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头蛋白通过STAT3依赖途径的小胶质细胞极化调控和铁稳态重塑缓解神经病理性疼痛
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作者 张文娟 杨林 张冉 《中南大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期602-614,共13页
目的:痛觉敏化作为神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)的核心特征,与中枢神经系统内炎症失衡密切相关。本研究探讨鞘内注射头蛋白(noggin,NOG)对腰5脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)模拟的NP模型大鼠的痛觉超敏、小胶质细胞(mic... 目的:痛觉敏化作为神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)的核心特征,与中枢神经系统内炎症失衡密切相关。本研究探讨鞘内注射头蛋白(noggin,NOG)对腰5脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)模拟的NP模型大鼠的痛觉超敏、小胶质细胞(microglia,MG)活化、极化及铁代谢的影响,并分析下游信号转导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)在MG表型转化中的作用。方法:66只Sprague-Dawley(SD)大鼠被随机分为假手术(Sham)组、SNL组和SNL+NOG组。通过Von-Frey纤维检测大鼠的机械痛缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT)。分别采用蛋白质印迹法和逆转录聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测相关蛋白质和mRNA的表达水平,包括MG活化标志物CD11b、STAT3和磷酸化STAT3(phosphorylated STAT3,p-STAT3),M1型极化标志物CD86、CD32、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factoralpha,TNF-α)和CC趋化因子受体2(CC chemokine receptor 2,CCR2),以及M2型极化标志物CD204、CD163、CX3C趋化因子受体1(CX3C chemokine receptor 1,CX3CR1)、IL-10和精氨酸酶1(arginase-1,ARG-1),铁转运蛋白(ferroportin,FPN;编码基因为SLC40A1)、铁调素(hepcidin,编码基因为HAMP)、转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFR;编码基因为TFRC)、二价金属离子转运蛋白1(divalent metal ion transporter 1,DMT-1;编码基因为SLC11A2)。结合免疫荧光观察p-STAT3在MG中的表达及定位。体外实验将原代MG分为对照(Control)组、骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)组及BMP4+Stattic(STAT3抑制剂)组,分析用Stattic抑制STAT3后对MG活化、极化和铁代谢的影响。结果:在动物实验中,与Sham组比较,SNL组和SNL+NOG组大鼠术后的PWT显著降低(P<0.05),脊髓内CD11b和p-STAT3的蛋白质表达水平均显著升高(均P<0.05),促炎M1型MG标志物CD86的蛋白质及CD86、CD32、IL-1β、TNF-α和CCR2的mRNA的表达水平均明显升高(均P<0.05),而抗炎M2型MG标志物CD204的蛋白质和CD204和ARG-1的mRNA的表达水平均显著下降(均P<0.05),hepcidin的蛋白质和铁蓄积相关基因HAMP、SLC11A2、TFRC的mRNA的表达水平均显著升高(均P<0.05),而FPN的蛋白质和铁释放相关基因SLC40A1的mRNA的表达水平均明显降低(均P<0.05)。与SNL组比较,SNL+NOG组大鼠术后的PWT显著升高(P<0.05);其脊髓内CD11b和p-STAT3的蛋白质表达水平均显著降低(均P<0.05),CD86的蛋白质和除TNF-α外的M1型MG标志物的mRNA的表达水平均显著降低(均P<0.05),而CD204的蛋白质及CD204和ARG-1的mRNA的表达水平均显著升高(均P<0.05);铁代谢标志物中,hepcidin的蛋白质和HAMP的mRNA的表达水平均明显降低(均P<0.05),而FPN的蛋白质和SLC40A1的mRNA的表达水平明显升高(均P<0.05)。在体外实验中,与Control组比较,BMP4组原代MG中CD11b、p-STAT3、STAT3、CD86和hepcidin蛋白的表达水平均显著升高(均P<0.05),同时CD204和FPN蛋白的表达水平均显著下调(均P<0.05)。与BMP4组比较,BMP4+Stattic组原代MG中CD11b、p-STAT3、CD86和hepcidin蛋白的表达水平均显著下调(均P<0.05),p-STAT3/STAT3比值降低(P<0.05),同时CD204和FPN蛋白的表达水平明显升高(均P<0.05)。结论:NOG通过拮抗STAT3信号通路,调节MG极化平衡并改善铁代谢紊乱,从而缓解SNL诱导的NP。 展开更多
关键词 头蛋白 神经病理性疼痛 小胶质细胞极化 铁代谢 信号转导及转录激活因子3
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肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶的检测及药敏分析 被引量:1
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作者 曹伟 童明华 王继贵 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第1期77-78,共2页
