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氯化锂抑制K562白血病细胞增殖及诱导凋亡机理的研究
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作者 唐华容 何群 王法春 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期979-982,共4页
本研究旨在探讨氯化锂(LiCl)在体外抑制K562白血病细胞增殖和诱导凋亡的机制。在细胞培养体系中加入LiCl(30mmol/L)进行培养;以流式细胞术分析细胞周期;用半定量RTPCR检测bcr/abl融合基因mRNA的表达;用原子吸收光谱仪检测不同时间点细胞... 本研究旨在探讨氯化锂(LiCl)在体外抑制K562白血病细胞增殖和诱导凋亡的机制。在细胞培养体系中加入LiCl(30mmol/L)进行培养;以流式细胞术分析细胞周期;用半定量RTPCR检测bcr/abl融合基因mRNA的表达;用原子吸收光谱仪检测不同时间点细胞内Li+浓度及Na+、K+通道阻断剂TTX、FSK分别对细胞内Li+浓度的影响,并观察了Na+、K+通道阻断剂对LiCl抑制细胞生长的作用。结果显示:LiCl(30mmol/L)导致K562白血病细胞出现G2/M期阻滞,bcr/ablmRNA表达下降,细胞内Li+的浓度从30分钟开始增加,在2小时达高峰,以后逐渐下降,4小时达到平衡;Na+、K+通道阻断剂TTX(3.4×10-7mol/L)与FSK(5×10-5mol/L)分别阻断Na+、K+通道后可升高细胞内Li+的浓度,并增加LiCl对K562白血病细胞增殖的抑制作用。结论:LiCl诱导K562细胞增殖抑制和凋亡的机制可能与K562细胞G2/M期阻滞、下调bcr/ablmRNA的表达及Na+、K+通道被阻断后Li+通道的状态有关。 展开更多
关键词 氯化锂 白血病 K562细胞系 细胞凋亡
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骨髓成纤维细胞条件培养液对巨核系细胞体外增殖和血小板体内生成的影响 被引量:4
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作者 黄艳红 周小莹 +3 位作者 谭孟群 程腊梅 卢光琇 王绮如 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期726-728,共3页
关键词 骨髓成纤维细胞 条件培养液 巨核细胞 血小板 小鼠
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血清及细胞因子对人骨髓间质干细胞增殖的影响 被引量:7
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作者 雷军 程腊梅 +1 位作者 谭孟群 王绮如 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第5期469-472,共4页
目的 :探讨影响体外骨髓间质干细胞增殖的因素。方法 :取胸部外科手术无血液系统疾病病人肋骨 ,采用密度梯度离心法分离单个核细胞 ,以每皿 5× 10 5个的细胞浓度接种 ,9d后 ,瑞士 吉姆萨染色 ,计数集落并进行统计分析。结果 :在 ... 目的 :探讨影响体外骨髓间质干细胞增殖的因素。方法 :取胸部外科手术无血液系统疾病病人肋骨 ,采用密度梯度离心法分离单个核细胞 ,以每皿 5× 10 5个的细胞浓度接种 ,9d后 ,瑞士 吉姆萨染色 ,计数集落并进行统计分析。结果 :在 5 %~ 30 %的血清浓度范围内 ,骨髓间质干细胞集落数随血清浓度的升高而增多。bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL 6等细胞因子可促进骨髓间质干细胞的增殖。结论 :血清浓度与细胞因子bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 增殖 血清 细胞因子
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小鼠骨髓内皮细胞条件培养液支持卵黄囊造血干/祖细胞的体外生长 被引量:2
