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重楼种子外种皮提取物对水稻种子萌发及幼苗生长的影响 被引量:4
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作者 余晓东 张鹏 +3 位作者 宋发军 刘佳 席晓圆 于鹏飞 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第1期96-98,共3页
研究重楼种子外种皮提取物有机酸、生物碱、酚类对水稻种子萌发的影响。分别采用碱提酸沉法、酸提法、乙醇浸提法提取重楼种子外种皮中的有机酸、生物碱、酚类,梯度稀释后处理水稻种子,分析提取物对水稻种子48 h的萌发率、第10天对苗高... 研究重楼种子外种皮提取物有机酸、生物碱、酚类对水稻种子萌发的影响。分别采用碱提酸沉法、酸提法、乙醇浸提法提取重楼种子外种皮中的有机酸、生物碱、酚类,梯度稀释后处理水稻种子,分析提取物对水稻种子48 h的萌发率、第10天对苗高、鲜质量以及胚根长的影响。以蒸馏水(CK)作对照。试验结果,3类提取物与CK相比,在2.5~50.0 mg/m L的处理浓度范围内对水稻种子48 h的萌发率、第10天的苗高、鲜质量、胚根长都有抑制作用。在2.5~5.0 mg/m L的低浓度范围内,3类提取物对种子萌发率的抑制作用相差不大,对苗高、鲜质量抑制作用的强弱顺序依次是酚类〉生物碱〉有机酸,而在10~50 mg/m L的高浓度范围内,3类提取物对种子萌发率、苗高、鲜质量的抑制作用的强弱顺序依次为:生物碱〉酚类〉有机酸。此外,还发现每类提取物对胚根长度的抑制作用要强于对其他指标的抑制,且在整个处理浓度范围内抑制作用的强弱顺序是:生物碱〉酚类〉有机酸。通过研究明确了3类物质对种子萌发抑制作用的效果,确定了有机酸、生物碱、酚类是存在于重楼种子外种皮中的3类萌发抑制物,研究结果为深入研究重楼种子的休眠机制提供了理论依据。 展开更多
关键词 重楼种子 外种皮 有机酸 生物碱 酚类 萌发
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2011年鄂西地区水稻稻瘟病菌遗传多样性的分析 被引量:3
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作者 李泌 王春台 +1 位作者 周杰 徐鑫 《安徽农业科学》 CAS 2014年第14期4249-4251,共3页
[目的]扩大鄂西地区稻瘟病菌菌库,分析其群体结构。[方法]收集鄂西不同地区2011年间的感病稻秆,分离保存稻秆上的穗颈瘟病菌,通过RAPD、rep-Pot2-PCR、REMAP 3种标记对分离的菌株进行分子标记。[结果]从9个稻秆上共分离得到29个稻瘟病... [目的]扩大鄂西地区稻瘟病菌菌库,分析其群体结构。[方法]收集鄂西不同地区2011年间的感病稻秆,分离保存稻秆上的穗颈瘟病菌,通过RAPD、rep-Pot2-PCR、REMAP 3种标记对分离的菌株进行分子标记。[结果]从9个稻秆上共分离得到29个稻瘟病菌。遗传多样性分析结果表明,相似性水平在75%时,2011年供试菌株可分为5个遗传宗谱,宗谱3(7个菌株)和4(19个菌株)为优势宗谱,其余3个为稀有宗谱。[结论]2011年鄂西地区稻瘟病菌由5个遗传宗谱组成。 展开更多
关键词 水稻稻瘟病菌 鄂西地区 遗传多样性
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北虫草CNZ虫草酸提取方法的筛选和优化 被引量:1
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作者 林爱华 苗莉云 +3 位作者 王俊玲 李惠 宋发军 张鹏 《湖北农业科学》 2020年第9期141-144,共4页
为获得北虫草(Cordyceps militaris)CNZ虫草酸最适的提取方法,比较了6种虫草酸提取方法,结果表明超声辅助醇提法虫草酸的得率最高,达113.31 mg/g,可作为初始提取方法。进一步通过单因素试验和正交试验优化提取次数、固液比、超声时间、... 为获得北虫草(Cordyceps militaris)CNZ虫草酸最适的提取方法,比较了6种虫草酸提取方法,结果表明超声辅助醇提法虫草酸的得率最高,达113.31 mg/g,可作为初始提取方法。进一步通过单因素试验和正交试验优化提取次数、固液比、超声时间、乙醇浓度等条件,获得北虫草CNZ虫草酸提取条件为:乙醇浓度20%(体积分数),固液比1∶10(g∶mL),超声时间20 min,提取次数3次;在优化的提取条件下,北虫草CNZ虫草酸得率为161.06 mg/g,与初始提取条件相比提高了42.1%。 展开更多
关键词 北虫草(Cordyceps militaris) 虫草酸 提取方法 优化
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红花油脂相关性状与SSR分子标记的关联分析 被引量:9