目的 :了解超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLS)在肠杆菌科细菌中的产生情况及其对部分药物的敏感性 ,以指导临床合理用药。方法 :用双纸片确证试验检测肠杆菌科细菌产ESBLS 的情况 ,用纸片扩散法对 8种抗生素的体外药敏试验结果进行初步分析。... 目的 :了解超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLS)在肠杆菌科细菌中的产生情况及其对部分药物的敏感性 ,以指导临床合理用药。方法 :用双纸片确证试验检测肠杆菌科细菌产ESBLS 的情况 ,用纸片扩散法对 8种抗生素的体外药敏试验结果进行初步分析。结果 :产ESBLS 的肠杆菌科细菌 4 7株 ,其中大肠埃希菌 2 5株、肺炎克雷伯菌 14株、阴沟肠杆菌 5株、催产克雷伯菌 1株、鼻硬结克雷伯菌 1株、液化沙雷菌 1株。在 8种抗生素的体外药敏试验中 ,亚胺培南和美洛培南的敏感率最高 (10 0 % ) ,其次为哌拉西林 /他唑巴坦 (89.4 % )、头孢西丁 (72 .4 % )和头孢替坦 (6 5 .9% )。结论 :产ESBLS 的肠杆菌科细菌主要以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主。对于由产ESBLS 株引起的感染 ,亚胺培南和美洛培南可作为首选治疗用药。哌拉西林 /他唑巴坦优于头霉菌素类药物和其他 β 展开更多
关键词 超广谱Β-内酰胺酶 肠杆菌科细菌 药敏试验 耐药性
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ICU多重耐药菌肺部感染患者入院24小时内红细胞分布宽度与30天内预后的关系
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作者 欧阳娜 王花芹 +1 位作者 王敏 吴俊 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1358-1364,共7页
目的研究红细胞分布宽度(RDW)在重症监护病房(ICU)多重耐药菌(MDRO)肺部感染患者预后评估中的作用。方法选取2021年1月—2022年12月某院ICU收治的MDRO肺部感染患者,根据患者预后分为预后良好组和预后不良组。比较两组患者的基本资料、... 目的研究红细胞分布宽度(RDW)在重症监护病房(ICU)多重耐药菌(MDRO)肺部感染患者预后评估中的作用。方法选取2021年1月—2022年12月某院ICU收治的MDRO肺部感染患者,根据患者预后分为预后良好组和预后不良组。比较两组患者的基本资料、红细胞分布宽度[红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)、红细胞分布宽度标准差(RDW-SD)]、D-二聚体(D-dimer)、降钙素原(PCT)、超敏肌钙蛋白(TNTsh)、N末端-B型尿钠肽前体(NT-proBNP)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)等血清学指标。采用单因素t检验及多因素logistic回归分析血清学指标与MDRO肺部感染患者预后的关联因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估RDW对MDRO肺部感染患者预后的预测效能。结果共纳入275例MDRO肺部感染病例;年龄22~99岁;预后良好组181例(65.8%),预后不良组94例(34.2%)。预后不良组PCT、D-dimer、RDW-CV、RDW-SD、TNTsh、NT-proBNP水平高于预后良好组,差异均有统计学意义(均P<0.05);多因素logistic回归分析显示RDW-CV[OR=19.011,95%CI(5.247~68.882),P<0.05]、RDW-SD[OR=13.693,95%CI(3.820~49.087),P<0.05]增高为MDRO肺部感染患者预后不良的关联因素;ROC曲线结果显示,RDW-CV、RDW-SD曲线下面积分别为0.901、0.896,最佳截断值为14.45%、49.60%。结论本研究提示RDW值与MDRO肺部感染患者的疾病结局密切相关,有望成为其预后的评估指标之一,实现提前干预和风险评估价值。 展开更多
关键词 红细胞分布宽度 多重耐药菌 肺部感染 预后 重症监护病房
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高效液相色谱-荧光检测法同时测定血清中的犬尿氨酸和犬尿喹啉酸 被引量:10
4
作者 肖乐东 唐爱国 +2 位作者 莫喜明 罗昔波 皮兰敢 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期220-223,共4页
建立了在线衍生、双波长高效液相色谱-荧光检测器同时检测血清中犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)和犬尿喹啉酸(kynurenic acid,KYNA)含量的方法。血清标本经5%高氯酸溶液去除蛋白质后,上清液直接进样分析测定。采用的色谱柱为Hypersil C8... 建立了在线衍生、双波长高效液相色谱-荧光检测器同时检测血清中犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)和犬尿喹啉酸(kynurenic acid,KYNA)含量的方法。血清标本经5%高氯酸溶液去除蛋白质后,上清液直接进样分析测定。采用的色谱柱为Hypersil C8柱;流动相为0.25mol/L醋酸锌-50mmol/L醋酸溶液(含3%乙腈),流速为1.5mL/min。在0~10min时间段,在激发波长和发射波长分别为365nm和480nm时检测Kyn;10min后,在激发波长和发射波长分别变换为344nm和404nm时检测KYNA。Kyn的保留时间约为8.1min,线性范围为98~19 600nmol/L,最低检出浓度为50nmol/L,平均回收率为94.88%,日内、日间测定值的相对标准偏差(RSD)均低于4%。KYNA的保留时间约为13.0min,线性范围为2.62~1 047nmol/L,最低检出浓度为0.11nmol/L,平均回收率为102.72%,日内、日间测定的RSD均低于4%。苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸和5-羟色胺等物质对目标物的检测无干扰。71例健康成人血清中,Kyn和KYNA含量分别为(1.40±0.34)μmol/L和(24.22±8.67)nmol/L。该方法简便、快速、灵敏、特异,适于临床和科研应用。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 荧光检测 犬尿氨酸 犬尿喹啉酸 色氨酸 在线衍生 血清