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作者 那晓东 赵自平 +2 位作者 谭孟群 谢祁阳 王绮如 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期36-40,共5页
目的观察小鼠骨髓内皮细胞条件培养液(mBMEC-CM)对卵黄囊造血干/祖细胞体外生长的支持作用。方法取妊娠第8.5天的卵黄囊,经消化后获得卵黄囊细胞,取卵黄囊非贴壁细胞加入含10%mBMEC-CM和10%FBS的DM... 目的观察小鼠骨髓内皮细胞条件培养液(mBMEC-CM)对卵黄囊造血干/祖细胞体外生长的支持作用。方法取妊娠第8.5天的卵黄囊,经消化后获得卵黄囊细胞,取卵黄囊非贴壁细胞加入含10%mBMEC-CM和10%FBS的DMEM中培养24h后,收集细胞做半固体培养。结果mBMEC-CM在液体培养体系中能扩增卵黄囊造血干/祖细胞使粒-巨噬系集落形成单位(granulocyte-macrophage colony forming unit,CFU-GM)和高增殖潜能集落形成细胞(high proliferative potential-colony forming cell,HPP-CFC)的产率增加,经24h液体培养后的CFU-GM和HPP-CFC的数目分别为培养0h对照组的119.5%和130.8%(P<0.05=;mBMEC-CM联合flt3配基(flt3ligand,FL)和血小板生成素(thrombopoietin,TPO)后,其扩增CFU-GM和HPP-CFC的能力明显增强,mBMEC-CM联合FL和TPO经24h液体培养后的CFU-GM和HPP-CFC的数目分别为培养0h对照组的132.0%和176.9%? 展开更多
关键词 骨髓内皮细胞 胚胎发生 造血调控 小鼠 造血干/祖细胞 体外生长
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骨髓内皮细胞产生造血抑制因子 被引量:8
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作者 程腊梅 王绮如 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期485-491,共7页
本研究探讨骨髓内皮细胞分泌的造血抑制因子在扩增造血祖细胞中的作用并初步探讨其作用机制。收集无血清骨髓内皮细胞条件培养液 (BMEC CM) ,离心超滤 ,获得 >1 0kD和 <1 0kD的组分 ,以观察BMEC CM原液及其 >1 0kD和 <1 0k... 本研究探讨骨髓内皮细胞分泌的造血抑制因子在扩增造血祖细胞中的作用并初步探讨其作用机制。收集无血清骨髓内皮细胞条件培养液 (BMEC CM) ,离心超滤 ,获得 >1 0kD和 <1 0kD的组分 ,以观察BMEC CM原液及其 >1 0kD和 <1 0kD组分对CFU GM及HPP CFC的增殖作用的影响 ;检测骨髓内皮细胞及BMEC CM中抑制因子的表达 ,用抗体中和实验检测BMEC CM中的抑制因子对造血集落的抑制活性 ;用膜杂交法检测抑制因子联合造血刺激因子扩增造血细胞时增殖与分化相关基因的改变。结果表明 :①BMEC CM ,>1 0kD及 <1 0kD组分分别加入集落培养体系 ,BMEC CM对CFU GM及HPP CFC的生成无明显影响 ,>1 0kD组分增加CFU GM及HPP CFC的生成 ,<1 0kD组分抑制CFU GM及HPP CFC的生成。②BMEC CM ,>1 0kD及 <1 0kD组分分别加入骨髓细胞液体培养体系培养 2 4小时后 ,BMEC CM组CFU GM明显减少 ,HPP CFC显著增加 ;>1 0kD组分组CFU GM明显增加 ,HPP CFC无显著改变 ;<1 0kD组分组CFU GM及HPP CFC均明显减少。③小鼠骨髓内皮细胞表达MIP 2 ,MIP 1α ,MSP ,TGF β,TNF α,IFN γ及Tβ4。BMEC CM中存在有MIP 2 ,MIP 1α ,MSP ,TGF β ,TNF α和Tβ4。④抗体中和实验结果表明在BMEC CM中的TGF β ,MSP ,MIP 1α,IFN γ和Tβ4有明显抑制活性。 展开更多
关键词 造血干细胞扩增 造血祖细胞扩增 骨髓内皮细胞 造血抑制因子
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脐血内皮细胞对脐血早期造血细胞的体外扩增作用 被引量:2
