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体外骨对甲状旁腺激素相关蛋白-141的双相反应 被引量：3
1
作者 段炳南 邓锡云 +1 位作者 黄河 张建湘 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期148-151,共4页
目的:通过体外器官培养系统,探讨甲状旁腺激素相关蛋白(Parathyroid hormone-related protein,PTHrP)在新骨生成和骨组织破坏方面的效应。方法:将全长PTHrP(-36～+141)cDNA克隆进真核表达载体pcDNA3.1(+),并用重组质粒pcDNA3.1-PTHrP转... 目的:通过体外器官培养系统,探讨甲状旁腺激素相关蛋白(Parathyroid hormone-related protein,PTHrP)在新骨生成和骨组织破坏方面的效应。方法:将全长PTHrP(-36～+141)cDNA克隆进真核表达载体pcDNA3.1(+),并用重组质粒pcDNA3.1-PTHrP转染LCC15-MB乳腺癌细胞,在体外器官培养系统里加不同浓度含PTHrP的条件培养上清液培养小鼠颅盖骨。通过组织学方法检测PTHrP141在新骨形成和骨组织破坏方面的效应。结果:转染的乳腺癌细胞产生的PTHrP在低剂量时诱导骨的形成,而高剂量时诱导骨的再吸。结论:PTHrP在新骨的形成和骨组织的破坏方面因其浓度的不同而具有不同效应。 展开更多
关键词 甲状旁腺激素相关蛋白 颅盖骨 成骨细胞 破骨细胞
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TLR5在不同非小细胞肺癌细胞株的表达及其活化机制的初步探讨 被引量：5
2
作者 周辉 罗媚 +5 位作者 文亦戈 马安迪 罗永忠 易青 陈建华 肖玲 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期8-15,共8页
背景与目的已有的研究表明:Toll样受体5(toll-like receptor 5,TLR5)在肿瘤起始和发展中发挥重要作用。我们前期研究发现,TLR5在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中高表达,但其在NSCLC高表达后的信号通路活化情况的... 背景与目的已有的研究表明:Toll样受体5(toll-like receptor 5,TLR5)在肿瘤起始和发展中发挥重要作用。我们前期研究发现,TLR5在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中高表达,但其在NSCLC高表达后的信号通路活化情况的研究并不多见。本研究旨在探讨TLR5在不同NSCLC细胞株上的表达,及其在NSCLC细胞中活化的机制。方法用免疫荧光、RT-PCR和Western blot方法检测TLR5在三种不同NSCLC细胞株中的表达。分别用0μg/m L、0.01μg/m L、0.1μg/m L、1μg/m L、5μg/m L、10μg/m L的鞭毛蛋白刺激,用NF-κB荧光素酶报告基因质粒瞬时转染后,检测细胞内NF-κB荧光素酶的活性。选择TLR5表达最高的SPC-A-1细胞株为实验对象,选择0.1μg/m L的鞭毛蛋白,分别用0μg/m L、0.01μg/m L、0.1μg/m L、1μg/m L、10μg/m L的TLR5抗体抑制通路活化,检测细胞内NF-κB荧光素酶的活性,验证TLR5活化通路。构建TLR5-sh RNA,转染SPC-A-1细胞48 h后,以0.1μg/m L浓度鞭毛蛋白分别刺激SPC-A-1细胞及转染的SPC-A-1细胞,在刺激0 min、10 min、30 min、60 min,用Western blot方法比较TLR5信号通路因子p-IKBα、p-ERK1/2、p-JNK、IKBα、ERK1/2的变化。结果 TLR5在肺腺癌细胞株SPC-A-1中呈高表达,且主要表达在细胞膜上。三种细胞株中SPC-A-1细胞NF-κB荧光素酶的活性最高,呈浓度依赖性,0.1μg/m L鞭毛蛋白即可明显增强NF-κB荧光素酶的活性(P<0.05);而SPC-A-1细胞内NF-κB荧光素酶的活性可被TLR5抗体抑制,与TLR5抗体浓度负相关(P<0.05)。