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高效液相色谱-荧光检测法测定血清中的犬尿氨酸 被引量:9
5
作者 罗昔波 唐爱国 +4 位作者 皮兰敢 肖乐东 敖翔 卜艳红 王瑞 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期60-63,共4页
建立了高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)测定血清中犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)含量的方法。采用Hy-persil C8色谱柱(300mm×6.0mm,10μm),流动相为0.25mol/L醋酸锌及50mmol/L醋酸溶液(含3%乙腈),流速为1.5mL/min,荧光检测激... 建立了高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)测定血清中犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)含量的方法。采用Hy-persil C8色谱柱(300mm×6.0mm,10μm),流动相为0.25mol/L醋酸锌及50mmol/L醋酸溶液(含3%乙腈),流速为1.5mL/min,荧光检测激发波长和发射波长分别为365nm和480nm。血清标本经5%(v/v)高氯酸溶液去除蛋白质后取上层清液直接进样,Kyn经流动相等度洗脱分离后,用FLD进行测定。研究结果表明Kyn保留时间约为8.3min,线性范围为0.098-19.6μmol/L,最低检出浓度为0.04μmol/L,回收率为90.8%-96.2%,日内、日间测定的相对标准偏差均小于5%,苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对犬尿氨酸的测定均无干扰。建立的方法简便、快速、灵敏、特异,适用于临床和科研应用。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 荧光检测 犬尿氨酸 人血清
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MK-801诱导的精神分裂症发育模型大鼠脑组织DA,DOPAC,Glu和GABA浓度的变化(英文) 被引量:10
6
作者 刘勇 唐亚梅 +2 位作者 蒲唯丹 张向晖 赵靖平 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期712-719,共8页
目的:通过对MK-801诱导的精神分裂症(schizophrenia,SZ)发育模型大鼠和慢性给药模型大鼠脑组织多巴胺(dopamine,DA)、二羟苯乙酸(dihydroxy-phenyl acetic acid,DOPAC)、谷氨酸盐(glutamate,Glu)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyri... 目的:通过对MK-801诱导的精神分裂症(schizophrenia,SZ)发育模型大鼠和慢性给药模型大鼠脑组织多巴胺(dopamine,DA)、二羟苯乙酸(dihydroxy-phenyl acetic acid,DOPAC)、谷氨酸盐(glutamate,Glu)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)浓度的比较研究,探讨围产期N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体阻断致SZ的神经生化机制。方法:60只新生雄性SD大鼠于出生后6天按批次随机分为SZ发育模型组(MK-801F)、SZ慢性给药模型组(MK-801M)和正常对照组(Control);SZ发育模型大鼠于出生后7~10d皮下注射MK-801(0.1mg/kg,Bid),SZ慢性给药模型大鼠于出生后47~60d腹腔注射MK-801(0.2mg/kg,Qd),对照组大鼠于相应时段注射0.9%的生理盐水。出生后第60天分批进行行为学测试,出生后第63天取各组大鼠大脑内侧前额叶皮质(medial prefrontal cortex,mPFC)和海马组织并匀浆,以高效液相色谱-库仑阵列电化学法检测组织匀浆中的DA,DOPAC,Glu和GABA水平,并计算分析DA和Glu的利用率。结果:SZ发育模型大鼠mPFC和海马DA及DOPAC的浓度较正常对照组明显降低(P〈0.05);mPFC区GABA浓度和Glu利用率较正常对照组明显降低(P〈0.05);mPFC区DA浓度较SZ慢性给药模型组明显降低(P〈0.05);海马DOPAC浓度及DA利用率较SZ慢性给药模型组明显降低(分别P〈0.01,P〈0.05)。结论:SZ发育模型成年大鼠mPFC区DA,Glu和GABA系统功能减退,海马DA系统功能减退。 展开更多
关键词 精神分裂症 MK-801 发育 高效液相色谱 神经递质
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白藜芦醇体外抑制类风湿关节炎滑膜细胞的增殖及其机制 被引量:12
7
作者 唐玲丽 高洁生 +1 位作者 陈新瑞 谢希 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期528-533,共6页
