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水稻线粒体nad5基因超表达载体的构建和遗传转化
被引量：
1
1
作者
冷翔
谭艳平
+1 位作者
王春台
刘学群
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第12期1-2,7,F0002,共4页
以TRIzol法提取的水稻幼苗总RNA反转录的cDNA为模板,以重组PCR技术扩增得到nad5的ORF,构建含有线粒体信号肽Rf1b5'的nad5双元超表达载体pCAMBIA1305.1::35S::Rf1b5'::nad5,以农杆菌介导的愈伤组织侵染法进行水稻遗传转化。克隆...
以TRIzol法提取的水稻幼苗总RNA反转录的cDNA为模板,以重组PCR技术扩增得到nad5的ORF,构建含有线粒体信号肽Rf1b5'的nad5双元超表达载体pCAMBIA1305.1::35S::Rf1b5'::nad5,以农杆菌介导的愈伤组织侵染法进行水稻遗传转化。克隆得到的水稻nad5基因大小为2 013 bp,构建了携带线粒体信号肽Rf1b5'的nad5植物表达载体,并成功获得了超表达nad5基因的阳性植株。
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关键词
水稻
nad5基因
遗传转化
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职称材料
水稻OsVDAC5真核表达载体的构建及在酵母中的表达研究
2
作者
熊杰
程钢
+2 位作者
刘学群
覃永华
王春台
《安徽农业科学》
CAS
2012年第28期13707-13708,共2页
[目的]构建水稻OsVDAC5的真核表达载体,对其进行真核表达研究。[方法]将Osvdac5基因与酵母表达载体pPIC3.5K连接,通过电转化的方法插入到毕氏酵母GS115中,筛选阳性重组菌株,通过0.5%的甲醇诱导使外源的水稻Osvdac5基因表达,并利用West-e...
[目的]构建水稻OsVDAC5的真核表达载体,对其进行真核表达研究。[方法]将Osvdac5基因与酵母表达载体pPIC3.5K连接,通过电转化的方法插入到毕氏酵母GS115中,筛选阳性重组菌株,通过0.5%的甲醇诱导使外源的水稻Osvdac5基因表达,并利用West-ern Blot鉴定表达蛋白的特异性。[结果]成功构建了Osvdac5::pPIC3.5K酵母表达载体,将其整合到酵母GS115基因组后,对其进行诱导表达,产物经Western Blot检测,证实了表达蛋白为OsVDAC5。[结论]该研究结果为进一步研究OsVDAC5蛋白的功能奠定了基础。
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关键词
水稻
OsVDAC5
pPIC3.5K
酵母GS115
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职称材料
水稻线粒体基因atp6超表达载体的构建及遗传转化
3
作者
熊磊
谭艳平
+1 位作者
王春台
刘学群
《安徽农业科学》
CAS
2012年第25期12376-12378,共3页
[目的]克隆水稻线粒体基因atp6,构建转基因表达载体,获得35S∷Rf1b5'∷atp6转基因水稻植株。[方法]设计目的基因的特异引物,采用TRIzol法提取水稻叶片总RNA,借助Toyobo反转录试剂盒反转录为cDNA,通过PCR扩增得到atp6全序列;将atp6...