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作者 向妮艳 湛蔚 +5 位作者 陈贤军 黄稳 覃尔岱 李刚 严兴初 覃瑞 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1506-1516,共11页
红花(Carthamus tinctorius L.)是一种富含不饱和脂肪酸的重要油料作物。为寻找与红花油脂性状相关联的分子标记,本研究利用已经开发的多态性良好的48对SSR引物,系统分析了来自27个国家74份红花种质资源的遗传多样性和群体结构,并结合... 红花(Carthamus tinctorius L.)是一种富含不饱和脂肪酸的重要油料作物。为寻找与红花油脂性状相关联的分子标记,本研究利用已经开发的多态性良好的48对SSR引物,系统分析了来自27个国家74份红花种质资源的遗传多样性和群体结构,并结合红花油脂相关性状的表型数据,应用TASSEL3.0中的一般线性模型(GLM,general linear model)和混合线性模型(MLM,mixed linear model)对红花油脂性状和标记进行关联分析。研究结果显示:48对SSR分子标记的多态性信息含量(PIC)变异范围为0.0632~0.3750,平均值为0.2937;基因多样性指数变异范围为0.0653~0.5000,平均值为0.3700。UPGMA聚类将74份红花分为3个类群,分别包括7份、52份和15份材料。群体结构分析结果显示,74份红花可分为3个亚群,各亚群分别包括7份、55份和12份材料。在显著水平P<0.05条件下,通过GLM和MLM两种模型都检测到了18个与油脂性状相关联的分子标记,各标记对表型变异的解释率变幅分别为5.42%~20.69%和4.35%~20.69%。两种分析方法相比,除标记Ct589和Ct178不同外,剩余16个标记在两种分析方法中都能检测到。研究表明:所选74份红花种质资源的群体遗传多样性丰富,结构差异性显著,适合用于红花油脂相关性状的关联分析。本研究为高含油量红花辅助育种提供了新的分子标记资源。 展开更多
关键词 红花 SSR标记 油脂相关性状 关联分析
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水稻线粒体基因orf290功能的初步研究 被引量:2
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作者 杨梦醒 姜慧 +3 位作者 田泽 刘学群 谭艳平 王春台 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1-6,共6页
从红莲型不育系粤泰A(YTA)线粒体基因组中克隆并鉴定了一个6.7kb的CMS相关片段HLsp1,序列预测发现了2个orf,其中一个编码290个氨基酸,暂命名为orf290。构建带有线粒体信号肽的超表达载体35S::Rf1b5'::orf290,通过农杆菌介导转化受... 从红莲型不育系粤泰A(YTA)线粒体基因组中克隆并鉴定了一个6.7kb的CMS相关片段HLsp1,序列预测发现了2个orf,其中一个编码290个氨基酸,暂命名为orf290。构建带有线粒体信号肽的超表达载体35S::Rf1b5'::orf290,通过农杆菌介导转化受体保持系粤泰B(YTB),以水稻的单拷贝基因蔗糖磷酸合成酶基因(SPS)作为内参基因,以潮霉素抗性基因(hpt)作为目的检测基因,基于实时荧光定量PCR鉴定转基因T0代植株中外源基因的拷贝数,并对阳性植株进行花粉镜检和结实率统计。结果显示获得了2株单拷贝转35S::Rf1b5′::orf290植株,并且都有orf290的表达。单拷贝超表达orf290植株的平均花粉可育度30.8%,平均套袋结实率41.6%。这些结果初步证实,线粒体基因orf290可能与水稻细胞质雄性不育相关。 展开更多
关键词 水稻 细胞质雄性不育 线粒体 orf290 超表达
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外源NO对重楼种子活力及超弱发光的影响 被引量:2
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作者 李海明 李梅香 +4 位作者 孟艳艳 宋发军 戴甲培 李泽华 耿红 《广东农业科学》 CAS 2019年第2期32-38,共7页
【目的】探究NO对重楼种子萌发质量的改善效果,解决重楼种子萌发困难的问题,为重楼种子促萌研究提供基础。【方法】以滇重楼和七叶一枝花的种子为研究对象,采用100 μmol/L NO供体—硝普钠处理种子,以相同条件清水处理为对照,记录重楼... 【目的】探究NO对重楼种子萌发质量的改善效果,解决重楼种子萌发困难的问题,为重楼种子促萌研究提供基础。【方法】以滇重楼和七叶一枝花的种子为研究对象,采用100 μmol/L NO供体—硝普钠处理种子,以相同条件清水处理为对照,记录重楼种子萌发过程的形态变化和发芽率,并借助电子倍增式CCD的超弱光图像探测系统,检测种子在萌发期间的自发超弱发光强度,研究硝普钠处理后重楼种子自发超弱发光强度的变化。【结果】硝普钠处理的种子比对照提前20 d萌发;在种子萌发后0~30 d,对照与硝普钠处理的种子自发超弱发光无显著差异;在萌发培养后40~60 d,硝普钠处理种子的自发超弱发光强度明显高于对照。【结论】在重楼种子萌发过程中,硝普钠处理具有明显改善种质、促进种子萌发的作用。 展开更多