目的:检测白藜芦醇(Res)体外对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法:用不同浓度Res处理RA滑膜细胞24h后,采用四唑蓝(MTT)法检测滑膜细胞的增殖水平;用缺口末端标记法(TUNEL)和流式细胞仪检测其凋亡百分率;采用We... 目的:检测白藜芦醇(Res)体外对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法:用不同浓度Res处理RA滑膜细胞24h后,采用四唑蓝(MTT)法检测滑膜细胞的增殖水平;用缺口末端标记法(TUNEL)和流式细胞仪检测其凋亡百分率;采用Western-blot分析caspase-3酶原的裂解;用比色法测定Res(200μmol/L)处理RA滑膜细胞不同时间及不同浓度的Res处理RA滑膜细胞12h后,caspase-3的相对活性。结果:加入不同浓度Res处理RA滑膜细胞24h后,增殖水平均显著低于对照组(P<0.01);对照组与不同浓度Res处理组凋亡细胞百分率比较,差异有统计学意义(P<0.01);用200μmol/LRes分别处理RA滑膜细胞不同时间,caspase-3活性与未处理组比较,差异有统计学意义(P<0.01);用不同浓度的Res处理细胞12h,caspase-3活性成浓度依赖性升高;用不同浓度Res处理培养的RA滑膜细胞24h,caspase-3酶原的表达随药物浓度的增加而减少。结论:Res在体外抑制类风湿关节炎滑膜细胞增殖,诱导细胞凋亡,可能与caspase-3的活化有关。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 细胞凋亡 白藜芦醇 滑膜细胞 CASPASE-3
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老年慢性病患者下呼吸道院内感染病原菌分布及耐药性监测 被引量:7
8
作者 姚冬梅 陈若虹 +2 位作者 郑荣 唐亚梅 童明华 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期224-226,共3页
目的 :分析老年慢性病患者下呼吸道院内感染病原菌分布及耐药情况。方法 :按常规方法进行细菌培养鉴定 ;药敏试验 ,耐药性监测按美国NCCLS推荐的操作标准进行。结果 :2 0 2例老年病人均患有各种慢性消耗性疾病住院后所致的下呼吸道院内... 目的 :分析老年慢性病患者下呼吸道院内感染病原菌分布及耐药情况。方法 :按常规方法进行细菌培养鉴定 ;药敏试验 ,耐药性监测按美国NCCLS推荐的操作标准进行。结果 :2 0 2例老年病人均患有各种慢性消耗性疾病住院后所致的下呼吸道院内感染。在检出的 37种 2 5 0株菌中 ,革兰氏阴性杆菌 (G b) 1 4 4株 ,酵母样真菌 6 2株 ,革兰氏阳性球菌 (G+ C) 4 4株 ,其所占比例分别为 5 5 % ,2 8% ,1 7%。G 杆菌中大肠埃希氏菌 ,克雷伯氏菌属ESBL的阳性率分别为 37.8% ,39.6 % ;葡萄球菌属中MRS阳性率为 6 7% ;耐万古霉素肠球菌为 6 .0 %。结论 :老年慢性疾病患者是条件致病菌主要入侵对象 ,也是院内感染的高危人群 ,医院应重视与加强对这一特殊人群的护理与防卫措施。 展开更多
关键词 院内感染 慢性疾病 耐药性 老年人 病原菌 药敏试验
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金黄色葡萄球菌临床分离株肠毒素基因的调查分析 被引量:17
9
作者 曹虹 王敏 +4 位作者 郑荣 李先平 王芳 蒋云生 杨一芬 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期738-741,745,共5页
目的检测临床分离的金黄色葡萄球菌(SA)肠毒素基因,了解肠毒素基因的携带情况与SA耐药的关系。方法采用聚合酶链反应检测SA mecA基因和肠毒素基因,了解肠毒素基因在SA中分布的状况,并对其进行耐药性分析。结果 67株甲氧西林耐药的SA(MR... 目的检测临床分离的金黄色葡萄球菌(SA)肠毒素基因,了解肠毒素基因的携带情况与SA耐药的关系。方法采用聚合酶链反应检测SA mecA基因和肠毒素基因,了解肠毒素基因在SA中分布的状况,并对其进行耐药性分析。结果 67株甲氧西林耐药的SA(MRSA)和57株甲氧西林敏感的SA(MSSA)肠毒素基因携带率(100%vs 83.5%)无明显差异(χ2=0.203,P>0.05)。肠毒素基因检出率为93.5%(116株),其中SEA、SEB、SEC、SED和SEF的检出率分别为90.5%、6.9%、61.3%、5.2%和25.9%,未检测出SEE基因。同时检出2种及2种以上的肠毒素基因的菌株有78株(67.2%),以携带SEA+SEC、SEA+SEF和SEA+SEC+SEF基因为主,检出率分别为33.6%、7.8%和13.8%。与携带一种肠毒素基因的菌株耐药率相比,携带多种肠毒素基因的菌株耐药率呈上升趋势,其中携带SEA+SEC+SEF的菌株对复方新诺明的耐药率为75.0%,高于单独携带SEA(28.6%)、SEA+SEC(38.7%)的耐药率,具有统计学差异(P<0.05)。携带SEA+SEC+SEF、SEA+SEF、SEA的菌株对阿米卡星耐药率分别为75.0%、77.0%和21.5%,前两者与携带SEA的菌株相比有显著差异(P<0.05)。结论临床分离的SA中携带多种肠毒素基因的菌株在耐药率上高于只携带一种肠毒素基因的菌株,提示肠毒素在SA耐药中起重要作用。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 耐药性
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唾液尿素、肌酐、尿酸水平在慢性肾病患者中的临床意义 被引量:9
10
作者 夏运成 彭灿辉 +4 位作者 周志芳 成平 孙林 彭佑铭 肖平 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1171-1176,共6页
目的:探讨健康人群和慢性肾病(CKD)患者唾液中尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)水平的变化和临床意义,为肾脏疾病的诊断、治疗提供一种无创、快捷、准确、可靠的检测方法。方法:收集健康人群和肾功能不全患者的唾液和血清,用全自动生化... 目的:探讨健康人群和慢性肾病(CKD)患者唾液中尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)水平的变化和临床意义,为肾脏疾病的诊断、治疗提供一种无创、快捷、准确、可靠的检测方法。方法:收集健康人群和肾功能不全患者的唾液和血清,用全自动生化分析仪分别检测血清和唾液Urea,Cr,UA含量,计算血清与唾液Urea,Cr,UA的相关系数,比较不同时期CKD患者唾液Urea,Cr,UA浓度的变化,用ROC曲线分析唾液Urea,Cr,UA在诊断不同时期CKD患者时的灵敏度和特异度。结果:健康人群和CKD组血清与唾液Urea,Cr,UA含量均呈正相关(r分别为0.918,0.932,0.840和0.984,0.971,0.920);CKD患者唾液Urea,Cr,UA显著高于健康人群组(P<0.05);中晚期CKD患者唾液Urea,Cr,UA均明显高于健康人群组和早期CKD组(P<0.05);晚期CKD患者唾液Urea,Cr,UA明显高于中期CKD患者组(P<0.05);唾液Urea,Cr,UA对整体CKD患者的诊断曲线下面积分别为0.898,0.897,0.848,ROC曲线显示其灵敏度和特异性分别为0.806,0.776,0.704和0.968,0.989,0.871。结论:健康人群和CKD患者唾液与血清中Urea,Cr,UA浓度均有良好的相关性,唾液Urea,Cr,UA浓度能反映CKD患者的肾功能损害程度,可以用来检测CKD患者的肾功能情况,并可用于中晚期CKD病人的诊断,是一种简便、无创、快捷的检测方法。 展开更多
