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NLRP3炎性小体对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺功能及炎性因子分泌的影响 被引量:12
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作者 刘一鹏 欧宗兴 +3 位作者 陈忠仁 王蕾 沈彬 梁海梅 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期526-531,共6页
为了探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用,并分析白细胞介素-18(IL-18)及白细胞介素-1β(IL-1β)在COPD大鼠体内分泌与肺功能的关系,按照随机原则将36只wistar大鼠平均分为空白... 为了探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用,并分析白细胞介素-18(IL-18)及白细胞介素-1β(IL-1β)在COPD大鼠体内分泌与肺功能的关系,按照随机原则将36只wistar大鼠平均分为空白组、COPD组及干预组,其中COPD组及干预组建造大鼠模型,干预组在造模的同时给予AC-YVAD-CMK抑制剂处理,造模结束后测定3组大鼠的呼吸阻力、肺总量、肺顺应性及血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-18和IL-1β的水平.结果显示:1)COPD组大鼠的肺总量和肺顺应性均低于干预组和空白组(p<0.05),呼吸阻力大小依次为COPD组>干预组>空白组(p<0.05);2)COPD组大鼠血清中IL-1β水平高于空白组和干预组(p<0.05),COPD组和干预组大鼠血清中IL-18水平高于空白组(p<0.05);3)COPD组大鼠BALF中IL-18水平高于干预组和空白组(p<0.05),BALF中IL-1β水平大小依次为COPD组>干预组>空白组(p<0.05);4)大鼠BALF中IL-18水平与其呼吸阻力呈显著正相关(p<0.05).由上述结果可知:COPD模型大鼠的肺总量、肺顺应性降低而呼吸阻力升高,体内IL-18和IL-1β水平升高,且BALF中IL-18水平与大鼠呼吸阻力呈正相关性,提示IL-18参与了COPD炎症反应;阻断NLRP3炎性小体中caspase-1活化可以改善COPD模型大鼠肺功能并降低IL-18和IL-1β水平,提示NLRP3炎性小体可能参与了大鼠COPD的发病过程. 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 NLRP3炎性小体 白细胞介素-18 白细胞介素-1Β 肺功能
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长链非编码RNA CCAT1在非小细胞肺癌细胞系中的表达及作用 被引量:4
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作者 陈忠仁 欧宗兴 +4 位作者 王蕾 沈彬 梁海梅 杨绪莉 黄实仁 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期513-517,共5页
目的分析长链非编码RNA CCAT1(LncRNA CCAT1)在非小细胞肺癌细胞系中的表达及作用。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定非小细胞肺癌细胞系HCC827、H1650、H1299、A549及正常肺上皮细胞系BEAS-2B中LncRNA CCAT1的表达;将A549细胞系分为CC... 目的分析长链非编码RNA CCAT1(LncRNA CCAT1)在非小细胞肺癌细胞系中的表达及作用。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定非小细胞肺癌细胞系HCC827、H1650、H1299、A549及正常肺上皮细胞系BEAS-2B中LncRNA CCAT1的表达;将A549细胞系分为CCAT1-siRNA组、CTR-siRNA组及Mock组,经LipofectamineTM3000分别转染pcDNA3.1-LncRNA-CCAT1-shRNA、pcDNA3.1-LncRNA-CCAT1-NC及空白质粒pcDNA3.1;MTT实验测定细胞增殖能力,细胞划痕实验和Transwell实验测定细胞迁移、侵袭能力,qRT-PCR和蛋白免疫印迹实验分别测定细胞中miR-152和成纤维细胞生长因子2(FGF2)蛋白表达水平。结果 LncRNA CCAT1在非小细胞肺癌细胞系HCC827、H1650、H1299、A549中的表达量高于BEAS-2B(均P<0.01)。MTT结果示,转染72及96 h后,CCAT1-siRNA组细胞增殖活力显著低于CTR-siRNA组和Mock组(均P<0.05)。CCAT1-siRNA组划痕愈合率低于CTR-siRNA组[(33.45±2.62)%vs.(52.73±4.17)%,P<0.05]。CCAT1-siRNA组侵袭细胞数少于CTR-siRNA组[(93.7±6.2)vs.(172.8±11.5),P<0.01)]。CCAT-siRNA组miR-152表达量高于CTR-siRNA组[(3.73±0.18)vs.(1.02±0.05),P<0.01)]。CCAT-siRNA组FGF2蛋白表达量低于CTR-siRNA组[(0.59±0.03)vs.(1.01±0.06),P<0.01)]。结论LncRNA CCAT1在非小细胞肺癌细胞系中高表达,LncRNA CCAT1沉默可抑制非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭,其机制可能与miR-152表达上调和FGF2表达下调有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 长链非编码RNA CCAT1 增殖 侵袭