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作者 尹利明 程腊梅 +1 位作者 王绮如 谭孟群 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期304-308,共5页
目的:观察脐血内皮细胞联合细胞因子组合通过非接触方式对脐血早期造血细胞的扩增作用。方法:采用优化的内皮细胞培养基培养脐血内皮细胞;实验组分为细胞因子组合组(SCF+IL-3+IL-6+GM-CSF,CKs组)和脐血内皮细胞联合CKs非接触脐血CD34+... 目的:观察脐血内皮细胞联合细胞因子组合通过非接触方式对脐血早期造血细胞的扩增作用。方法:采用优化的内皮细胞培养基培养脐血内皮细胞;实验组分为细胞因子组合组(SCF+IL-3+IL-6+GM-CSF,CKs组)和脐血内皮细胞联合CKs非接触脐血CD34+细胞培养组(noncontact组)。Min-iMACS磁珠分选脐血CD34+细胞;检测CKs组与nocontact组培养7d后脐血早期造血细胞的扩增倍数。结果:noncontact组和CKs组都能扩增早期造血细胞,noncontact组对早期造血细胞的扩增倍数显著优于CKs组的扩增倍数。结论:脐血内皮细胞联合CKs非接触培养对脐血早期造血细胞的扩增作用显著优于CKs组。 展开更多
关键词 脐血内皮细胞 CD34^+细胞 体外扩增
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骨髓内皮细胞条件培养液对巨核系细胞体外增殖的影响 被引量:2
7
作者 黄艳红 王绮如 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期386-388,共3页
目的 :探讨骨髓内皮细胞条件培养液 (E CM)对巨核系细胞体外增殖的调节作用。方法 :分离纯化骨髓内皮细胞和骨髓成纤维细胞 ,分别收集其无血清条件培养液 ,比较两种无血清条件培养液对体外扩增成熟巨核细胞和巨核系祖细胞的作用。结果 :... 目的 :探讨骨髓内皮细胞条件培养液 (E CM)对巨核系细胞体外增殖的调节作用。方法 :分离纯化骨髓内皮细胞和骨髓成纤维细胞 ,分别收集其无血清条件培养液 ,比较两种无血清条件培养液对体外扩增成熟巨核细胞和巨核系祖细胞的作用。结果 :E CM和骨髓成纤维细胞条件培养液 (F CM )对成熟巨核细胞及巨核系祖细胞有体外扩增作用 ;E CM对巨核系祖细胞的扩增作用明显优于F CM (P <0 .0 5 ) ;对成熟巨核细胞的扩增作用弱于F CM(P <0 .0 1 )。结论 :E CM对巨核系细胞 。 展开更多
关键词 条件培养液 巨核系祖细胞 体外扩增 体外增殖 骨髓内皮细胞 巨核细胞 成纤维细胞 分离纯化 成熟
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骨髓内皮细胞条件培养液促进小鼠胚胎干细胞向造血分化 被引量:2
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作者 赵惠萍 卢光琇 王绮如 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期109-114,共6页
为观察骨髓内皮细胞条件培养液 (BECM)和 (或 )细胞因子 (VEGF +SCF +EPO)对小鼠胚胎干细胞 (ESC D3细胞 )生成造血干 /祖细胞的促进作用 ,先将ESC D3细胞形成 4天胚状体 (Day 4embryoidbody,4dEB) ,再诱导 4dEBs生成造血干 /祖细胞。... 为观察骨髓内皮细胞条件培养液 (BECM)和 (或 )细胞因子 (VEGF +SCF +EPO)对小鼠胚胎干细胞 (ESC D3细胞 )生成造血干 /祖细胞的促进作用 ,先将ESC D3细胞形成 4天胚状体 (Day 4embryoidbody,4dEB) ,再诱导 4dEBs生成造血干 /祖细胞。实验分 4组 ,第 1,2和 3组分别为BECM +VEGF +SCF +EPO ,BECM和VEGF +SCF +EPO组 ,第 4组为自发分化对照组。检测各组造血干 /祖细胞特异抗原、造血转录因子表达以及造血集落的形成。结果显示 ,BECM和 (或 )细胞因子诱导生成的细胞均表达造血干 /祖细胞抗原 (c kit,Sca 1,Thy 1和CD34)和造血转录因子(c myb ,SCL和β H1) 基因mRNA ,培养后可产生HPP CFC和BFU E。从诱导ESC D3细胞生成造血干 /祖细胞的数量和生成的集落总数看 ,BECM联合细胞因子组诱导效率均显著高于单用组和对照组。结论 :骨髓内皮细胞条件培养液能显著促进胚胎干细胞早期造血分化 。 展开更多
