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太空诱变宫颈癌细胞的生物学研究被引量：5: 1; 作者杨丞李官成 +3 位作者李跃辉胡锦跃肖艳张志杰《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期380-386,共7页; 目的:研究太空诱变宫颈癌细胞的生物学特性。方法:将搭载于“神舟四号”飞船飞行返地后的宫颈癌Caski细胞进行单克隆化,观察细胞形态、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长曲线初步筛选出变异株并测定其倍增时间、流式细胞仪检测细胞周... 展开更多; 关键词空间环境肿瘤细胞宫颈癌生物学特性; 在线阅读下载PDF 职称材料

生物信息学方法大规模筛选肿瘤差异表达基因被引量：1: 2; 作者刘妍李官成《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期694-700,共7页; 目的利用数据库中已有的基因信息快速筛选鉴定出潜在的肿瘤相关基因。方法利用EST数据库中的基因信息,采用数字化差异显示(DDD)方法,对17种不同肿瘤组织的全基因组进行筛选。结果获得了130个上调基因和159个下调基因,大多为编码细胞骨... 展开更多; 关键词生物信息学肿瘤数字化差异显示 EST; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源鼻咽癌双价抗独特型抗体疫苗的制备及活性鉴定被引量：1: 3; 作者王甲甲郭锋杰 +1 位作者李跃辉李官成《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期667-670,共4页; 目的：构建全人源鼻咽癌双价抗独特型抗体原核表达载体，并对其产物作初步鉴定。方法：利用分子克隆技术依次将G22，150插入到原核表达载体pET25b（＋）中，经菌落PCR，双酶切验证并测序。阳性重组子转化入表达菌株E．coliBL21（DE3），... 展开更多; 关键词鼻咽癌抗独特型抗体疫苗双价原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

用体外致敏联合EB病毒转化技术构建抗肝癌的人源Fab噬菌体抗体库被引量：2: 4; 作者水漩李官成 +2 位作者李跃辉黄建赵艳《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期364-367,共4页; 目的构建抗肝癌的人源Fab噬菌体抗体库。方法体外致敏并用EB病毒(EBV)转化肝癌患者的外周血单个核细胞(PBMC)。RT-PCR扩增人抗体轻链和重链Fd段基因,将抗体基因分别与载体pComb3连接后,电转化大肠杆菌XLI-Blue,构建噬菌体呈现型Fab抗体... 展开更多; 关键词 EB病毒转化噬菌体抗体库肝癌 FAB抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名太空诱变宫颈癌细胞的生物学研究被引量：5: 1; 作者杨丞李官成李跃辉胡锦跃肖艳张志杰; 机构中南大学肿瘤研究所免疫室; 出处《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期380-386,共7页; 基金 973重大基础研究前期研究专项(CA04200) 国家自然科学基金(30672352)~~; 文摘目的:研究太空诱变宫颈癌细胞的生物学特性。方法:将搭载于“神舟四号”飞船飞行返地后的宫颈癌Caski细胞进行单克隆化,观察细胞形态、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长曲线初步筛选出变异株并测定其倍增时间、流式细胞仪检测细胞周期、软琼脂细胞集落培养和裸鼠成瘤实验检测空间诱变细胞的恶性表型。结果:单克隆化后获得1440株细胞克隆,发现空间诱变株出现多种细胞形态;MTT法筛选出4株变异株,其中有两株编号为44F10和17E3的细胞克隆生长速度快于对照组,其细胞周期分布改变,G1期细胞减少,S期细胞增多;而另两株编号为48A9和31F2的细胞克隆生长速度慢于对照组,其细胞周期分布规律与以上两株相反;地面正常对照细胞,地面模拟对照细胞,44F10,17E3,48A9和31F2细胞的平均倍增时间依次为56.54,58.44,52.96,51.46,101.76和88.47h,其中44F10和17E3与对照细胞组比较平均倍增时间降低但无统计学意义,而48A9和31F2与对照细胞之间的差异有统计学意义(P<0.05);软琼脂细胞集落形成率依次为9.7%,9.3%,14.7%,12.1%,0和0.1%,诱变细胞与对照细胞之间的差异有统计学意义(P<0.01);将6组细胞分别注射入裸鼠体内,47d后处死动物,各组裸鼠成瘤率为100%;剥离出肿瘤组织并称重,各组瘤块平均重量依次为0.066,0.066,0.175,0.249,0.011和0.018g,变异组与两对照组的细胞成瘤能力比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:实验证明空间环境可影响肿瘤细胞的生理特性,并且诱导细胞的变异是多向性的。