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lncRNA-PCAT6通过调控miR-185/SIX1轴对肺癌A549细胞上皮间质转化及化疗敏感性的影响 被引量:1
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作者 王华丽 农开旭 +2 位作者 程守斌 秦篙 许振胜 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第23期2840-2846,共7页
目的:探讨长链非编码RNA-PCAT6(lncRNA-PCAT6)对肺癌A549细胞上皮间质转化(EMT)和化疗敏感性的影响,以及对微小RNA-185(miR-185)/SIX1轴的调控作用。方法:取A549细胞,分为空白组、lncRNA-PCAT6低表达腺病毒(PCAT6-Si)组、不含lncRNA-PCA... 目的:探讨长链非编码RNA-PCAT6(lncRNA-PCAT6)对肺癌A549细胞上皮间质转化(EMT)和化疗敏感性的影响,以及对微小RNA-185(miR-185)/SIX1轴的调控作用。方法:取A549细胞,分为空白组、lncRNA-PCAT6低表达腺病毒(PCAT6-Si)组、不含lncRNA-PCAT6-Si的空病毒载体(eGFP-Si-1)组、miR-185低表达腺病毒(miR-185-Si)组、不含miR-185-Si的空病毒载体(eGFP-Si-2)组、PCAT6-Si与miR-185-Si共转染(PCAT6-Si+miR-185-Si)组。RT-qPCR法检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达;Transwell法测定细胞侵袭、迁移能力;免疫荧光检测EMT标志物N-cadherin阳性表达;Western blot法测定SIX1、EMT标志蛋白E-cadherin、Vimentin及N-cadherin表达。取A549细胞系及其顺铂耐药细胞株A549/DDP,RT-qPCR及Western blot法检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达。取A549/DDP转染PCAT6-Si与miR-185-Si,并分为A549组、A549/DDP组、PCAT6-Si组、miR-185-Si组、PCAT6-Si+miR-185-Si、eGFP-Si-1组、eGFP-Si-2组;RT-qPCR检测lncRNA-PCAT6、miR-185表达;CCK-8法检测各组细胞半数抑制浓度(IC50)及耐药指数(RI);Western blot法检测SIX1、耐药相关蛋白P-gp表达;裸鼠荷瘤试验验证PCAT6对A549/DDP细胞化疗敏感性的作用。双荧光素酶试验验证PCAT6与miR-185之间的靶向关系。结果:与A549细胞相比,A549/DDP细胞IC50及RI、lncRNA-PCAT6、SIX1及P-gp表达升高(P<0.05),miR-185表达降低(P<0.05)。敲低A549细胞中lncRNA-PCAT6表达后,miR-185表达升高,SIX1蛋白表达降低,细胞侵袭、迁移能力及EMT进程降低,IC50及RI降低、肿瘤体积减小,且各指标变化差异显著(P<0.05)。敲低miR-185可逆转lncRNA-PCAT6的上述作用。双荧光素酶报告试验证实lncRNAPCAT6与miR-185之间有靶向负调控作用。结论:肺癌A549细胞中lncRNA-PCAT6低表达可靶向上调miR-185,下调SIX1,抑制EMT进程,增强对DDP化疗的敏感性。 展开更多
关键词 长链非编码RNA-PCAT6 微小RNA-185 肺癌A549细胞 化疗敏感性
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肝素结合蛋白与正五聚蛋白3联合检测对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者细菌感染的预测价值 被引量:27
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作者 吴美景 梁梅兰 +1 位作者 吴玉丹 王捷平 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期652-658,共7页
