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17β-雌二醇下调人成骨细胞CTGF表达的信号转导机制研究
被引量：
5
1
作者
隋国良
彭依群
+2 位作者
翟木绪
何玉玲
廖二元
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2006年第5期443-446,共4页
目的探讨17β-雌二醇下调人成骨细胞CTGF表达的信号转导机制。方法人成骨细胞分别用10-8mol/L E2及雌激素受体拮抗剂ICI182780、PKA阻断剂H-89、PKC阻断剂H-7、NF-κΒ阻断剂PDTC、PKA活化剂forskolin干预24h,采用Northern blotting、We...
目的探讨17β-雌二醇下调人成骨细胞CTGF表达的信号转导机制。方法人成骨细胞分别用10-8mol/L E2及雌激素受体拮抗剂ICI182780、PKA阻断剂H-89、PKC阻断剂H-7、NF-κΒ阻断剂PDTC、PKA活化剂forskolin干预24h,采用Northern blotting、Western blotting分析CTGF mRNA、蛋白表达水平的变化。结果10-8mol/L雌二醇可明显下调人成骨细胞CTGF mRNA及蛋白的表达;PKA阻断剂H-89可完全阻断雌二醇对CTGF的降调节作用,而雌激素受体拮抗剂ICI182780、PKC阻断剂H-7、NF-κΒ阻断剂PDTC对雌二醇介导的CTGF降调节无明显作用。PKA活化剂forskolin可明显下调人成骨细胞CTGF mRNA、蛋白的表达,雌二醇组与forskolin组相比,CTGF mRNA、蛋白的水平无明显差异。结论17β-雌二醇下调人成骨细胞CTGF表达由PKA介导,雌激素核受体、PKC、NF-κΒ信号转导通路均不参与雌激素介导的CTGF降调节。
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关键词
17Β-雌二醇
结缔组织生长因子
成骨细胞
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职称材料
RNA干扰沉默CTGF表达对人成骨样MG63细胞Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达的影响
被引量：
2
2
作者
隋国良
彭依群
+1 位作者
翟木绪
廖二元
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2007年第7期469-473,共5页
目的本研究将利用RNA干扰技术,阻断CTGF在人成骨样MG63细胞中的表达,观察CTGF降表达后对人成骨样MG63细胞Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶 mRNA表达的影响。方法针对人CTGF mRNA440、875、910位点设计、合成3对21核苷酸siRNA(siRNA1、siRNA2、siRN...
目的本研究将利用RNA干扰技术,阻断CTGF在人成骨样MG63细胞中的表达,观察CTGF降表达后对人成骨样MG63细胞Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶 mRNA表达的影响。方法针对人CTGF mRNA440、875、910位点设计、合成3对21核苷酸siRNA(siRNA1、siRNA2、siRNA3);在阳离子脂质体介导下转染人成骨样MG63细胞,以空白及非特异性siRNA作为对照,转染48h后收集细胞。采用Northern杂交研究CTGF mRNA表达水平的改变,半定量RT-PCR观察Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达的改变,Western blotting观察CTGF蛋白表达的变化。MTT法测定RNA干扰后人成骨样MG63细胞活力的改变。结果空白对照组相比,转染siRNA1、siRNA3的MG63细胞CTGF mRNA和蛋白表达明显下调,转染siRNA2及非特异性siRNA的MG63细胞CTGF的表达无明显变化。转染siRNA1、siRNA3的MG63细胞Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达明显下调,细胞活力明显降低。结论针对人CTGF mRNA设计、合成的siRNA可有效抑制人成骨样MG63细胞CTGF的转录和表达;CTGF表达下调可抑制MG63细胞表型标志物Ⅰ型胶原、ALP mRNA的表达,降低MG63细胞活力,这说明CTGF可能在维持骨代谢平衡中具有重要的作用。
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关键词
RNA干扰
小干扰RNA
结缔组织生长因子
Ⅰ型胶原
碱性磷酸酶
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职称材料
题名
17β-雌二醇下调人成骨细胞CTGF表达的信号转导机制研究
被引量：
5
1
作者
隋国良
彭依群
翟木绪
何玉玲
廖二元
机构
中南大学附属湘雅二医院代谢内分泌研究所
出处