; 关键词空间环境肿瘤细胞宫颈癌生物学特性; Keywords space environment tumor cells cervical carcinoma biological properties; 分类号 R737.33 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名生物信息学方法大规模筛选肿瘤差异表达基因被引量：1: 2; 作者刘妍李官成; 机构中南大学肿瘤研究所肿瘤免疫室; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期694-700,共7页; 文摘目的利用数据库中已有的基因信息快速筛选鉴定出潜在的肿瘤相关基因。方法利用EST数据库中的基因信息,采用数字化差异显示(DDD)方法,对17种不同肿瘤组织的全基因组进行筛选。结果获得了130个上调基因和159个下调基因,大多为编码细胞骨架蛋白、核糖体亚单位的基因以及与物质代谢、细胞周期、信号传导、调节转录和翻译过程有密切关系的基因。这些基因在12号染色体上出现频率最高,而在21号和Y染色体上很少出现。结论生物信息学筛选是一种快速有效的筛选方法。本实验所得结果对今后肿瘤标志物的鉴定奠定了基础,也为肿瘤标志物的筛选策略提供了新的思路。; 关键词生物信息学肿瘤数字化差异显示 EST; Keywords in silico tumor digital differential display EST; 分类号 R735.7 [医药卫生—肿瘤] R734.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源鼻咽癌双价抗独特型抗体疫苗的制备及活性鉴定被引量：1: 3; 作者王甲甲郭锋杰李跃辉李官成; 机构中南大学肿瘤研究所免疫室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期667-670,共4页; 基金中南大学创新基金(2009bsxt059); 文摘目的：构建全人源鼻咽癌双价抗独特型抗体原核表达载体，并对其产物作初步鉴定。方法：利用分子克隆技术依次将G22，150插入到原核表达载体pET25b（＋）中，经菌落PCR，双酶切验证并测序。阳性重组子转化入表达菌株E．coliBL21（DE3），经IPTG诱导表达后，表达的重组蛋白经Histag纯化试剂盒纯化后复性。用Western blot方法鉴定G22-150双价蛋白的表达，ELISA方法分析其蛋白活性，并进一步观察其对外周血单个核细胞的刺激增殖情况。结果：构建的原核表达载体pET25b—G22—150经测序验证，序列正确。双价蛋白G22—150以包涵体形式高效表达，经纯化后纯度达90％以上。Westernblot鉴定表达的蛋白相对分子质量（Ms）约42000，与预期相符。ELISA鉴定复性后的蛋白已恢复活性，并能在体外刺激外周血单个核细胞的增殖。结论：成功获得了有活性的双价抗独特型抗体，为临床对鼻咽癌进行主动免疫治疗提供了理论基础。; 关键词鼻咽癌抗独特型抗体疫苗双价原核表达; Keywords nasopharyngeal carcinoma anti-idiotype antibody vaccine bivalent prokaryotic expression; 分类号 R739.6 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名用体外致敏联合EB病毒转化技术构建抗肝癌的人源Fab噬菌体抗体库被引量：2: 4; 作者水漩李官成李跃辉黄建赵艳; 机构中南大学肿瘤研究所免疫室; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期364-367,共4页; 基金湖南省卫生厅科研基金重点资助项目(No.A2003001); 文摘目的构建抗肝癌的人源Fab噬菌体抗体库。方法体外致敏并用EB病毒(EBV)转化肝癌患者的外周血单个核细胞(PBMC)。RT-PCR扩增人抗体轻链和重链Fd段基因,将抗体基因分别与载体pComb3连接后,电转化大肠杆菌XLI-Blue,构建噬菌体呈现型Fab抗体库。结果经EBV转化的4例肝癌患者PBMC,ELISA检测均有抗肝癌抗体产生;经PCR扩增出13条轻链基因片段(κ、λ)和28条重链Fd基因片段(γ);电转化构建的噬菌体抗体库库容为1.7×107puf/mL;Fab基因的重组率约为100%。结论用体外致敏法结合噬菌体抗体库技术,成功构建了全人源抗肝癌Fab组合抗体文库。; 关键词 EB病毒转化噬菌体抗体库肝癌 FAB抗体; Keywords EBV immortalization phage antibody library liver cancer Fab fragment; 分类号 R739.63 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	太空诱变宫颈癌细胞的生物学研究	杨丞李官成李跃辉胡锦跃肖艳张志杰	《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2007	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	生物信息学方法大规模筛选肿瘤差异表达基因	刘妍李官成	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人源鼻咽癌双价抗独特型抗体疫苗的制备及活性鉴定	王甲甲郭锋杰李跃辉李官成	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	用体外致敏联合EB病毒转化技术构建抗肝癌的人源Fab噬菌体抗体库	水漩李官成李跃辉黄建赵艳	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料