关键词 唾液 尿素 肌酐 尿酸 慢性肾病
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HIV感染者外周血CD4^+ CD25^+ Foxp3^+ /CD127^(low/-)调节性T细胞表达水平对疾病进展的影响 被引量:6
11
作者 陈远林 陈新瑞 +2 位作者 秦立新 杨一芬 唐亚梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1188-1191,1193,共5页
目的:探讨HIV感染者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)、CD4+CD25+CD127low/-Treg的水平及其与其他免疫指标的关系。方法:采集68例未经抗HIV治疗的HIV/AIDS患者(长期不进展组即LTNP组29例、典型进展的HIV感染组27例、AIDS组12例... 目的:探讨HIV感染者外周血中CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)、CD4+CD25+CD127low/-Treg的水平及其与其他免疫指标的关系。方法:采集68例未经抗HIV治疗的HIV/AIDS患者(长期不进展组即LTNP组29例、典型进展的HIV感染组27例、AIDS组12例)及20例健康成人的外周抗凝全血,经免疫荧光染色,应用流式细胞仪分析CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞及CD4+CD25+Foxp3+/CD127low/-Treg的含量,并进行统计学分析。结果:除CD8+T细胞外,HIV/AIDS患者外周血中CD4+T细胞、NK细胞、CD4+/CD8+结果均明显低于健康对照组(P<0.05);随着疾病的进展,LTNP组、HIV组、AIDS组CD4+T细胞百分比、绝对值计数,CD8+T细胞绝对计数,NK细胞绝对计数,CD4+/CD8+比值逐渐下降,而CD8+T细胞百分比逐渐上升。对CD4+CD25+Foxp3+Treg与CD4+CD25+CD127low/-Treg百分含量、绝对计数进行多重比较发现,各组间CD4+CD25+Foxp3+Treg与CD4+CD25+CD127low/-Treg所占CD4+T细胞百分含量的差异均有统计学意义(P<0.05),并且随着疾病的发展,CD4+CD25+Foxp3+/CD127low/-Treg细胞百分含量逐渐上升,LTNP组与健康对照组之间、HIV组和AIDS组之间CD4+CD25+Foxp3+/CD127low/-Treg绝对计数差异无统计学意义(P>0.05),其余各组间的差异均有统计学意义(P<0.05),并且随着疾病的发展,CD4+CD25+Foxp3+/CD127low/-Treg绝对计数逐渐下降。结论:CD4+CD25+Foxp3+/CD127low/-Treg在HIV持续感染的免疫发病机制中有一定作用。 展开更多
关键词 HIV CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞 CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞 长期不进展者
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抗生素干预后ESBLs-KPN和ESBLs-ECO的变化 被引量:7
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作者 高娅文 杨宇 +2 位作者 吴悦陶 曹玮 周琪伟 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期165-170,共6页
目的:评价抗生素干预策略执行后院内感染的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)与肺炎克雷伯菌(KPN)阳性率的变化,探索合理的干预模式及干预的合适时期及监测指标。方法:从2004年12月到2007年12月,监测中南大学湘雅二医院病房常... 目的:评价抗生素干预策略执行后院内感染的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)与肺炎克雷伯菌(KPN)阳性率的变化,探索合理的干预模式及干预的合适时期及监测指标。方法:从2004年12月到2007年12月,监测中南大学湘雅二医院病房常见抗生素的年消耗量(DDD/1000patient-days表示)及其耐药率、院内感染的产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌(ESBLs-KPN)和产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌(ESBsL-ECO)的阳性率;2005年1月至2007年12月对研究科室实施抗生素的综合干预策略。干预科室设为试验组,医院内条件相当的其他科室设为对照组(ICU除外)。结果:干预前(2004年),试验组ESBLs-KPN(43.90%)和ESBLs-ECO(45.83%)阳性率均高于对照组ESBLs-KPN(28.04%)和ESBLs-ECO(24.90%)(P<0.05);干预后试验组ESBLs-KPN阳性率呈显著下降趋势,由26.47%下降至17.65%(P<0.05);而对照组ESBLs-KPN和ESBLs-ECO阳性率呈显著上升趋势,前者由34.18%上升至52.94%(P<0.05),后者由47.03%上升至63.78%(P<0.05),且干预后试验组ESBLs-KPN和ESBLs-ECO阳性率均低于对照组ESBLs-KPN和ESBLs-ECO阳性率(P<0.05)。试验组减少了头孢他啶(CAZ)、头孢哌酮/舒巴坦(CFS)、亚胺培南(IMP)的消耗量,增加了头孢吡肟(FEP)的消耗量(P<0.05);对照组增加了CAZ,FEP和CFS的消耗量。结论:长期抗生素综合干预策略的实施可能有益于降低ESBLs-KPN和ESBLs-ECO的流行。 展开更多
