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金银花化学成分及药理研究进展 被引量:129
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作者 赵国玲 刘佳佳 +2 位作者 林丹 章晓骅 王晖 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期973-976,共4页
关键词 金银花 化学成分 药理研究 综述
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一种可电离阳离子脂质构建脂质体用于siRNA递送的体外研究
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作者 胡敦 邹俊娜 +2 位作者 聂盛丹 王艳 王珊 《中南大学学报(医学版)》 CSCD 北大核心 2024年第10期1591-1600,共10页
目的:干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)可通过序列特异性的RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默疾病相关基因的表达。含有阳离子脂质的脂质体能够有效地将核酸递送至胞质使其发挥作用,但毒性较大。本文旨在通过利用天然氨基酸合... 目的:干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)可通过序列特异性的RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默疾病相关基因的表达。含有阳离子脂质的脂质体能够有效地将核酸递送至胞质使其发挥作用,但毒性较大。本文旨在通过利用天然氨基酸合成一种新型可电离脂质——N^(ε)-月桂酰基赖氨酸酰胺(N^(ε)-laruoyl-lysine amide,LKA)并构建脂质体,探究其理化性质的表征及细胞相关实验,系统评估这一新型可电离脂质构建的脂质体作为核酸递送系统的潜力。方法:采用化学法合成LKA,并通过核磁共振氢谱和质谱进行表征验证;采用纸电泳实验探究LKA的pH响应性电荷变化情况;采用乙醇注入法制备LKA构建的空白脂质体(N^(ε)-laruoyl-lysine amide-Lipoprotein,LKA-LP)、包载信号转导及转录激活因子3-siRNA(signal transducer and activator of transcription 3-siRNA,STAT3-siRNA)的脂质体(LKA-LP@STAT3-siRNA)和包载尼罗红的脂质体(LKA-LP@Nile Red)。采用激光粒度分析仪和扫描电子显微镜对LKA-LP@STAT3-siRNA进行粒径大小及形态表征检测;采用琼脂糖凝胶电泳法检测LKA-LP@STAT3-siRNA的包封率。采用LKA-LP@Nile Red考察人宫颈上皮癌细胞系HeLa细胞和小鼠胚胎成纤维细胞系3T3对于脂质体的摄取情况;采用花菁5(Cyanine 5,Cy5)标志STAT3-siRNA,结合溶酶体绿色荧光探针评价人肺腺癌上皮细胞系A549细胞中LKA-LP@STAT3-siRNA的溶酶体逃逸能力;采用实时反转录聚合酶链反应检测STAT3基因沉默效果;采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法测定LKA-LP@STAT3-siRNA对于HeLa细胞的杀伤作用。结果:核磁共振氢谱和质谱检测结果提示LKA合成成功。纸电泳实验结果显示从pH 7.4减小至pH 5.5的过程中,LKA的正电荷量逐渐增加。LKA-LP@STAT3-siRNA呈大小均匀的类球形,粒径为(164.1±3.27)nm,多分散性指数为0.174±0.029,7 d内可以保持较好的稳定性,核酸的包封率为(64.6±2.8)%。细胞摄取实验结果显示,与pH 7.4时比较,pH5.0时细胞对LKA-LP摄取增多,且与3T3细胞比较,HeLa细胞摄取增多更明显。溶酶体逃逸实验显示LKA-LP与溶酶体重叠率约为42.34%,证明LKA-LP可以顺利地从溶酶体逃逸。基因沉默实验结果显示,50和100 nmol/L的LKALP@STAT3-siRNA处理后,HeLa细胞中STAT3的mRNA相对表达水平均显著降低(均P<0.01)。细胞毒性实验结果显示,50和100 nmol/L的LKA-LP@STAT3-siRNA处理后,HeLa细胞存活率均显著低于3T3细胞(均P<0.01)。结论:可电离阳离子脂质LKA可构建脂质体LKA-LP以用于siRNA药物的递送。在细胞层面成功实现了基因沉默,且对HeLa细胞产生了特异性杀伤作用,为LKA-LP作为核酸递送载体的核酸药物的开发奠定了坚实且充足的基础。 展开更多