关键词 重楼种子 一氧化氮(NO) 自发超弱发光 电子倍增CCD
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水稻可溶性OsVDAC5蛋白的外源表达及鉴定 被引量:1
7
作者 李双红 谌鑫 +2 位作者 程钢 覃永华 王春台 《湖北农业科学》 2016年第11期2921-2925,共5页
通过生物信息学分析确定水稻(Oryza sativa L.)Os VDAC5的可溶性肽段,将相应的编码区克隆于p GEX-4T-1原核表达载体中,进行IPTG诱导表达和GST亲和层析纯化,利用SDS-PAGE和Western Blot检测目的蛋白。结果表明,成功构建的p GEX-4T-1-Os V... 通过生物信息学分析确定水稻(Oryza sativa L.)Os VDAC5的可溶性肽段,将相应的编码区克隆于p GEX-4T-1原核表达载体中,进行IPTG诱导表达和GST亲和层析纯化,利用SDS-PAGE和Western Blot检测目的蛋白。结果表明,成功构建的p GEX-4T-1-Os VDAC5(1-75aa)原核表达载体,经过体外IPTG诱导,在35 k Da处可检测到可溶性目的蛋白,并获得外源蛋白表达的最适温度为15℃和最佳诱导时间为8 h;经过GST亲和层析,SDS-PAGE可检测到较为单一的蛋白条带,得到纯化的GST-Os VDAC5(1-75aa)融合蛋白。 展开更多
关键词 水稻(Oryza SATIVA L.) OS VDAC5 可溶性表达 亲和层析
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水稻HL-CMS细胞质雄性不育基因的体外转录及Northern Blot检测 被引量:1
8
作者 华宇峰 刘京 +2 位作者 王春台 刘学群 谭艳平 《安徽农业科学》 CAS 2014年第12期3497-3498,3501,共3页
[目的]通过基因克隆和体外转录技术获得水稻红莲型细胞质雄性不育(HL-CMS)不育系粤泰A(YTA)中的2个细胞质雄性不育基因orf216和orfH79的RNA,为Northern Blot检测提供阳性定量标准品,并可作为凝胶阻滞试验的底物,用于研究与恢复基因编码... [目的]通过基因克隆和体外转录技术获得水稻红莲型细胞质雄性不育(HL-CMS)不育系粤泰A(YTA)中的2个细胞质雄性不育基因orf216和orfH79的RNA,为Northern Blot检测提供阳性定量标准品,并可作为凝胶阻滞试验的底物,用于研究与恢复基因编码产物的相互作用,从而为阐释不育基因与恢复基因的相互作用分子机制奠定基础。[方法]以红莲型胞质雄性不育基因orf216和orfH79的特异引物,利用不育系YTA为材料,PCR扩增获得相应片段,分别连接至pGEM-T Easy质粒并筛选阳性重组质粒,测序鉴定后酶切线性化,补平粘性末端,以rN4为底物、用依赖于DNA的RNA聚合酶进行体外转录,转录产物用DNase处理除去DNA模板,纯化并测定RNA浓度,并用Northern Blot验证。[结果]获得了细胞质雄性不育基因orf216和orfH79各自的RNA,经检测orf216浓度为1.286μg/μl,A260/A280为2.01;orfH79浓度为1.006μg/μl,A260/A280为2.10。[结论]运用体外转录技术获得的RNA片段条带单一,纯度较高,可用于体外大量获取目的 RNA。 展开更多
关键词 水稻 红莲型细胞质雄性不育 体外转录 NORTHERN BLOT
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水稻白叶枯病抗性基因Xa31(t)候选基因表达载体的构建
9
作者 赵传纪 刘学群 +1 位作者 王春台 徐鑫 《安徽农业科学》 CAS 2013年第15期6611-6612,6629,共3页
[目的]构建水稻白叶枯病抗性基因Xa31(t)候选基因的表达载体。[方法]利用长片段PCR在抗白叶枯病水稻品种扎昌龙中扩增长10.6 kb的候选基因,将其通过Asc I单酶切克隆至植物表达载体pCAMBIA1300中,并对阳性克隆进行质粒PCR、酶切检测和测... [目的]构建水稻白叶枯病抗性基因Xa31(t)候选基因的表达载体。[方法]利用长片段PCR在抗白叶枯病水稻品种扎昌龙中扩增长10.6 kb的候选基因,将其通过Asc I单酶切克隆至植物表达载体pCAMBIA1300中,并对阳性克隆进行质粒PCR、酶切检测和测序分析。[结果]试验成功构建了水稻白叶枯病抗性基因Xa31(t)候选基因的表达载体。[结论]该研究为进一步研究Xa31(t)基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 水稻 白叶枯病 候选基因 长片段PCR 表达载体