关键词 骨髓内皮细胞 培养液 细胞因子 胚胎干细胞 造血干细胞 胚状体 骨髓移植 基因治疗
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两种条件培养基促进鼠胚胎干细胞分化为造血干细胞(英文) 被引量:1
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作者 赵惠萍 卢光琇 王绮如 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期63-68,共6页
目的:从鼠胚胎干细胞获得具有造血重建功能的造血干细胞。方法:将ES-D3细胞形成4天拟胚体(4dEBs),再用骨髓内皮细胞条件培养液(mBMEC-CM)和/或胎肝基质细胞条件培养液(FLSC-CM)诱导4dEBs生成造血干细胞。实验为mBMEC-CM+FLSC-CM组、mBME... 目的:从鼠胚胎干细胞获得具有造血重建功能的造血干细胞。方法:将ES-D3细胞形成4天拟胚体(4dEBs),再用骨髓内皮细胞条件培养液(mBMEC-CM)和/或胎肝基质细胞条件培养液(FLSC-CM)诱导4dEBs生成造血干细胞。实验为mBMEC-CM+FLSC-CM组、mBMEC-CM组、FLSC-CM组,对照组。检测诱导生成的细胞造血干细胞特异抗原表达、造血相关基因表达、造血集落的形成以及造血重建能力。结果:从诱导ES-D3细胞生成造血干/祖细胞的数量和生成的集落总数看,mBMEC-CM+FLSC-CM组诱导效率显著高于其他3组。mBMEC-CM+FLSC-CM组诱导生成的细胞能重建照射鼠的造血系统。结论:骨髓内皮细胞条件培养液联合胎肝基质细胞条件培养液可促进鼠胚胎干细胞分化为具有造血重建能力的造血干细胞。 展开更多
关键词 胚胎 干细胞 拟胚体 造血 造血千细胞 骨髓 内皮细胞
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氯化锂对K562白血病细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2
10
作者 唐华容 何群 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第4期357-360,共4页
目的 :研究氯化锂 (LiCl)在体外对K5 6 2白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法 :采用液体培养试验 ,四唑盐 (MTT)比色试验 ,集落培养试验为指标观察LiCl对K5 6 2细胞增殖的影响 ,采用DNA片段凝胶电泳及细胞形态学改变为指标检测细胞凋亡。... 目的 :研究氯化锂 (LiCl)在体外对K5 6 2白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法 :采用液体培养试验 ,四唑盐 (MTT)比色试验 ,集落培养试验为指标观察LiCl对K5 6 2细胞增殖的影响 ,采用DNA片段凝胶电泳及细胞形态学改变为指标检测细胞凋亡。结果 :①不同浓度的LiCl(10~ 5 0mmol/L)对K5 6 2细胞具有抑制增殖的作用 ,这种增殖抑制作用呈剂量依赖关系。②在LiCl(30mmol/L)作用下 ,K5 6 2细胞形态学上可见凋亡细胞 ,且DNA琼脂糖凝胶电泳谱可见“梯形带”(DNAladder)。结论 :LiCl能抑制K5 6 2白血病细胞增殖和诱导其凋亡。 展开更多
关键词 氯化锂 K562 白血病 细胞增殖 细胞凋亡
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奋乃静对K562白血病细胞的诱导分化作用 被引量:1
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作者 袁琳波 何群 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期288-291,306,共5页
