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不同水稻品种OsVDAC8的表达模式比较与亚细胞定位分析
1
作者 蒋晓涵 覃永华 +2 位作者 刘学群 李开 王春台 《安徽农业科学》 CAS 2024年第4期81-86,共6页
[目的]研究OsVDAC8的理化性质和表达模式,为探究OsVDAC8的功能提供基础。[方法]用生物信息学分析OsVDAC8的结构特征及表达谱,然后通过定量PCR对3个不同水稻品种日本晴(NIP)、粤泰A(YTA)、粤泰B(YTB)不同发育时期的不同组织中OsVDAC8的... [目的]研究OsVDAC8的理化性质和表达模式,为探究OsVDAC8的功能提供基础。[方法]用生物信息学分析OsVDAC8的结构特征及表达谱,然后通过定量PCR对3个不同水稻品种日本晴(NIP)、粤泰A(YTA)、粤泰B(YTB)不同发育时期的不同组织中OsVDAC8的表达模式进行分析,并通过BiFC对亚细胞定位进行验证。[结果]OsVDAC8编码区全长1014 bp,编码337 aa,生物信息学分析结果显示,OsVDAC8是具有1个结构域的稳定的定位于线粒体的亲水蛋白,通过11次跨膜形成特异的桶状结构。在ATG上游含有13个与水稻生长发育及胁迫应答相关的顺式作用元件。RiceXPro和MSU Rice Genome Annotation Project水稻基因表达数据库分析结果表明,NIP中OsVDAC8在生殖生长期的茎和花序出现前后幼穗中表达水平最高,在胚乳和根中的表达量较低。对NIP、YTA、YTB 3个水稻品种中OsVDAC8的表达谱分析结果显示,OsVDAC8在3个水稻品种四叶期的叶鞘表达水平都非常高,在花粉内容物充实期都很低,但幼穗发育的不同时期3个品种中表达水平差异很大,NIP中幼穗发育的整个时期表达量比较稳定,YTB中表达量较低,而在YTA幼穗发育的中后期表达水平逐渐下降。亚细胞定位结果显示,OsVDAC8定位于线粒体,与预测结果一致。[结论]OsVDAC8在3个水稻品种中表达模式不同,YTB中整个幼穗发育过程中表达量较低,YTA幼穗发育的中后期表达水平逐渐下降,而NIP中幼穗发育的整个时期表达量都比较稳定。OsVDAC8定位于线粒体。 展开更多
关键词 水稻 OsVDAC8 表达模式 亚细胞定位
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产紫杉醇内生真菌MHZ-32的鉴定 被引量：13
2
作者 席晓圆 宋发军 +3 位作者 张鹏 赵盛英 雷世康 于鹏飞 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期429-434,共6页
从曼地亚红豆杉树皮内表皮分离获得一株内生真菌MHZ-32,通过高效液相色谱法检测发现,内生真菌MHZ-32的紫杉醇提取物中含有与紫杉醇标品(15.02 min)、巴卡亭Ⅲ标品(7.07min)保留时间相近的色谱特征峰.进一步通过质谱法检测发现,MHZ-32的... 从曼地亚红豆杉树皮内表皮分离获得一株内生真菌MHZ-32,通过高效液相色谱法检测发现,内生真菌MHZ-32的紫杉醇提取物中含有与紫杉醇标品(15.02 min)、巴卡亭Ⅲ标品(7.07min)保留时间相近的色谱特征峰.进一步通过质谱法检测发现,MHZ-32的紫杉醇提取物中具有与紫杉醇标品((M+Na)+=876)、巴卡亭Ⅲ标品((M+Na)+=609)相同的质谱特征峰,表明内生真菌MHZ-32可以产紫杉醇和巴卡亭Ⅲ.其紫杉醇和巴卡亭III的产量分别约为0.6μg/g和0.2μg/g(紫杉醇或巴卡亭Ⅲ/菌丝干重).并通过18S rRNA序列分析和形态学鉴定,将内生真菌MHZ-32初步鉴定为拟茎点霉属(Phomopsis sp.)真菌. 展开更多
关键词 紫杉醇 内生真菌 拟茎点霉属 巴卡亭Ⅲ
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产紫杉醇内生真菌N-15的分离及鉴定 被引量：10
3
作者 席晓圆 赵盛英 +3 位作者 张鹏 宋发军 雷世康 宁祎 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1219-1222,1283,共5页