关键词 干扰小RNA递送 可电离阳离子脂质 脂质体 化学合成 HELA细胞
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异柱五加叶中齐墩果烷型皂苷的研究(英文) 被引量:9
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作者 刘向前 金寅钐 +2 位作者 陆昌洙 南相吉 李龙燮 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2008年第1期66-69,共4页
利用柱色谱从异柱五加(Acanthopanax sieboldianus forma albeofolium Yook)叶的甲醇提取液中分离出四个齐墩果烷型皂苷类化合物。通过波谱方法(1HNMR、13CNMR、2DNMR和FAB-MS)鉴定它们分别为kalo-panax-saponin B(1)、acanthopanax sap... 利用柱色谱从异柱五加(Acanthopanax sieboldianus forma albeofolium Yook)叶的甲醇提取液中分离出四个齐墩果烷型皂苷类化合物。通过波谱方法(1HNMR、13CNMR、2DNMR和FAB-MS)鉴定它们分别为kalo-panax-saponin B(1)、acanthopanax saponin CP3(2)、kalopanax-saponin A(3)和sieboldianoside A(4)。 展开更多
关键词 异柱五加 齐墩果烷型皂苷 Kalopanax-saponin B ACANTHOPANAX SAPONIN CP3 Sieboldianoside A Kalopanax-saponin A
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银杏致密细胞团颗粒悬浮培养生产银杏内酯研究 被引量:7
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作者 刘佳佳 江文辉 +2 位作者 赵国玲 郭勇 郑穗平 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2001年第4期16-19,共4页
以MS培养基上培养的银杏高产细胞系MH 3为材料 ,SH培养基为出发培养基 ,通过优化营养元素和激素配比 ,建立银杏致密细胞团悬浮培养体系 ,在培养过程中添加前体异戊二烯和香叶醇有助于提高银杏内酯产量。结果表明 :颗粒粒径大小影响银杏... 以MS培养基上培养的银杏高产细胞系MH 3为材料 ,SH培养基为出发培养基 ,通过优化营养元素和激素配比 ,建立银杏致密细胞团悬浮培养体系 ,在培养过程中添加前体异戊二烯和香叶醇有助于提高银杏内酯产量。结果表明 :颗粒粒径大小影响银杏内酯的产生 ,选用 0 8SH培养基 ,添加浓度为 3mg/L的 2 ,4 D和 2mg/L的 6 BA ,致密颗粒的平均粒径为 3 36mm ,细胞中银杏内酯的含量为 5 5 7μg/g·dw。在培养过程中的 10d添加 10 0mg/L的香叶醇 ,细胞中银杏内酯的含量达到 6 76 展开更多
关键词 致密细胞团颗粒 银杏内酯 悬浮培养
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2型糖尿病患者认知功能障碍与肾微血管病变的相关性研究 被引量:22
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作者 时夏捷 张育仁 +6 位作者 牛宏涛 王然 沈津京 周善磊 杨浩波 王珊 吴静 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期143-150,共8页