目的:观察吩噻嗪类抗精神病药奋乃静对K562白血病细胞的诱导分化作用。方法:采用液体培养实验,MTT实验,集落培养实验观察奋乃静对K562细胞增殖能力的影响,采用WG染色观察细胞形态学变化和流式细胞术检测膜CD71分化抗原观察K562细胞功能... 目的:观察吩噻嗪类抗精神病药奋乃静对K562白血病细胞的诱导分化作用。方法:采用液体培养实验,MTT实验,集落培养实验观察奋乃静对K562细胞增殖能力的影响,采用WG染色观察细胞形态学变化和流式细胞术检测膜CD71分化抗原观察K562细胞功能变化三个方面评价奋乃静对K562细胞的诱导分化作用。结果:吩噻嗪类抗精神病药奋乃静可上调K562细胞膜CD71分化抗原的表达量,升高细胞内Hb含量,抑制K562细胞增殖并在形态上有趋向分化的改变。结论:奋乃静有诱导K562细胞分化的作用。 展开更多
关键词 抗精神病药 奋乃静 K562细胞 增殖 分化
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2-氨基甾体对慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞增殖的抑制作用 被引量:1
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作者 李琼 何群 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第5期405-408,共4页
目的 :观察 2 氨基甾体 (MPZ)对慢粒白血病细胞系K5 6 2细胞增殖的作用。方法 :采用形态观察、液体培养、集落培养及MTT实验检测MPZ对K5 6 2细胞增殖的影响 ,并观察其形态学变化。结果 :液体培养 6d后 ,10 - 8和10 - 5mol·L- 1 MP... 目的 :观察 2 氨基甾体 (MPZ)对慢粒白血病细胞系K5 6 2细胞增殖的作用。方法 :采用形态观察、液体培养、集落培养及MTT实验检测MPZ对K5 6 2细胞增殖的影响 ,并观察其形态学变化。结果 :液体培养 6d后 ,10 - 8和10 - 5mol·L- 1 MPZ对K5 6 2细胞的抑制率分别为 4 6 %和 83%。集落培养 8d后 ,10 - 8和 10 - 5mol·L- 1 MPZ对K5 6 2细胞的抑制率分别为 5 2 %和 10 0 %。MTT实验检测表明 ,10 - 8和 10 - 5mol·L- 1 MPZ处理K5 6 2细胞 5d后其抑制率分别为2 9%和 88%。结论 :MPZ(10 - 8~ 10 - 5mol·L- 1 )能明显抑制K5 6 2细胞的增殖 。 展开更多
关键词 抑制作用 K562细胞系 培养的细胞 增殖 2-氨基甾体 慢性粒细胞白血病
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胚胎干细胞形成拟胚体的几个影响因素 被引量:1
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作者 赵惠萍 王绮如 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期85-86,共2页
关键词 胚胎 干细胞 拟胚体
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骨髓巨噬细胞条件培养液对巨核系细胞体外生长的影响
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作者 黄艳红 王绮如 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期600-601,605,共3页
关键词 骨髓巨噬细胞 条件培养液 巨核细胞 IL-6 体外生长 骨髓基质细胞 造血 SCF 体外培养 分泌
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造血刺激因子对巨核细胞体外扩增的影响
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作者 黄艳红 王绮如 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期204-207,共4页