产紫杉醇内生真菌的研究是解决紫杉醇药源紧缺问题的重要途径之一。本研究主要报道了从南方红豆杉树皮的内表皮中筛选得到一株产紫杉醇的内生真菌N-15,高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测结果表明其提取... 产紫杉醇内生真菌的研究是解决紫杉醇药源紧缺问题的重要途径之一。本研究主要报道了从南方红豆杉树皮的内表皮中筛选得到一株产紫杉醇的内生真菌N-15,高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测结果表明其提取物具有与紫杉醇及其前体巴卡亭Ⅲ、10-去乙酰巴卡亭Ⅲ标准品一致的色谱特征峰和保留时间,表明真菌N-15可以产紫杉醇及其两个前体物。质谱法(mass spectrometry,MS)检测结果表明,N-15的发酵液提取物具有和紫杉醇标准品相同质谱特征峰,进一步说明N-15可以产紫杉醇。通过结合形态特征观察和18S rRNA序列分析,将N-15初步确定为黑孢霉属(Nigrospora sp.)真菌。 展开更多
关键词 红豆杉 内生菌 紫杉醇 巴卡亭Ⅲ 黑孢霉属
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枝状枝孢霉MD2的Unigene A09801克隆与原核表达分析 被引量：3
4
作者 席晓圆 张鹏 +3 位作者 宋发军 于鹏飞 王琦 孟艳艳 《生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期1-4,共4页
真菌紫杉醇合成酶类基因的功能研究是构建紫杉醇高产工程菌株的前提。首次从产紫杉醇真菌——枝状枝孢霉MD2中克隆了Unigene A09801的DNA和c DNA全长序列(1674 bp),该基因不含有内含子,其编码产物含557个氨基酸,与GMC(glucose-methanol-... 真菌紫杉醇合成酶类基因的功能研究是构建紫杉醇高产工程菌株的前提。首次从产紫杉醇真菌——枝状枝孢霉MD2中克隆了Unigene A09801的DNA和c DNA全长序列(1674 bp),该基因不含有内含子,其编码产物含557个氨基酸,与GMC(glucose-methanol-choline)oxidoreductase一致性为56%,蛋白分子质量为61 291.8 u,等电点为5.47,不存在跨膜结构和信号肽。Unigene A09801以单拷贝方式存在于基因组中,其表达量受茉莉酸甲酯诱导表现出先降低后升高再降低的趋势,最高表达量出现在24 h。构建了Unigene A09801的原核表达载体,并初步优化其表达条件为:诱导温度32℃,IPTG浓度1.2 mmol/L,诱导时间4 h。结果为体外(in vitro)分析该基因编码蛋白的催化功能奠定了基础。 展开更多
关键词 枝状枝孢霉 紫杉醇 合成酶 原核表达
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2011年鄂西地区水稻稻瘟病菌遗传多样性的分析 被引量：3
5
作者 李泌 王春台 +1 位作者 周杰 徐鑫 《安徽农业科学》 CAS 2014年第14期4249-4251,共3页
[目的]扩大鄂西地区稻瘟病菌菌库,分析其群体结构。[方法]收集鄂西不同地区2011年间的感病稻秆,分离保存稻秆上的穗颈瘟病菌,通过RAPD、rep-Pot2-PCR、REMAP 3种标记对分离的菌株进行分子标记。[结果]从9个稻秆上共分离得到29个稻瘟病... [目的]扩大鄂西地区稻瘟病菌菌库,分析其群体结构。[方法]收集鄂西不同地区2011年间的感病稻秆,分离保存稻秆上的穗颈瘟病菌,通过RAPD、rep-Pot2-PCR、REMAP 3种标记对分离的菌株进行分子标记。[结果]从9个稻秆上共分离得到29个稻瘟病菌。遗传多样性分析结果表明,相似性水平在75%时,2011年供试菌株可分为5个遗传宗谱,宗谱3(7个菌株)和4(19个菌株)为优势宗谱,其余3个为稀有宗谱。[结论]2011年鄂西地区稻瘟病菌由5个遗传宗谱组成。 展开更多
关键词 水稻稻瘟病菌 鄂西地区 遗传多样性
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额尔齐斯河与黑龙江流域哲罗鲑群体遗传差异比较 被引量：3
