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UPLC-MS/MS测定生物样本中替来他明及其代谢物方法的建立及应用
1
作者
蔡子豪
严文广
+2 位作者
李嘉豪
丁艳君
凌江
《中南大学学报(医学版)》
北大核心
2025年第6期1002-1012,共11页
目的:兽用麻醉剂替来他明为新型毒品替代物,在全球多地区出现滥用情况,对公众健康造成巨大危害,但其检测方法的灵敏度难以满足法医学实践需求。本研究旨在建立一种测定人体生物样本中替来他明及其代谢物去乙基替来他明的超高效液相色谱...
目的:兽用麻醉剂替来他明为新型毒品替代物,在全球多地区出现滥用情况,对公众健康造成巨大危害,但其检测方法的灵敏度难以满足法医学实践需求。本研究旨在建立一种测定人体生物样本中替来他明及其代谢物去乙基替来他明的超高效液相色谱-串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法,并通过方法学验证其能否应用于法医学实践。方法:选择SKF525A为内标,采用乙腈(含1 ng/mL SKF525A)萃取生物样本,漩涡振荡10 min,超声处理20 min,以10000 r/min离心10 min,取500μL上清液经0.22μm滤膜过滤,采用高效液相色谱系统(ACQUITY UPLC H-Class PLUS)和三重四极杆质谱仪(XEVO TQ-S Micro)进行检测。色谱条件采用ACQUITY UPLC?BEH C18(1.7μm,2.1 mm×100 mm)色谱柱,0.3 mL/min流速,考察4种流动相体系(20 mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸水溶液+甲醇、20 mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸水溶液+乙腈、水+甲醇、水+乙腈)对替来他明及去乙基替来他明的分离效果。质谱条件采用电喷雾离子源正离子模式(electrospray ionization in positive mode,ESI+)、多反应监测模式(multiple reaction monitoring,MRM),替来他明和去乙基替来他明分别选用质荷比为224.043→179.016、196.08→151.06作为定量离子对。以添加0.1、0.2、0.5、1、2、5、10、20、50、100、200 ng/mL替来他明的血样的质谱响应值为纵坐标,替来他明浓度为横坐标,通过最小二乘法进行线性回归获得校准曲线,考察替来他明在血样中的线性范围、检出限和定量限;选取替来他明低(5 ng/mL)、中(20 ng/mL)、高(100 ng/mL)3种浓度制备多份血液、肝脏及肾脏的阳性添加样本和空白样本,经前处理后上机进行检测分析并记录其响应值,考察替来他明在不同生物样本中的精密度、准确度、基质效应、提取回收率和稳定性。最后,采用UPLC-MS/MS定量检测实际案例获取的替来他明样本,以验证其适用性。结果:建立的UPLC-MS/MS法可同时检测人体生物样本中的替来他明及代谢物去乙基替来他明,保留时间分别为3.42 min和2.82 min。以流动相A(20 mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸水溶液)和流动相B(乙腈)梯度洗脱替来他明和去乙基替来他明的效果最佳。血液样品中替来他明在0.1~200 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.992,决定系数R2=0.983,检出限为0.03 ng/mL,定量限为0.1 ng/mL,提取回收率为92%~107%,基质效应为71%~99%;肝脏样本中的提取回收率为91%~98%,基质效应为69%~96%;肾脏样本中的提取回收率为93%~104%,基质效应为72%~100%。本方法在不同样本中的日内、日间精密度[以相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)表示]和准确度[以相对误差(relative error,RE)表示]均控制在15%以内,且样本在-20℃冻存条件下表现出良好的稳定性。从实际案件获取的生物样本中检测到替来他明成分:案例1血液、肝脏、肾脏样本含量分别为0.37μg/mL、0.15μg/g、0.11μg/g,案例2血液样本含量为8.75 ng/mL;在血样中检测到代谢物去乙基替来他明成分。结论:UPLC-MS/MS法高效、准确、灵敏,适用于人体生物样本中替来他明和代谢物去乙基替来他明成分的检测。
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关键词
法医毒理学
新精神活性物质
替来他明
去乙基替来他明
生物样本
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职称材料
基于铜纳米酶和分子印迹技术的替来他明快速检测荧光探针开发
2
作者
李嘉豪
凌江
+2 位作者
蔡子豪
郑梓源
丁艳君
《法医学杂志》
北大核心
2025年第4期355-363,共9页
目的开发一种针对替来他明的快速检测方法,在保证灵敏度和准确性的前提下做到操作简便、成本低廉,帮助现场快速筛查和禁毒工作的开展。方法本研究结合双配体铜纳米酶与分子印迹技术,先以易获取的原材料在120℃条件下合成铜纳米酶,再在...