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2006年第5期443-446,共4页
基金
国家自然科学基金资助(30572078)
文摘
目的探讨17β-雌二醇下调人成骨细胞CTGF表达的信号转导机制。方法人成骨细胞分别用10-8mol/L E2及雌激素受体拮抗剂ICI182780、PKA阻断剂H-89、PKC阻断剂H-7、NF-κΒ阻断剂PDTC、PKA活化剂forskolin干预24h,采用Northern blotting、Western blotting分析CTGF mRNA、蛋白表达水平的变化。结果10-8mol/L雌二醇可明显下调人成骨细胞CTGF mRNA及蛋白的表达;PKA阻断剂H-89可完全阻断雌二醇对CTGF的降调节作用,而雌激素受体拮抗剂ICI182780、PKC阻断剂H-7、NF-κΒ阻断剂PDTC对雌二醇介导的CTGF降调节无明显作用。PKA活化剂forskolin可明显下调人成骨细胞CTGF mRNA、蛋白的表达,雌二醇组与forskolin组相比,CTGF mRNA、蛋白的水平无明显差异。结论17β-雌二醇下调人成骨细胞CTGF表达由PKA介导,雌激素核受体、PKC、NF-κΒ信号转导通路均不参与雌激素介导的CTGF降调节。
关键词
17Β-雌二醇
结缔组织生长因子
成骨细胞
Keywords
17β-estrodiol
Connective tissue growth factor
Human
Osteoblast
分类号
R977.12 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
RNA干扰沉默CTGF表达对人成骨样MG63细胞Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达的影响
被引量：
2
2
作者
隋国良
彭依群
翟木绪
廖二元
机构
中南大学附属湘雅二医院代谢内分泌研究所
现在山东省烟台市烟台山
医院
出处
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2007年第7期469-473,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30572078
30600661)
文摘
目的本研究将利用RNA干扰技术,阻断CTGF在人成骨样MG63细胞中的表达,观察CTGF降表达后对人成骨样MG63细胞Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶 mRNA表达的影响。方法针对人CTGF mRNA440、875、910位点设计、合成3对21核苷酸siRNA(siRNA1、siRNA2、siRNA3);在阳离子脂质体介导下转染人成骨样MG63细胞,以空白及非特异性siRNA作为对照,转染48h后收集细胞。采用Northern杂交研究CTGF mRNA表达水平的改变,半定量RT-PCR观察Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达的改变,Western blotting观察CTGF蛋白表达的变化。MTT法测定RNA干扰后人成骨样MG63细胞活力的改变。结果空白对照组相比,转染siRNA1、siRNA3的MG63细胞CTGF mRNA和蛋白表达明显下调,转染siRNA2及非特异性siRNA的MG63细胞CTGF的表达无明显变化。转染siRNA1、siRNA3的MG63细胞Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达明显下调,细胞活力明显降低。结论针对人CTGF mRNA设计、合成的siRNA可有效抑制人成骨样MG63细胞CTGF的转录和表达;CTGF表达下调可抑制MG63细胞表型标志物Ⅰ型胶原、ALP mRNA的表达,降低MG63细胞活力,这说明CTGF可能在维持骨代谢平衡中具有重要的作用。
关键词
RNA干扰
小干扰RNA
结缔组织生长因子
Ⅰ型胶原
碱性磷酸酶
Keywords
RNA interfering
Small interfering RNA
Connective tissue growth factor
Type 1 collagen
Alkaline phosphatase
分类号
R681 [医药卫生—骨科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
17β-雌二醇下调人成骨细胞CTGF表达的信号转导机制研究
隋国良
彭依群
翟木绪
何玉玲
廖二元
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2006
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
RNA干扰沉默CTGF表达对人成骨样MG63细胞Ⅰ型胶原、ALP mRNA表达的影响
隋国良
彭依群
翟木绪
廖二元
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2007
2
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