6
作者 汪鄂洲 廖小林 +6 位作者 杨钟 胡兴坤 李伟涛 陈锋 朱滨 王红莹 黄道明 《水生态学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期75-82,共8页
由于拦河筑坝、水体污染以及过度捕捞等原因,哲罗鲑(Hucho taimen)野生资源急剧衰退,已被列入中国脊椎动物红色名录,急需开展哲罗鲑野生群体的恢复与保护工作,人工增殖放流已成为最重要的保护方式之一。为了开展科学有效的哲罗鲑人工增... 由于拦河筑坝、水体污染以及过度捕捞等原因,哲罗鲑(Hucho taimen)野生资源急剧衰退,已被列入中国脊椎动物红色名录,急需开展哲罗鲑野生群体的恢复与保护工作,人工增殖放流已成为最重要的保护方式之一。为了开展科学有效的哲罗鲑人工增殖放流工作,分析其不同来源群体的遗传多样性与遗传差异非常必要。通过测定来自我国额尔齐斯河(IR)、黑龙江(AR)以及人工繁殖(AP,亲本来源于黑龙江流域)的3个哲罗鲑群体线粒体DNA部分序列(COI和D-loop),并从GenBank下载来自俄罗斯鄂毕河(额尔齐斯河下游河流)、黑龙江流域的部分D-loop序列,比较额尔齐斯河与黑龙江流域哲罗鲑的遗传差异。结果表明,在测定的43尾个体中,线粒体DNA测序长度为2 626bp,共检测出37个多态位点,定义了18个单倍型,单倍型多样性为0.520~0.952,核苷酸多样性为0.00032~0.00167,其中IR群体的单倍型多样性最高,AR群体核苷酸多样性最高,而AP群体单倍型与核苷酸多样性均最低。分子方差分析(AMOVA)显示,77.19%的遗传变异来源于群体间,总遗传分化指数(Fst)为0.7719(P<0.01),表明两个流域的哲罗鲑群体间存在显著的遗传分化。无论是仅使用本研究测定的样品,还是加入从GenBank下载的俄罗斯哲罗鲑样品,聚类分析结果均表明存在两个明显的单倍型谱系分支,额尔齐斯河流域哲罗鲑为单独一支,黑龙江流域哲罗鲑聚为另一支。建议加强人工繁殖哲罗鲑的遗传管理和不同水域哲罗鲑增殖放流的遗传学论证,有效维持自然水体哲罗鲑的遗传多样性水平。 展开更多
关键词 哲罗鲑 线粒体DNA 额尔齐斯河流域 黑龙江流域 遗传差异
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外源一氧化氮对七叶一枝花种子萌发的影响 被引量：7
7
作者 李梅香 李海明 +3 位作者 宋发军 张丽 张蕊 孟艳艳 《安徽农业科学》 CAS 2018年第5期58-61,65,共5页
[目的]探究外源一氧化氮(NO)处理对七叶一枝花种子萌发及其相关生理指标的影响。[方法]检测了不同浓度硝普钠(NO供体)对七叶一枝花种子萌发的促进效果,并在此基础上,探讨了最适浓度硝普钠处理后七叶一枝花种子萌发过程中淀粉、可溶性蛋... [目的]探究外源一氧化氮(NO)处理对七叶一枝花种子萌发及其相关生理指标的影响。[方法]检测了不同浓度硝普钠(NO供体)对七叶一枝花种子萌发的促进效果,并在此基础上,探讨了最适浓度硝普钠处理后七叶一枝花种子萌发过程中淀粉、可溶性蛋白以及可溶性糖等含量的变化情况。[结果]100μmol/L硝普钠促进七叶一枝花种子的萌发效果最为明显;与对照相比,不同时间段下硝普纳处理组种子中,NO含量在45~90 d显著高于对照组;可溶性糖含量总体上高于对照,且在15~45 d有显著差异;淀粉含量在15~45 d显著低于对照组;β淀粉酶活力在萌发早期显著高于对照组,且总淀粉酶活力的变化与β淀粉酶活力变化趋势一致;可溶性蛋白含量分析中,处理组与对照组无显著差异,都有随萌发推进而呈现下降的趋势。[结论]100μmol/L硝普钠促进七叶一枝花种子的萌发可能是通过提高种子萌发早期淀粉酶的活性,促进淀粉的水解和可溶性糖的产生,以及提高萌发期间种子内源NO的含量而实现。 展开更多
关键词 七叶-枝花 -氧化氮 种子萌发 影响
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维管束发育相关基因sm-Nvas对水稻稻瘟病抗性分析 被引量：2
8
作者 张俊 卢卫 +2 位作者 谭艳平 刘学群 王春台 《安徽农业科学》 CAS 2019年第13期90-91,94,共3页