与0 min相比较,SPC-A-1细胞内p-IKBα、p-ERK1/2、p-JNK水平在鞭毛蛋白刺激10 min即明显增高,30 min达到高峰,60 min开始下降(P<0.05),且与10 min和60 min组相比,p-IKBα、p-ERK1/2、p-JNK水平在30 min增高(P<0.05);而IKBα、ERK1/2的水平无明显变化(P>0.05)。以适合浓度鞭毛蛋白刺激转染的SPC-A-1细胞,p-IKBα、p-JNK蛋白均未检出,IKBα、ERK1/2蛋白的水平无明显变化(P>0.05),p-ERK1/2蛋白水平随着时间延长明显增高(P<0.05)。结论外源性配体鞭毛蛋白可激活NSCLC细胞株TLR5蛋白,启动下游信号通路,可能与NSCLC的发生发展有关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 TLR5 鞭毛蛋白 信号通路
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提高血流切应力对老年大鼠后肢侧支血管生长的作用 被引量：1
3
作者 董丽萍 刘光敏 +1 位作者 王加杰 蔡维君 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期527-531,535,共6页
目的利用老年大鼠股动脉结扎加股动静脉吻合和单纯股动脉结扎的侧支血管生长模型探讨提高血流切应力对老年大鼠侧支血管生长的作用。方法老年SD大鼠（24月龄）30只,分为假手术组,结扎组和吻合组。结扎组大鼠行股动脉结扎手术,吻合组大... 目的利用老年大鼠股动脉结扎加股动静脉吻合和单纯股动脉结扎的侧支血管生长模型探讨提高血流切应力对老年大鼠侧支血管生长的作用。方法老年SD大鼠（24月龄）30只,分为假手术组,结扎组和吻合组。结扎组大鼠行股动脉结扎手术,吻合组大鼠行股动脉结扎加股动静脉吻合手术。大鼠术后存活1周,每组5只大鼠取后肢带侧支血管的肌肉做冰冻切片用于免疫荧光组织化学法检测eNOS,Ki67和MMP2的表达;另外5只使用明胶四氧化三铅进行血管造影再用X线拍照观察侧支血管的生长情况。结果与假手术组相比,结扎组的大鼠后肢侧支血管数量增多（P〈0.01）,Ki67阳性细胞数量增多（P〈0.01）,eNOS的表达显著增强（P〈0.001）,MMP2的表达也有所增强（P〈0.05）。吻合组与结扎组相比,大鼠的后肢侧支血管数量进一步增多（P〈0.01）,Ki67阳性细胞数量明显增多（P〈0.01）,eNOS的表达显著增强（P〈0.001）,MMP2的表达也明显增强（P〈0.01）。结论提高血流切应力能促进老年大鼠缺血后肢侧支血管生长。 展开更多
关键词 老化 侧支血管 吻合
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快速冷冻剂R-134a于石蜡切片制作中的应用 被引量：3
4
作者 晏纯 李青耘 +2 位作者 叶俏娜 曹薇 肖玲 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第3期355-358,共4页
石蜡切片技术广泛应用于组织学与病理学教学、科研与临床诊断[1,2],其制作需经固定、脱水透明、浸蜡、包埋、切片、展片、捞片、烤片、脱蜡、染色等一系列复杂的步骤[3],耗时较长。石蜡切片质量的好坏与诸多因素相关,其中切片尤为关键... 石蜡切片技术广泛应用于组织学与病理学教学、科研与临床诊断[1,2],其制作需经固定、脱水透明、浸蜡、包埋、切片、展片、捞片、烤片、脱蜡、染色等一系列复杂的步骤[3],耗时较长。石蜡切片质量的好坏与诸多因素相关,其中切片尤为关键。具有一定硬度的组织蜡块是保障切片能顺利进行的条件,而蜡块硬度与环境温度呈负相关。研究者常使用冰块冷却蜡块切面,利用热传导降低蜡块温度以提高蜡块硬度[4]。但该方法存在效率低、易产生水珠干扰操作等缺点。 展开更多
关键词 石蜡切片技术 环境温度 组织学与病理学 展片 冷冻剂 蜡块 烤片 热传导
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