目的:通过检测不同时期的2型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者认知功能及脑代谢的变化,探讨2型糖尿病认知功能障碍与肾微血管病变的相关性。方法:86例2型糖尿病患者根据尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)水... 目的:通过检测不同时期的2型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者认知功能及脑代谢的变化,探讨2型糖尿病认知功能障碍与肾微血管病变的相关性。方法:86例2型糖尿病患者根据尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)水平分为糖尿病无肾病组(DM组,n=33)、早期DN组(DN-III组,n=26)、临床期DN组(DN-IV组,n=27),另选健康受试者为正常对照组(NC组,n=30)。所有受试者均检测血生物化学指标和UAER,使用单光子发射计算机断层成像术检测肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)。用简明精神状态量表(mini-mental state examination,MMSE)和蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment,Mo CA)评估认知功能的变化。用氢磁共振质子波谱分析技术检测N-乙酰天冬氨酸(N-acetylasparte,NAA)峰、含胆碱复合物(choline-containing compounds,Cho)峰、肌酸复合物(creatine,Cr)峰的共振峰波谱峰值及波峰曲线下面积。结果:1)4组受试者MMSE评分差异均无统计学意义(均P>0.05)。DN-III组及DN-IV组患者Mo CA总分较对照组均显著降低(均P<0.05);2)DN组左侧NAA值较DM组显著下降(t=3.826,P<0.05),而左侧Cho水平明显增高(t=4.373,P<0.05);两组患者中左侧Cho/Cr差异有统计学意义(t=3.693,P<0.05);3)Pearson相关分析显示:2型糖尿病患者Mo CA评分与UAER呈负相关(r=-0.285,P<0.05),与GFR呈正相关(r=0.379,P<0.05);4)Logistic回归分析显示UAER增高与GFR下降是糖尿病认知功能障碍的独立危险因素。结论:2型糖尿病患者认知功能障碍与肾微血管病变存在相关性,且随着肾损害程度的加重,认知功能障碍呈逐渐加重的趋势。DN患者海马存在代谢物质的改变,表现为左侧海马Cho/Cr增高。 展开更多
关键词 2型糖尿病 糖尿病肾病 认知障碍 磁共振波谱学
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小前胡中香豆素类成分研究 被引量:4
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作者 金京玉 刘向前 +1 位作者 陆昌洙 朴相勇 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2006年第1期7-10,共4页
本文对韩国植物新种小前胡(Angelica czernaeviaKita forma dentate Yook)的根部进行了化学成分研究,从中得到了7个香豆素类化合物,利用波谱方法分别鉴定为异欧前胡素(1),川白芷内酯(2),紫花前胡素(3),7-羟基香豆素(4),紫花前胡醇(5),... 本文对韩国植物新种小前胡(Angelica czernaeviaKita forma dentate Yook)的根部进行了化学成分研究,从中得到了7个香豆素类化合物,利用波谱方法分别鉴定为异欧前胡素(1),川白芷内酯(2),紫花前胡素(3),7-羟基香豆素(4),紫花前胡醇(5),紫花前胡苷元(6)和紫花前胡苷(7);同时采用高效液相色谱法对该植物的根、茎、叶和果实进行了主成分川白芷内酯(2)和紫花前胡素(3)定量分析。 展开更多
关键词 伞形科 小前胡 香豆素 高效液相色谱法 主成分定量分析
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高脂饮食小鼠脂肪组织胞外囊泡损伤海马神经元的研究 被引量:2
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作者 周迪 吕子阳 +2 位作者 聂盛丹 周高雅 王珊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期79-85,共7页