目的开发一种针对替来他明的快速检测方法,在保证灵敏度和准确性的前提下做到操作简便、成本低廉,帮助现场快速筛查和禁毒工作的开展。方法本研究结合双配体铜纳米酶与分子印迹技术,先以易获取的原材料在120℃条件下合成铜纳米酶,再在常温条件下通过溶胶-凝胶法在表面刻印特异性空腔,构建一种新型荧光传感探针。对该探针进行表征和方法学验证,并将其应用于实际样本的检测。结果所构建探针荧光性质稳定,抗干扰能力强,具有良好的选择性和灵敏度,检出限为5 ng/mL,定量浓度范围为15~500 ng/mL,可实现血液、电子烟油等实际样本中替来他明的快速检测。结论该荧光探针可用于多种检材中替来他明的快速检测与现场初筛,极大提高了检测效率且显著降低了分析成本,具有较高的研究价值和广阔的应用前景。
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关键词
法医学
毒物分析
替来他明
铜纳米酶
分子印迹聚合物
荧光探针
快速检测
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职称材料
题名
UPLC-MS/MS测定生物样本中替来他明及其代谢物方法的建立及应用
1
作者
蔡子豪
严文广
李嘉豪
丁艳君
凌江
机构
中南大学湘雅基础医学院法医学系
中南大学
湘雅
三医院康复
医学
科
出处
《中南大学学报(医学版)》
北大核心
2025年第6期1002-1012,共11页
基金
国家自然科学基金(82402201)
长沙市自然科学基金(kq2402237)。
文摘
目的:兽用麻醉剂替来他明为新型毒品替代物,在全球多地区出现滥用情况,对公众健康造成巨大危害,但其检测方法的灵敏度难以满足法医学实践需求。本研究旨在建立一种测定人体生物样本中替来他明及其代谢物去乙基替来他明的超高效液相色谱-串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法,并通过方法学验证其能否应用于法医学实践。方法:选择SKF525A为内标,采用乙腈(含1 ng/mL SKF525A)萃取生物样本,漩涡振荡10 min,超声处理20 min,以10000 r/min离心10 min,取500μL上清液经0.22μm滤膜过滤,采用高效液相色谱系统(ACQUITY UPLC H-Class PLUS)和三重四极杆质谱仪(XEVO TQ-S Micro)进行检测。色谱条件采用ACQUITY UPLC?BEH C18(1.7μm,2.1 mm×100 mm)色谱柱,0.3 mL/min流速,考察4种流动相体系(20 mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸水溶液+甲醇、20 mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸水溶液+乙腈、水+甲醇、水+乙腈)对替来他明及去乙基替来他明的分离效果。质谱条件采用电喷雾离子源正离子模式(electrospray ionization in positive mode,ESI+)、多反应监测模式(multiple reaction monitoring,MRM),替来他明和去乙基替来他明分别选用质荷比为224.043→179.016、196.08→151.06作为定量离子对。以添加0.1、0.2、0.5、1、2、5、10、20、50、100、200 ng/mL替来他明的血样的质谱响应值为纵坐标,替来他明浓度为横坐标,通过最小二乘法进行线性回归获得校准曲线,考察替来他明在血样中的线性范围、检出限和定量限;选取替来他明低(5 ng/mL)、中(20 ng/mL)、高(100 ng/mL)3种浓度制备多份血液、肝脏及肾脏的阳性添加样本和空白样本,经前处理后上机进行检测分析并记录其响应值,考察替来他明在不同生物样本中的精密度、准确度、基质效应、提取回收率和稳定性。最后,采用UPLC-MS/MS定量检测实际案例获取的替来他明样本,以验证其适用性。结果:建立的UPLC-MS/MS法可同时检测人体生物样本中的替来他明及代谢物去乙基替来他明,保留时间分别为3.42 min和2.82 min。以流动相A(20 mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸水溶液)和流动相B(乙腈)梯度洗脱替来他明和去乙基替来他明的效果最佳。