,AGA)提供新的理论依据。方法取对数生长期的HUVECs细胞株,分别用不同梯度浓度的侧柏叶提取物(30、100、300、1000、3000、9000μg/mL)处理细胞24小时,通过CCK-8实验,检测侧柏叶提取物对HUVECs细胞的安全有效浓度。将细胞分为对照组与侧柏叶组,采用CCK-8方法评估在最佳有效浓度下,侧柏叶提取物处理24、48、72小时后HUVECs细胞的增殖活性。采用细胞划痕实验,观察侧柏叶提取物处理24小时后细胞的迁移能力。采用免疫荧光染色与免疫印迹(Western blot,WB)法检测侧柏叶提取物对HUVECs细胞中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)与成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)蛋白的表达。结果100μg/mL的侧柏叶提取物对细胞有明显促增殖作用,浓度为300μg/mL时开始出现细胞毒性。与对照组相比,侧柏叶组干预HUVECs细胞24、48、72小时后,HUVECs细胞增殖率均升高(P<0.05),48小时最为显著。与对照组比较,干预24小时后,侧柏叶组中细胞迁移能力升高(P<0.05),且VEGFA与FGF2蛋白的表达水平升高(P<0.05)。结论侧柏叶提取物可以促进HUVECs细胞的增殖、迁移,并可以升高HUVECs细胞中VEGFA和FGF2的表达水平,这可能为侧柏叶在AGA治疗中的分子机制提供了新的理论依据。 展开更多
关键词 雄激素性脱发 侧柏叶 人脐静脉内皮细胞 血管生成
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基于网络药理学和实验验证探讨侧柏双参方治疗雄激素性脱发的作用机制
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作者 许佳 马旺明 +3 位作者 宫恬 王萍 杨斌 宋坪 《环球中医药》 2025年第4期655-663,共9页
目的利用网络药理学和分子对接技术,探索侧柏双参方治疗雄激素性脱发(androgenetic alopecia,AGA)的潜在分子机制,并进行实验验证。方法运用GeneCards、OMIM数据库检索AGA靶点,利用TCMSP数据库收集侧柏叶、丹参、人参、吴茱萸的成分及靶... 目的利用网络药理学和分子对接技术,探索侧柏双参方治疗雄激素性脱发(androgenetic alopecia,AGA)的潜在分子机制,并进行实验验证。方法运用GeneCards、OMIM数据库检索AGA靶点,利用TCMSP数据库收集侧柏叶、丹参、人参、吴茱萸的成分及靶点,筛选疾病和药物共有靶点,再通过STRING在线平台构建蛋白—蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络,并构建中药—成分—靶点—通路网络图,采用DAVID数据库进行基因本体(gene ontology,GO)功能与京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,明确中药治疗AGA的核心靶点及潜在分子机制,运用AutoDockTools1.5.6软件对核心靶点与活性成分进行分子对接。将40只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、米诺地尔组、组方高剂量组,每组各10只。除空白组外其余各组小鼠采用睾酮(5 mg/mL)外擦建立AGA小鼠模型,2小时后,米诺地尔组与组方高剂量组分别外涂5%米诺地尔溶液、200 mg/mL的组方溶液,连续干预16天。采用免疫印迹法检测造模部位皮肤组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3蛋白表达。结果获取AGA疾病靶点1118个,药物靶点299个,共有靶点185个,主要涉及TGF-β、Wnt等信号通路,分子对接显示主要成分与关键靶点结合活性良好。干预第16天,与模型组比较,米诺地尔组和组方高剂量组中TGF-β1表达、p-Smad2/Smad2以及p-Smads3/Smads3的比值降低(P<0.05)。结论侧柏双参方可能通过调节TGF-β信号通路发挥其在治疗AGA中的潜在疗效。 展开更多
关键词 雄激素性脱发 侧柏双参方 网络药理学 转化生长因子-β信号通路
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启宫丸对多囊卵巢综合征大鼠WNT/β-catenin信号通路的影响 被引量:6
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作者 李晓俊 杨斌 谢京红 《环球中医药》 CAS 2023年第1期33-38,共6页
目的本实验通过检测启宫丸对多囊卵巢综合征大鼠性激素水平变化,观察卵巢病理组织形态改变、凋亡状况及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路蛋白表达的影响,探究启宫丸对多囊卵巢综合征模型大鼠的治疗作用及机制。方法40只SD雌性大鼠,... 目的本实验通过检测启宫丸对多囊卵巢综合征大鼠性激素水平变化,观察卵巢病理组织形态改变、凋亡状况及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路蛋白表达的影响,探究启宫丸对多囊卵巢综合征模型大鼠的治疗作用及机制。方法40只SD雌性大鼠,随机选取10只作为正常组,其余30只采用来曲唑联合高脂饲料法制备多囊卵巢综合征大鼠模型。造模成功后,将造模组随机分为中药启宫丸组、阳性药达英-35组、模型组,每组各10只。启宫丸组给予14.7 g/(kg·d)灌胃,达英-35组给予0.21 mg/(kg·d)口服灌胃,正常组和模型组给予等量蒸馏水,干预持续21天。ELISA法检测血清中促卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、睾酮(testosterone、T)、雌二醇(estradiol,E 2)及孕酮(progesterone,P)等激素水平;HE染色观察卵巢组织病理形态变化;TUNEL染色观察卵巢组织颗粒细胞凋亡情况;免疫组化法检测大鼠卵巢组织Wnt、β-catenin蛋白的表达。结果(1)与模型组相比,启宫丸组及达英-35组血清E 2及P水平显著升高,血清T水平显著降低(P<0.01),血清LH水平及LH/FSH比值显著降低(P<0.01),以及可不同程度升高血清FSH水平(P<0.05)。(2)HE染色结果显示:与模型组相比,启宫丸组达英-35组可不同程度改善卵泡发育,减少闭锁卵泡。与达英-35组相比,启功丸组GC层数明显增加。(3)TUNEL染色结果显示:与模型组相比,启宫丸组和达英-35组TUNEL阳性细胞率明显下降(P<0.01)。(4)免疫组化结果显示:与模型组相比启宫丸组和达英-35组wnt及β-catenin表达水平均有不同程度上升(P<0.05),表达范围增加。结论启宫丸可调节FSH、LH等性激素分泌水平,改善卵巢组织病理损伤,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 启宫丸 多囊卵巢综合征 颗粒细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路 凋亡 大鼠
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