[目的]克隆水稻线粒体基因atp6,构建转基因表达载体,获得35S∷Rf1b5'∷atp6转基因水稻植株。[方法]设计目的基因的特异引物,采用TRIzol法提取水稻叶片总RNA,借助Toyobo反转录试剂盒反转录为cDNA,通过PCR扩增得到atp6全序列;将atp6连接到含线粒体信号肽(Rf1b5')的pCAMBIA1302双元表达载体上,采用农杆菌介导的愈伤组织侵染法进行水稻的遗传转化。[结果]利用目的基因atp6成功构建了35S∷Rf1b5'∷atp6植物表达载体,并获得了转atp6基因的阳性植株。[结论]为探讨水稻中超表达atp6对水稻生长的影响奠定基础。
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关键词
水稻
ATP6
遗传转化
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职称材料
题名
水稻线粒体nad5基因超表达载体的构建和遗传转化
被引量：
1
1
作者
冷翔
谭艳平
王春台
刘学群
机构
中南民族大学
生命
科学院
/
生物技术
国家民委
重点
实验室
出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第12期1-2,7,F0002,共4页
基金
国家自然科学基金(31170296)
文摘
以TRIzol法提取的水稻幼苗总RNA反转录的cDNA为模板,以重组PCR技术扩增得到nad5的ORF,构建含有线粒体信号肽Rf1b5'的nad5双元超表达载体pCAMBIA1305.1::35S::Rf1b5'::nad5,以农杆菌介导的愈伤组织侵染法进行水稻遗传转化。克隆得到的水稻nad5基因大小为2 013 bp,构建了携带线粒体信号肽Rf1b5'的nad5植物表达载体,并成功获得了超表达nad5基因的阳性植株。
关键词
水稻
nad5基因
遗传转化
Keywords
rice
nad5
genetic transformation
分类号
Q244 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
水稻OsVDAC5真核表达载体的构建及在酵母中的表达研究
2
作者
熊杰
程钢
刘学群
覃永华
王春台
机构
中南民族大学生命科学院生物技术国家民委重点实验室
出处
《安徽农业科学》
CAS
2012年第28期13707-13708,共2页
基金
国家自然科学基金项目(31170296)
文摘
[目的]构建水稻OsVDAC5的真核表达载体,对其进行真核表达研究。[方法]将Osvdac5基因与酵母表达载体pPIC3.5K连接,通过电转化的方法插入到毕氏酵母GS115中,筛选阳性重组菌株,通过0.5%的甲醇诱导使外源的水稻Osvdac5基因表达,并利用West-ern Blot鉴定表达蛋白的特异性。[结果]成功构建了Osvdac5::pPIC3.5K酵母表达载体,将其整合到酵母GS115基因组后,对其进行诱导表达,产物经Western Blot检测,证实了表达蛋白为OsVDAC5。[结论]该研究结果为进一步研究OsVDAC5蛋白的功能奠定了基础。
关键词
水稻
OsVDAC5
pPIC3.5K
酵母GS115
Keywords
Rice
OsVDAC5
pPIC3.5K
Yeast GS115
分类号
S511 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
水稻线粒体基因atp6超表达载体的构建及遗传转化
3
作者
熊磊
谭艳平
王春台
刘学群
机构
中南民族大学
生命
科学院
出处
《安徽农业科学》
CAS
2012年第25期12376-12378,共3页
基金
国家自然科学基金项目(31170226和31170296)
文摘
[目的]克隆水稻线粒体基因atp6,构建转基因表达载体,获得35S∷Rf1b5'∷atp6转基因水稻植株。[方法]设计目的基因的特异引物,采用TRIzol法提取水稻叶片总RNA,借助Toyobo反转录试剂盒反转录为cDNA,通过PCR扩增得到atp6全序列;将atp6连接到含线粒体信号肽(Rf1b5')的pCAMBIA1302双元表达载体上,采用农杆菌介导的愈伤组织侵染法进行水稻的遗传转化。[结果]利用目的基因atp6成功构建了35S∷Rf1b5'∷atp6植物表达载体,并获得了转atp6基因的阳性植株。[结论]为探讨水稻中超表达atp6对水稻生长的影响奠定基础。
关键词
水稻
ATP6
遗传转化
Keywords
Rice
atp6
Genetic transformation
分类号
S511 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水稻线粒体nad5基因超表达载体的构建和遗传转化
冷翔
谭艳平
王春台
刘学群
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
水稻OsVDAC5真核表达载体的构建及在酵母中的表达研究
熊杰
程钢
刘学群
覃永华
王春台
《安徽农业科学》
CAS
2012
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
水稻线粒体基因atp6超表达载体的构建及遗传转化
熊磊
谭艳平
王春台
刘学群
《安徽农业科学》
CAS
2012
0
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职称材料
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