目的:探讨造血刺激因子对巨核系成熟细胞体外扩增的影响。方法:将小鼠骨髓单个核细胞(BMNC)按(2,4,6,8,1 0)×1 05个/mL浓度加入半固体培养体系,体外培养巨核细胞集落形成单位(CFU-M eg),观察BMNC数与CFU-M eg生成数之间的关系;将B... 目的:探讨造血刺激因子对巨核系成熟细胞体外扩增的影响。方法:将小鼠骨髓单个核细胞(BMNC)按(2,4,6,8,1 0)×1 05个/mL浓度加入半固体培养体系,体外培养巨核细胞集落形成单位(CFU-M eg),观察BMNC数与CFU-M eg生成数之间的关系;将BMNC分别加入含rmSCF+rmTPO+rm IL-3(3HSFs),rmSCF+rm IL-3+rmTPO+rm IL-6(4HSFs)或骨髓成纤维细胞条件培养液(F-CM)的液体培养体系中持续培养,从培养的第1 d开始每两天观察巨核系成熟细胞的生成情况。结果:当小鼠骨髓单个核细胞按(2,4,6,8,1 0)×1 05个/mL浓度种入CFU-M eg培养体系时,CFU-M eg生成数随细胞种入数增加而增多;种入细胞浓度对CFU-M eg产率有影响,种入细胞浓度为1×1 06个/mL时,与种入细胞浓度为2×1 05个/mL,每2×1 05个骨髓单个核细胞生成的CFU-M eg数相比,差异有统计学意义(P<0.0 5)。3HSFs,4HSFs和F-CM均对巨核系成熟细胞体外扩增有促进作用。3HSFs和4HSFs的扩增作用明显优于F-CM,4HSFs的扩增效果优于3HSFs;3HSFs和4HSFs扩增体系扩增7 d效果最好,F-CM扩增体系扩增5 d效果最好。结论:3HSFs,4HSFs和F-CM均对巨核系成熟细胞体外扩增有促进作用;4HSFs扩增成熟巨核细胞效果优于3HSFs和F-CM;不同扩增体系扩增巨核细胞的最佳效果所需的时间不同。 展开更多
关键词 巨核系集落形成单位 巨核细胞 造血 刺激因子
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抗氧化剂An7845对K562白血病细胞的增殖抑制和凋亡诱导活性 被引量:2
16
作者 宋奎 何群 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期257-260,共4页
目的 :观察抗氧化剂An784 5在体外对K5 6 2白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法 :采用液体培养实验 ,MTT实验 ,集落培养实验观察抗氧化剂An784 5对K5 6 2细胞增殖的影响 ,采用细胞形态学及DNA片段凝胶电泳观察和检测细胞凋亡。结果 :不同... 目的 :观察抗氧化剂An784 5在体外对K5 6 2白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法 :采用液体培养实验 ,MTT实验 ,集落培养实验观察抗氧化剂An784 5对K5 6 2细胞增殖的影响 ,采用细胞形态学及DNA片段凝胶电泳观察和检测细胞凋亡。结果 :不同浓度的An784 5 (5× 10 8~ 5× 10 5mol/L)对K5 6 2细胞具有抑制增殖的作用 ,并呈剂量依赖关系。经An784 5 (5× 10 7mol/L)处理后 ,K5 6 2细胞在形态学上可见明显凋亡细胞 ,DNA琼脂糖凝胶电泳谱可见DNA梯形带。结论 :抗氧化剂An784 5能抑制K5 6 2白血病细胞增殖和诱导其凋亡。 展开更多
关键词 抗氧化剂An7845 K562白血病 细胞增殖 抑制作用 细胞凋亡 诱导活性 细胞培养
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bFGF对造血基质细胞造血调节作用的影响 被引量:1
17
作者 谭鹤长 雷军 +1 位作者 蒋德昭 王绮如 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期83-84,共2页
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 造血基质细胞 粒-巨噬系集落形成单位
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人类卵黄囊造血及卵黄囊内皮细胞的培养
18
作者 马丽霞 程腊梅 +1 位作者 黄艳红 王绮如 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期116-117,共2页
关键词 人卵黄囊 造血功能 内皮细胞 细胞培养 造血集落 造血基质细胞
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