目的探讨高脂饮食小鼠脂肪组织分泌胞外囊泡对海马神经元以及小鼠认知行为的影响。方法C57BL/6J雄性小鼠20只,随机分为2组(n=10):正常饮食(normal diet,ND)组、高脂饮食(high-fat diet,HFD)组,分组喂养28周,每周记录小鼠体重。于第27周... 目的探讨高脂饮食小鼠脂肪组织分泌胞外囊泡对海马神经元以及小鼠认知行为的影响。方法C57BL/6J雄性小鼠20只,随机分为2组(n=10):正常饮食(normal diet,ND)组、高脂饮食(high-fat diet,HFD)组,分组喂养28周,每周记录小鼠体重。于第27周检测小鼠血糖、胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),第28周用Morris水迷宫实验检测小鼠学习和记忆能力。取小鼠脂肪组织,HE染色观察形态学差异,并提取其分泌的胞外囊泡,采用TEM及NTA进行鉴定。将PKH 67标记的脂肪组织胞外囊泡经尾静脉注射正常小鼠,30 h后检测脑组织海马神经元摄取脂肪组织胞外囊泡的情况;用相同蛋白量的胞外囊泡处理原代海马神经元,观察其对神经元细胞活性及细胞形态的影响。结果与ND组相比,HFD组小鼠体重明显增加,血糖及胰岛素水平升高,并出现胰岛素抵抗状态。HFD组小鼠逃避潜伏期显著延长,目标象限停留时间明显缩短。HFD组小鼠脂肪细胞明显增大,脂肪组织分泌的胞外囊泡明显增多。脂肪组织分泌的胞外囊泡可被原代海马神经元及正常小鼠脑组织海马神经元摄取。与ND组相比,HFD组小鼠脂肪组织胞外囊泡处理可明显减少海马神经元树突长度、初级树突数和次级树突数,并降低神经元细胞活性。结论长期高脂饮食可能通过影响脂肪组织胞外囊泡,损伤海马神经元。 展开更多
关键词 高脂饮食 肥胖 脂肪组织 胞外囊泡 海马神经元损伤 认知功能
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核酸适配体靶向递送siRNA的设计策略及应用进展 被引量:2
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作者 吕子阳 任欢欢 +1 位作者 聂盛丹 王珊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1141-1146,共6页
小干扰RNA(small interfering,siRNA)诱发的RNA干扰在疾病治疗中展现出巨大的潜力。然而,由于siRNA的稳定性较差,缺乏靶向性,递送siRNA到靶组织/细胞并诱导基因沉默仍是极具挑战的事情。核酸适配体是一类能够特异性识别靶物质的寡核苷... 小干扰RNA(small interfering,siRNA)诱发的RNA干扰在疾病治疗中展现出巨大的潜力。然而,由于siRNA的稳定性较差,缺乏靶向性,递送siRNA到靶组织/细胞并诱导基因沉默仍是极具挑战的事情。核酸适配体是一类能够特异性识别靶物质的寡核苷酸序列。将核酸适配体与siRNA共价结合,或与其他siRNA载体连接可引导siRNA进入靶组织/细胞。该文综述了近几年基于核酸适配体靶向递送siRNA在疾病治疗中的设计策略及应用的研究进展,并讨论了核酸适配体介导siRNA传递在临床转化方面的挑战与前景。 展开更多
关键词 核酸适配体 SIRNA 纳米载体 设计策略 靶向递送 基因沉默
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纳米银制备工艺优化及其生物活性 被引量:1
9
作者 邹俊娜 罗文环 +1 位作者 王珊 王艳 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1398-1407,共10页
目的:近年来采用生物法合成金属纳米粒子受到广泛关注,广大研究者试图寻找对环境污染小、易于制备的生物法来合成纳米银粒子(silver nanoparticles,AgNPs),并探究制备条件对合成AgNPs的影响。本研究旨在采用生物法合成粒径可控、效果良... 目的:近年来采用生物法合成金属纳米粒子受到广泛关注,广大研究者试图寻找对环境污染小、易于制备的生物法来合成纳米银粒子(silver nanoparticles,AgNPs),并探究制备条件对合成AgNPs的影响。本研究旨在采用生物法合成粒径可控、效果良好的AgNPs,并对比其与化学法制备AgNPs的生物活性差异。方法:本研究分别以口蘑水提液(water extract of Tricholomagambosum,WET)、卷曲乳杆菌发酵上清液(cell-free supernatant of Lactobacillus crispatus,CFS)为还原剂及保护剂,AgNO_(3)溶液为前驱体,采用生物法制备AgNPs,同时采用柠檬酸钠化学法合成AgNPs。