血液样品中替来他明在0.1~200 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.992,决定系数R2=0.983,检出限为0.03 ng/mL,定量限为0.1 ng/mL,提取回收率为92%~107%,基质效应为71%~99%;肝脏样本中的提取回收率为91%~98%,基质效应为69%~96%;肾脏样本中的提取回收率为93%~104%,基质效应为72%~100%。本方法在不同样本中的日内、日间精密度[以相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)表示]和准确度[以相对误差(relative error,RE)表示]均控制在15%以内,且样本在-20℃冻存条件下表现出良好的稳定性。从实际案件获取的生物样本中检测到替来他明成分:案例1血液、肝脏、肾脏样本含量分别为0.37μg/mL、0.15μg/g、0.11μg/g,案例2血液样本含量为8.75 ng/mL;在血样中检测到代谢物去乙基替来他明成分。结论:UPLC-MS/MS法高效、准确、灵敏,适用于人体生物样本中替来他明和代谢物去乙基替来他明成分的检测。
关键词
法医毒理学
新精神活性物质
替来他明
去乙基替来他明
生物样本
Keywords
forensic toxicology
novel psychoactive substances
tiletamine
desethyltiletamine
biological samples
分类号
D919 [医药卫生—法医学]
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职称材料
题名
基于铜纳米酶和分子印迹技术的替来他明快速检测荧光探针开发
2
作者
李嘉豪
凌江
蔡子豪
郑梓源
丁艳君
机构
中南大学湘雅基础医学院法医学系
出处
《法医学杂志》
北大核心
2025年第4期355-363,共9页
基金
上海市法医学重点实验室暨司法部司法鉴定重点实验室开放课题资助项目(KF202305)
国家卫生健康委员会毒品依赖和戒治重点实验室(昆明医科大学)开放课题资助项目(KZ202401)。
文摘
目的开发一种针对替来他明的快速检测方法,在保证灵敏度和准确性的前提下做到操作简便、成本低廉,帮助现场快速筛查和禁毒工作的开展。方法本研究结合双配体铜纳米酶与分子印迹技术,先以易获取的原材料在120℃条件下合成铜纳米酶,再在常温条件下通过溶胶-凝胶法在表面刻印特异性空腔,构建一种新型荧光传感探针。对该探针进行表征和方法学验证,并将其应用于实际样本的检测。结果所构建探针荧光性质稳定,抗干扰能力强,具有良好的选择性和灵敏度,检出限为5 ng/mL,定量浓度范围为15~500 ng/mL,可实现血液、电子烟油等实际样本中替来他明的快速检测。结论该荧光探针可用于多种检材中替来他明的快速检测与现场初筛,极大提高了检测效率且显著降低了分析成本,具有较高的研究价值和广阔的应用前景。
关键词
法医学
毒物分析
替来他明
铜纳米酶
分子印迹聚合物
荧光探针
快速检测
Keywords
forensic medicine
toxicological analysis
tiletamine
copper nanozyme
molecular imprinted polymer
fluorescent probe
rapid detection
分类号
R89 [医药卫生—法医学]
DF795.1 [医药卫生—法医学]
D919.1 [医药卫生—法医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
UPLC-MS/MS测定生物样本中替来他明及其代谢物方法的建立及应用
蔡子豪
严文广
李嘉豪
丁艳君
凌江
《中南大学学报(医学版)》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于铜纳米酶和分子印迹技术的替来他明快速检测荧光探针开发
李嘉豪
凌江
蔡子豪
郑梓源
丁艳君
《法医学杂志》
北大核心
2025
0
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职称材料
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