关键词 抗生素干预 院内感染 阳性率 ESBLs-KPN ESBLs-ECO
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环形电切术活检结合冰冻切片在宫颈上皮内瘤变Ⅲ级诊治中的应用价值 被引量:14
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作者 丁晖 唐玲丽 +2 位作者 杨佳锦 刘青林 何凌 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第12期1256-1259,共4页
目的宫颈上皮内瘤变Ⅲ级(CINⅢ级)患者在子宫全切除术前,需应用锥切方法加冰冻切片病检再次评估病变范围。文中旨在探讨在CINⅢ级患者选择子宫全切除术前,采用环形电切术(LEEP)活检结合冰冻切片的方法评估病变严重程度和手术范围的应用... 目的宫颈上皮内瘤变Ⅲ级(CINⅢ级)患者在子宫全切除术前,需应用锥切方法加冰冻切片病检再次评估病变范围。文中旨在探讨在CINⅢ级患者选择子宫全切除术前,采用环形电切术(LEEP)活检结合冰冻切片的方法评估病变严重程度和手术范围的应用价值。方法回顾性分析2011年1月至2012年12月中南大学湘雅二医院妇产科拟切除子宫的CINⅢ级患者168例。分析阴道镜下活检、LEEP活检冰冻切片及石蜡切片和术后残余宫颈病检结果。结果冰冻切片病检结果显示,109例(64.88%)CINⅢ级、37例(22.02%)炎症及CINⅠ-Ⅱ级、22例(13.09%)微灶浸润癌及浸润癌患者与阴道镜活检结果一致。石蜡切片病检结果中,109例(64.88%)CINⅢ级、33例(19.6%)炎症及CINI-II级、26例(15.4%)微灶浸润癌及浸润癌患者与阴道镜活检结果一致。LEEP活检后用冰冻切片与石蜡切片分别进行病检,两者结果的一致率为95.2%,Kappa值=0.912(P=0.000)。146例宫颈LEEP活检为CINⅢ级患者残余宫颈中,75例(51.3%)存在残余病变。比较宫颈阴道镜活检与最终诊断,阴道镜活检漏诊26例浸润癌。结论 LEEP活检术结合冰冻切片,在CINⅢ级患者选择子宫全切除术前能够提供快速、准确的评估,根据冰冻切片病检决定手术范围是可行的。 展开更多
关键词 宫颈上皮内瘤变Ⅲ级 环形电切术活检 冰冻切片
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的主动外排系统基因qacA/B的检测及其意义 被引量:8
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作者 郑荣 王敏 +5 位作者 何斌 李先平 曹虹 梁好 卿之驹 唐爱国 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期537-542,共6页
目的:应用半巢氏聚合酶链式反应(PCR)技术检测临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)主动外排系统qac基因,了解qac基因的存在状况。方法:根据MRSA主动外排系统qacA和qacB基因序列设计引物,采用半巢氏PCR法对中南大学3所附属医院2006年... 目的:应用半巢氏聚合酶链式反应(PCR)技术检测临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)主动外排系统qac基因,了解qac基因的存在状况。方法:根据MRSA主动外排系统qacA和qacB基因序列设计引物,采用半巢氏PCR法对中南大学3所附属医院2006年8月至2008年3月临床分离的80株MRSA分别扩增qacA/B和qacB基因,并进行序列分析。结果:在80株受检MRSA中,检出qacA/B基因19株,检出率23.75%;qacB基因18株,检出率22.5%。序列分析显示,qac基因与qacA的参考序列(X56628)98%相同,与参考序列qacB(AF535087)97%相同。结论:半巢氏PCR法可成功检测MRSA的主动外排系统qac基因。qac基因阳性株在临床分离的MRSA中占有较高的比例,可能与其多重耐药有关。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 主动外排基因 半巢氏PCR
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高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸 被引量:19
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作者 王瑞 唐爱国 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期140-143,共4页
建立了一种能同时检测血清中的犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)和色氨酸(tryptophan,Trp)的高效液相色谱,紫外检测法。采用的色谱柱为Symmetry Shield RP-C18柱(150mm×3.9mm i.d.,5μm),流动相为15mmol/L乙酸钠-乙酸溶液(... 建立了一种能同时检测血清中的犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)和色氨酸(tryptophan,Trp)的高效液相色谱,紫外检测法。采用的色谱柱为Symmetry Shield RP-C18柱(150mm×3.9mm i.d.,5μm),流动相为15mmol/L乙酸钠-乙酸溶液(含2.7%乙腈,pH3.6),流速为1.0mL/min,紫外检测波长为225nm。血清标本经5.0%(体积分数)高氯酸溶液去除蛋白质后取上清液直接进样分析测定。研究结果表明,Kyn保留时间为3.5min,线性范围为0.098~49μmol/L,最低检出浓度为0.02μmol/L,回收率为90.82%~93.45%;Trp保留时间为8.1min,线性范围为4.9~490μmoL/L,最低检出浓度为0.20μmol/L,回收率为95.51%~98.67%。Kyn和Trp日内、日间测定的相对标准偏差均小于4%,苯丙氨酸、酪氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对该法均无干扰。该方法简便、快速、稳定、可行,可应用于临床和科研工作。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 紫外检测 色氨酸 犬尿氨酸 血清