[目的]探究烟草维管束发育相关基因sm-Nvas对水稻稻瘟病的抗性。[方法]构建pCAMBIA1305.1-sm-Nvas双元表达载体,利用农杆菌介导的愈伤转化法转化水稻YTB,对转基因阳性植株接种稻瘟病菌后进行抗性观察。[结果]成功构建了pCAMBIA1305.1-sm... [目的]探究烟草维管束发育相关基因sm-Nvas对水稻稻瘟病的抗性。[方法]构建pCAMBIA1305.1-sm-Nvas双元表达载体,利用农杆菌介导的愈伤转化法转化水稻YTB,对转基因阳性植株接种稻瘟病菌后进行抗性观察。[结果]成功构建了pCAMBIA1305.1-sm-Nvas双元超表达载体,获得了转sm-NvasYTB植株。离体接种稻瘟病菌后转基因植株的病斑比受体品种YTB的小。[结论]转sm-Nvas基因水稻具有稻瘟病抗性。 展开更多
关键词 维管束 sm-Nvas 稻瘟病 抗性
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蛇足石杉产石杉碱甲内生真菌SNZ-12的分离及鉴定
9
作者 张宏庆 张恬 +5 位作者 张学智 徐文静 李浩东 刘盼 张鹏 宋发军 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2133-2137,共5页
为了获取具有应用价值的产石杉碱甲内生菌,本文从蛇足石杉分离得到60株内生真菌,采用高效液相色谱法和质谱法分别检测各个真菌的提取物,发现内生真菌SNZ-12的提取物具有与石杉碱甲标品相近的色谱特征峰和保留时间(8. 994 min)以及相同... 为了获取具有应用价值的产石杉碱甲内生菌,本文从蛇足石杉分离得到60株内生真菌,采用高效液相色谱法和质谱法分别检测各个真菌的提取物,发现内生真菌SNZ-12的提取物具有与石杉碱甲标品相近的色谱特征峰和保留时间(8. 994 min)以及相同的质谱特征峰((M+H)+=243. 1),说明内生真菌SNZ-12可以产石杉碱甲,其石杉碱甲产量约为1. 01 mg/L;并通过结合内生真菌SNZ-12的形态特征和18S r DNA序列分析,将其鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。本文结果为利用微生物发酵生产石杉碱甲研究提供了潜在的菌种资源。 展开更多
关键词 蛇足石杉 内生真菌 石杉碱甲 尖孢镰刀菌
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水稻新型胞质不育系L-orfH79与其同核异质YTA的比较
10
作者 李佳洋 田泽 +3 位作者 李威涛 刘学群 王春台 谭艳平 《安徽农业科学》 CAS 2019年第15期97-100,共4页
[目的]验证新型细胞质不育系L- orfH79 与其同核异质的近等基因系HL-CMS YTA的区别。[方法]用 orfH79和orf290 这2种分子标记对L- orfH79 和YTA进行分子鉴定,并比较其花粉染色特性、花粉育性、结实率及 orfH79 表达量。[结果]分子标记... [目的]验证新型细胞质不育系L- orfH79 与其同核异质的近等基因系HL-CMS YTA的区别。[方法]用 orfH79和orf290 这2种分子标记对L- orfH79 和YTA进行分子鉴定,并比较其花粉染色特性、花粉育性、结实率及 orfH79 表达量。[结果]分子标记鉴定结果显示L- orfH79只含有不育基因orfH79、不含有orf290 ,YTA同时含有 orfH79和orf290。 L- orfH79 花粉的淀粉沉积比YTA更少,L- orfH79 花粉大小均匀,而YTA的花粉形态不一。L- orfH79 花粉育性、套袋结实率及自然结实率(都低于10%)略高于YTA(都低于5%)。当L- orfH79中引入恢复基因Rf5或者Rf6后花粉形态和颜色都恢复正常。抽穗期 L- orfH79剑叶中的 orfH79 表达量低于YTA,在L- orfH79中引入Rf5或者Rf6后会减少orfH79的表达量。[结论] L- orfH79 是不同于YTA的新型细胞质雄性不育系,L- Rf5 、L- Rf6 可作为其恢复系。 展开更多
关键词 水稻 细胞质雄性不育系 L-orfH79 育性
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