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水稻HL-CMS育性恢复蛋白的原核表达及纯化
10
作者 傅静 谭艳平 +1 位作者 刘学群 王春台 《湖北农业科学》 2015年第23期6047-6051,共5页
将水稻目地基因Rf6连接到载体PMD-18T上,测序正确后将目的片段连接到含有GST标签的p GEX-6P-1原核表达载体上,确认正确的重组质粒转化到BL21菌株;通过LB培养至对数生长期后,加入IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western Blot检测是否诱导... 将水稻目地基因Rf6连接到载体PMD-18T上,测序正确后将目的片段连接到含有GST标签的p GEX-6P-1原核表达载体上,确认正确的重组质粒转化到BL21菌株;通过LB培养至对数生长期后,加入IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western Blot检测是否诱导出目的条带,并且经过Glutathione Resin亲和层析系统纯化及检测。结果表明,20℃,4 h,0.3 mmol/L IPTG条件下可诱导出可溶性蛋白,经纯化得到可溶性带GST标签的融合蛋白。 展开更多
关键词 水稻 恢复基因(Rf6) 融合蛋白GST-RF6 原核表达
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水稻OsV3IP2和OsV3IP3原核表达与鉴定
11
作者 程英 胡颖 +2 位作者 覃永华 程钢 王春台 《湖北农业科学》 2017年第17期3349-3352,共4页
通过生物信息学分析确定OsV3IP2和OsV3IP3的可溶性肽段,获得可溶性的OsV3IP2和OsV3IP3外源表达蛋白质,将相应的编码区克隆于原核表达载体p ET32a中,进行IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白质。结果表明,利用生物信息... 通过生物信息学分析确定OsV3IP2和OsV3IP3的可溶性肽段,获得可溶性的OsV3IP2和OsV3IP3外源表达蛋白质,将相应的编码区克隆于原核表达载体p ET32a中,进行IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白质。结果表明,利用生物信息学软件对蛋白质的二级结构进行预测,将OsV3IP2、OsV3IP3分别分为2个和4个部分。将其分别克隆到p ET32a后,采用0.2 mol/L IPTG在10、20、30℃诱导表达。经SDS-PAGE和Western Blot分析,证明OsV3IP2-1、OsV3IP 2-2、OsV3IP 3-1表达的融合蛋白存在于上清液中,而OsV3IP 3-2、OsV3IP 3-3表达的融合蛋白存在于沉淀中,获得了OsV3IP2-1、OsV3IP 2-2、OsV3IP 3-1可溶性目的蛋白,为进一步体外验证OsVDAC3与OsV3IP2、OsV3IP3的互作奠定了基础。 展开更多
关键词 水稻 OS V3IP2-3 诱导表达 SDS PAGE WESTERN BLOT
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转sm-Ngt1基因水稻遗传稳定性分析
12
作者 夏栋 卢卫 +3 位作者 张俊 谭艳平 刘学群 王春台 《湖北农业科学》 2022年第4期24-28,共5页
为检测转sm-Ngt1基因株系后代的遗传稳定性,对连续2年种植的15个转sm-Ngt1基因T4代水稻株系进行了阳性鉴定,并以农业部要求的9对引物对转基因标记物进行检测,同时对其农艺性状进行了统计。结果显示,15个转基因株系中,编号1、3、5、7-9、... 为检测转sm-Ngt1基因株系后代的遗传稳定性,对连续2年种植的15个转sm-Ngt1基因T4代水稻株系进行了阳性鉴定,并以农业部要求的9对引物对转基因标记物进行检测,同时对其农艺性状进行了统计。结果显示,15个转基因株系中,编号1、3、5、7-9、11-15这11个转基因株系中含有sm-Ngt1基因,除编号8株系外,sm-Ngt1基因在其余10个株系中均能稳定遗传;在9对检测标记物引物中5对能扩增出特异性条带,其中3对引物(NOS-F1/NOS-R1、T35S-F1/T35S-R1、NPTF68/NPTR356)在所有转基因水稻株系后代中(T5、T6代)都能扩增出特异性条带,2对引物(35S-F1/35S-R1、HPTF226/HPTF69)检测结果与sm-Ngt1检测结果相同。结果表明编号1、3、5、7、9、11-15的10个转基因株系中含有35S启动的sm-Ngt1基因和HPT基因能稳定遗传,且这些转基因株系生育期、株高、结实率及千粒重与受体品种之间差异不显著。 展开更多
关键词 sm-Ngt1 水稻 遗传稳定性 农艺性状
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