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湖南地区强直性脊柱炎患者中TNF-α-238位点的多态性研究 被引量:6
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作者 王敏 杜世杰 +3 位作者 李先平 彭文峰 曹虹 陈进伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期136-140,145,共6页
Objective:To explore the correlations of TNF-α-238 site gene polymorphism and the onset of Ankylosing Spondylitis(AS)in Hunan Han population.Methods:100 AS samples(including serum and whole blood) were collected from... Objective:To explore the correlations of TNF-α-238 site gene polymorphism and the onset of Ankylosing Spondylitis(AS)in Hunan Han population.Methods:100 AS samples(including serum and whole blood) were collected from the Department of Immunology and Rheumatology of the Second Xiangya hospital from May 2008 to Jan 2009 and 90 samples of normal people were collected as control group.We detected the TNF-α-238 gene polymorphism of these subjects by using PCR-RFLP technique.The TNF-α level in the serum samples were measured by ELISA and HLA-B27 antigen was detected by flow cytometry(FCM).Then all of the data was analyzed by SPSS13.0 software.Results:There were 95 cases with the TNF-α-238 G/G genotype in 100 AS patients,5 cases with the G/A genotype.While in the control group,TNF-α-238 G/G genotype and G/A genotype were 88 cases and 2 cases respectively.There was no TNF-α-238 A/A genotype in both groups.The allele frequencies of G in AS group was higher than in the control group(98.9% vs.97.5%),while the allele frequencies of A in AS group was lower than in the control group(1.1% vs.2.5%).However,there were no significant difference both A allele frequencies and G allele frequencies(P>0.05).In addition,the average TNF-α level in AS group was higher than in the control group significantly(10.16±1.19 pg/ml vs.5.64±1.18 pg/ml).And the average TNF-α level in AS patients with the genotype of G/A was higher than that of with the G/G genotype(13.49±1.27 pg/ml vs.9.44±1.29 pg/ml).There was a very large difference of the positive ratio of HLA-B27 between two groups(χ2=114.975,P=0.000).After gene analysis of HLA-B27and TNF-α-238,the odds ratio(OR)was higher in both G/G genotype and HLA-B27 positive than HLA-B27 lonely.Conclusion:There is probably no relationship between the gene polymorphism of TNF-α-238 site and the onset of AS but the G/G genotype of TNF-α-238 may increase the sicken risk of AS in Hunan population. 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 肿瘤坏死因子 基因多态性 相关性
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分光光度法检测缺血性修饰白蛋白 被引量:11
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作者 胡敏 秦立新 陈新瑞 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期479-480,共2页