目的探讨肝素结合蛋白(HBP)、正五聚蛋白3(PTX3)联合检测对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者细菌感染的预测价值.方法选取中南大学湘雅医学院附属海口医院2019年1月-2020年1月收治的AECOPD患者119例,回顾性分析患者的临床资料.... 目的探讨肝素结合蛋白(HBP)、正五聚蛋白3(PTX3)联合检测对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者细菌感染的预测价值.方法选取中南大学湘雅医学院附属海口医院2019年1月-2020年1月收治的AECOPD患者119例,回顾性分析患者的临床资料.根据临床综合诊断(如病原菌检测、染色法、分离与鉴定、痰培养、血培养等)结果,分析其是否合并细菌感染,分成感染组(n=57)、非感染组(n=62),选取同期的健康体检者60名,作为对照组.三组于就诊/体检当日检测血浆HBP、血清PTX3水平并进行比较.绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆HBP、血清PTX3单独与联合预测AECOPD患者发生细菌感染的曲线下面积(AUC).经Pearson线性相关分析血浆HBP与血清PTX3的相关性.以临床诊断为金标准,经Kappa检验分析血浆HBP、血清PTX3单独以及联合评价AECOPD患者细菌感染与临床诊断的一致性.结果感染组的血浆HBP、血清PTX3均高于非感染组、对照组(P<0.05).非感染组血浆HBP、血清PTX3高于对照组(P<0.05).血浆HBP、血清PTX3单独及联合预测AECOPD患者细菌感染的AUC分别为0.773、0.765、0.866.Pearson线性相关分析显示,血浆HBP与血清PTX3呈正相关(r=0.652,P<0.05).血浆HBP、血清PTX3单独以及二者联合评估AECOPD与临床诊断一致性的Kappa检验值分别为0.479、0.429、0.731.经logistic回归性分析显示,AECOPD患者发生细菌感染的危险因素包括有创操作、插管时间≥14 d、血浆HBP≥60.300μg/L、血清PTX3≥1.790μg/L(P<0.05).结论血浆HBP联合血清PTX3对AECOPD患者是否合并细菌感染有较高预测价值,与临床诊断一致性较理想,临床可将二者作为筛查AECOPD患者细菌感染的重要指标. 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病急性加重期 肝素结合蛋白 正五聚蛋白3 细菌感染
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紫甘蓝提取物提高人非小细胞肺癌细胞系放射敏感性的研究 被引量:2
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作者 曾慈梅 王蕾 齐见旭 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第14期1700-1704,共5页
目的:探讨紫甘蓝提取物(PCE)对人非小细胞肺癌A549细胞放射敏感性的影响及机制。方法:用CCK-8试验检测不同浓度PCE对细胞活力的影响,确定最佳剂量浓度。将对数生长期的A549细胞在6孔板中(每孔1×105个/ml)接种并分为6组∶对照组(CO... 目的:探讨紫甘蓝提取物(PCE)对人非小细胞肺癌A549细胞放射敏感性的影响及机制。方法:用CCK-8试验检测不同浓度PCE对细胞活力的影响,确定最佳剂量浓度。将对数生长期的A549细胞在6孔板中(每孔1×105个/ml)接种并分为6组∶对照组(CON,A组),10μmol/L PCE组(PCE-10μmol/L,B组)、50μmol/L PCE组(PCE-50μmol/L,C组)、照射组(IR,D组)、照射加10μmol/L PCE组(IR+PCE-10μmol/L,E组)、照射加50μmol/L PCE组(IR+PCE-50μmo/L,F组)。照射后,检测PCE对A549细胞增殖的影响。流式细胞术检测PCE对照射后A549细胞凋亡的影响。Western blot检测照射后PCE对A549细胞凋亡途径中关键蛋白表达的影响。用qRT-PCR检测不同浓度PCE照射前后miRNA326的表达。结果:CCK-8结果显示,PCE能明显抑制A549细胞的增殖,且随着药物浓度的增加,其增殖抑制率增加。流式细胞术结果显示,D组细胞凋亡率为7.63%±0.27%,E组为9.62%±0.42%,F组为17.50%±0.37%,相对于D组,PCE显著提高了E组和F组照射后A549细胞的凋亡率(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,E组、F组miRNA326的表达显著上调(P<0.01),PCE能显著上调照射后A549细胞miRNA326的表达,且药物浓度越高,上调越明显。Western blot结果显示,PCE能显著降低Bcl-2的表达,增强Caspase-3和Caspase-9的活化,提高细胞凋亡水平。结论:PCE可通过上调miRNA326的表达和促进细胞凋亡来增强人非小细胞肺癌A549细胞的放射敏感性,且随着药物剂量的增加,其放射敏感性效应增强。 展开更多
关键词 紫甘蓝提取物 非小细胞肺癌 放射敏感性 细胞凋亡 miRNA326
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