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全人源抗肝癌噬菌体单链抗体的筛选与鉴定
被引量：
5
1
作者
黄建
肖艳
+5 位作者
童永清
郭锋杰
周国华
李跃辉
胡锦跃
李官成
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期256-259,共4页
目的:构建人源抗肝癌噬菌体单链抗体库,从中筛选抗肝癌单链抗体(scFv),并对其特异性进行鉴定。方法:采用体外致敏法和EBV转化技术联合噬菌体展示技术构建噬菌体抗体库。对初级抗体库进行亲和富集及ELISA筛选,获得的阳性克隆进行免疫组...
目的:构建人源抗肝癌噬菌体单链抗体库,从中筛选抗肝癌单链抗体(scFv),并对其特异性进行鉴定。方法:采用体外致敏法和EBV转化技术联合噬菌体展示技术构建噬菌体抗体库。对初级抗体库进行亲和富集及ELISA筛选,获得的阳性克隆进行免疫组化鉴定并测序。结果:scFv基因与载体连接后得到库容量为1.0×108的初级噬菌体抗体库。对抗体库进行3轮正负淘选和富集后,随机挑取2798个克隆进行ELISA,发现3个克隆对HepG2呈强阳性反应,而与QSG-7701等人正常细胞系呈弱阳性或不反应。对克隆SA3进行免疫细胞化学鉴定,结果与ELISA一致。免疫组织化学鉴定表明SA3与肝癌组织和肝组织阳性率的差别有统计学意义。结论:构建了库容量达1×108的全人源抗肝癌噬菌体抗体库。通过淘选富集、ELISA和免疫组织化学鉴定获得特异性较强的噬菌体克隆,为肝癌的临床诊断及导向治疗奠定了基础。
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关键词
EB病毒转化
噬菌体抗体库
肝肿瘤
单链抗体
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职称材料
题名
全人源抗肝癌噬菌体单链抗体的筛选与鉴定
被引量：
5
1
作者
黄建
肖艳
童永清
郭锋杰
周国华
李跃辉
胡锦跃
李官成
机构
中南大学湘雅医学院肿瘤研究所免疫室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期256-259,共4页
基金
湖南省卫生厅科研基金重点资助项目(A2003001)
文摘
目的:构建人源抗肝癌噬菌体单链抗体库,从中筛选抗肝癌单链抗体(scFv),并对其特异性进行鉴定。方法:采用体外致敏法和EBV转化技术联合噬菌体展示技术构建噬菌体抗体库。对初级抗体库进行亲和富集及ELISA筛选,获得的阳性克隆进行免疫组化鉴定并测序。结果:scFv基因与载体连接后得到库容量为1.0×108的初级噬菌体抗体库。对抗体库进行3轮正负淘选和富集后,随机挑取2798个克隆进行ELISA,发现3个克隆对HepG2呈强阳性反应,而与QSG-7701等人正常细胞系呈弱阳性或不反应。对克隆SA3进行免疫细胞化学鉴定,结果与ELISA一致。免疫组织化学鉴定表明SA3与肝癌组织和肝组织阳性率的差别有统计学意义。结论:构建了库容量达1×108的全人源抗肝癌噬菌体抗体库。通过淘选富集、ELISA和免疫组织化学鉴定获得特异性较强的噬菌体克隆,为肝癌的临床诊断及导向治疗奠定了基础。
关键词
EB病毒转化
噬菌体抗体库
肝肿瘤
单链抗体
Keywords
EBV immortalization
phage antibody library
hepatoma
scFv
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
全人源抗肝癌噬菌体单链抗体的筛选与鉴定
黄建
肖艳
童永清
郭锋杰
周国华
李跃辉
胡锦跃
李官成
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
5
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