关键词 心肌缺血 白蛋白钴结合试验 缺血性修饰白蛋白
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双歧杆菌与乳酸杆菌在肾衰大鼠胃肠道不同部位的定植及其对小分子毒素的分解 被引量:7
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作者 熊文 蒋哲峰 +1 位作者 蒋云生 贺丽娟 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期35-39,共5页
目的:观察双歧杆菌与乳酸杆菌在慢性肾衰大鼠胃、空肠、回肠、升结肠和降结肠黏膜的定植情况,及其对肌酐(Cr)、尿素氮(UN)、尿酸(UA)的分解作用。方法:SD大鼠40只分为4组,A组为正常对照组10只行肾脏假手术,30只大鼠作5/6肾切除后分成B... 目的:观察双歧杆菌与乳酸杆菌在慢性肾衰大鼠胃、空肠、回肠、升结肠和降结肠黏膜的定植情况,及其对肌酐(Cr)、尿素氮(UN)、尿酸(UA)的分解作用。方法:SD大鼠40只分为4组,A组为正常对照组10只行肾脏假手术,30只大鼠作5/6肾切除后分成B组为病理对照组,C组和D组为治疗组,分别喂饲双歧杆菌和乳酸杆菌。1周后处死动物留取胃肠黏膜作细菌计数,并测定各段消化液及血中尿素氮、肌酐、尿酸浓度。结果:B组大鼠胃、空肠、回肠、升结肠和降结肠黏膜双歧杆菌与乳酸杆菌定植数低于A组,差异有统计学意义(P<0.05);C,D两组黏膜双歧杆菌与乳酸杆菌定植数高于B组和A组(P<0.05),且胃肠道各段黏膜双歧杆菌和乳酸杆菌计数之间差异有统计学意义(P<0.05),胃黏膜细菌数最少,降结肠黏膜细菌数最多;C,D两组各段消化液尿素氮、肌酐、尿酸水平低于B组(P<0.05),各段之间差异有统计学意义(P<0.05);C,D两组血清尿素氮、肌酐、尿酸水平低于B组(P<0.05)。消化道各段乳酸杆菌及双歧杆菌的定植数与血液及消化液中尿素氮、肌酐和尿酸均呈明显负相关。结论:消化道不同部位双歧杆菌和乳酸杆菌定植及各段消化液小分子尿毒素浓度存在差异;喂饲这两种细菌能降低肾衰大鼠血中小分子尿毒素浓度。 展开更多
关键词 5/6肾切除 双歧杆菌 乳酸杆菌 定植
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高效液相色谱—荧光法测定血清苯丙氨酸和酪氨酸 被引量:14
19
作者 洪敏 唐爱国 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期67-71,共5页
目的 :建立高效液相色谱 荧光法测定血清苯丙氨酸 (Phe)和酪氨酸 (Tyr)含量。方法 :血清标本经高氯酸溶液去蛋白质后 ,不需要荧光衍生 ,取上清液 2 0 μl直接进样 ,用HypersilC8色谱柱 (6 .0mm× 30 0mm ,10 μm)分离 ,流动相为乙... 目的 :建立高效液相色谱 荧光法测定血清苯丙氨酸 (Phe)和酪氨酸 (Tyr)含量。方法 :血清标本经高氯酸溶液去蛋白质后 ,不需要荧光衍生 ,取上清液 2 0 μl直接进样 ,用HypersilC8色谱柱 (6 .0mm× 30 0mm ,10 μm)分离 ,流动相为乙腈 水 (体积比 10 :90 ) ,流速 1.0ml/min ,在激发光波长 2 10nm ,发射光波长 30 3nm的条件下定量测定Phe和Tyr。结果 :Phe线性范围为 12 .2 12 2 0 .0 μmol/L ,最低检测限为 3μmol/L ,批内变异系数 (CV)为4 .0 7% ,批间CV为 7.17% ,平均回收率 10 2 .5 % ;Tyr线性范围为 5 .5~ 5 5 0 .0 μmol/L ,最低检测限为 0 .8μmol/L ,批内CV为2 .99% ,批间CV为 5 .2 3% ,平均回收率 10 2 .2 %。色氨酸、5 羟色胺、5 羟吲哚乙酸等物质不干扰实验。整个分析过程可在 30min内完成 ;测定结果与HPLC 紫外法比较 ,两者有很好的相关性。结论 :HPLC 荧光法能同时测定血清Phe和Tyr浓度 ,且简便、快速。 展开更多
关键词 高效液相色谱-荧光法 血清学测定 苯丙氨酸 酪氨酸 精密度 回收率
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重组日本血吸虫铁蛋白的表达纯化及诱导小鼠保护性免疫研究 被引量:4
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作者 王敏 易新元 +3 位作者 曾宪芳 袁仕善 李先平 罗秀菊 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第2期113-116,共4页
目的 表达、纯化重组日本血吸虫铁蛋白 ,观察其免疫小鼠后抗日本血吸虫的免疫保护作用。方法 用基因重组技术 ,将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆至表达载体 pGMC上 ;在IPTG诱导下 ,重组日本血吸虫铁蛋白得到高效表达 ;用电泳层析法分离... 目的 表达、纯化重组日本血吸虫铁蛋白 ,观察其免疫小鼠后抗日本血吸虫的免疫保护作用。方法 用基因重组技术 ,将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆至表达载体 pGMC上 ;在IPTG诱导下 ,重组日本血吸虫铁蛋白得到高效表达 ;用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白 ;用SDS -PAGE和Western -blot鉴定表达纯化产物 ;用纯化的重组铁蛋白免疫小鼠三次 ,分别在 0、2、4周进行。第 6周每鼠经腹部感染 4 0± 1条日本血吸虫尾蚴。 4 2天后剖杀冲虫 ,计数虫数及肝卵数。结果 纯化的重组铁蛋白分子量为 4 0kD ,具有较好的免疫原性 ,能被日本血吸虫感染兔血清识别。与对照组相比 ,纯化重组铁蛋白免疫小鼠组的减虫率为 2 4 5 % ,减卵率为 4 5 8%。结论 重组日本血吸虫铁蛋白不仅在大肠杆菌中得到高效表达 ,而且纯化的铁蛋白分子能诱导抗日本血吸虫病的保护性免疫。 展开更多
关键词 重组日本血吸虫铁蛋白 表达 纯化 诱导 小鼠 保护性免疫
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