研究温度、pH、提取液用量、光照条件对生物法合成AgNPs的影响,并对所合成的AgNPs进行表征分析,最后对比上述3种AgNPs的抗菌效果以及对细胞的毒性和选择性。结果:各种表征证明上述3种方法都成功合成了AgNPs。2种生物法制备的AgNPs(WET-AgNPs和CFS-AgNPs)受pH及温度的影响较大,且都比化学法制备的AgNPs抑菌效果好(均P<0.01);其中,WET-AgNPs的抑菌效果比CFS-AgNPs略好。与化学法制备的AgNPs相比,WET-AgNPs和CFS-AgNPs对正常细胞的毒性低(均P<0.01),其中CFS-AgNPs在浓度为480μg/mL时细胞选择性较好。结论:WET和CFS可以合成具有生物活性的AgNPs,且与化学法制备的AgNPs有生物活性的差异。 展开更多
关键词 纳米银粒子 生物合成 表征 生物活性
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基于胶质瘤细胞来源胞外囊泡制作的仿生纳米材料在靶向递送STAT3-siRNA中的作用
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作者 胡敦 李鑫 +1 位作者 聂盛丹 王珊 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1646-1654,共9页
目的:胶质瘤是最常见的颅内原发性肿瘤,目前仍无理想的治疗手段,基因治疗作为胶质瘤治疗的新方法之一近年来备受关注,但因缺少有效的递送载体,从而使其在胶质瘤治疗中的应用仍十分有限。本研究旨在探讨用胶质瘤细胞来源胞外囊泡(extrace... 目的:胶质瘤是最常见的颅内原发性肿瘤,目前仍无理想的治疗手段,基因治疗作为胶质瘤治疗的新方法之一近年来备受关注,但因缺少有效的递送载体,从而使其在胶质瘤治疗中的应用仍十分有限。本研究旨在探讨用胶质瘤细胞来源胞外囊泡(extracellular vessel,EV)制作的仿生纳米材料靶向递送基因药物STAT3-siRNA来治疗胶质瘤的可行性。方法:首先通过超速离心法提取胶质瘤细胞U251来源的EV(U251 glioma cells derived EV,EV_(U251)),采用纳米粒子跟踪分析法对其粒径分布进行表征分析,透射电镜进行形貌分析,蛋白质印迹法验证其表面特征蛋白的表达;使用膜染料试剂盒PKH67将EV_(U251)标记后,通过细胞摄取实验验证其靶向U251的归巢能力;采用低渗法去除EV_(U251)的内容物,并通过微孔膜制备EV_(U251)囊泡(EV_(U251) memberane,EVM_(U251));采用电转染法将EVM_(U251)中载入靶向信号转导与转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)(STAT3-siRNA)制成仿生纳米材料EVM_(U251)@STAT3-siRNA;使用real-time PCR对成功包载的siRNA进行定量分析,并计算包载率及载药率;采用荧光染料CY5标记siRNA后,通过细胞摄取实验评价仿生纳米材料EVM_(U251)@CY5-siRNA靶向U251细胞的能力,再结合绿色溶酶体示踪剂评价该仿生纳米材料的溶酶体逃逸能力;最后通过体外细胞实验分别检测EVM_(U251)@STAT3-siRNA敲低STAT3 mRNA表达水平以及选择性杀伤U251的能力。结果:EV_(U251)粒径分布范围为50~200 nm,呈天然的圆盘形态,并且在其膜上检测到EV标志性蛋白质的表达。细胞摄取实验证明其具有靶向U251的归巢能力。将EV_(U251)制备为EVM_(U251)@STAT3-siRNA后,粒径变为(177.9±5.0)nm,siRNA包载率为(33.5±2.2)%。细胞摄取实验证明其仍具有靶向U251细胞的能力,且能成功避开溶酶体降解而将siRNA递送至胞质。体外细胞实验证明EVM_(U251)@STAT3-siRNA能有效敲低U251细胞STAT3基因的表达,并能对U251细胞产生选择性杀伤。结论:用EV_(U251)制作的仿生纳米材料EVM_(U251)@STAT3-siRNA能选择性敲低U251细胞STAT3基因的表达,并能产生选择性杀伤作用,可为胶质瘤的基因治疗提供新思路。 展开更多
关键词 胶质瘤 基因治疗 干扰小RNA 胞外囊泡 核酸纳米载体 靶向递送 信号转导与转录活化因子3
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