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超高效液相色谱-串联质谱法定量测定低致敏婴幼儿配方乳粉中牛乳过敏原
1
作者
徐道坤
杨洋
+4 位作者
黄浩伦
孙小杰
胡文彦
刘新梅
杨军
《色谱》
北大核心
2025年第11期1244-1251,共8页
本研究以低致敏婴幼儿配方乳粉为研究对象,结合抗原表位特征序列和质谱响应,对先前挖掘的18条表征牛乳过敏蛋白的特征多肽进一步筛选,得到6条定量多肽。随后建立了同时定量测定低致敏婴幼儿配方乳粉中6种牛乳致敏蛋白(α-乳白蛋白、β-...
本研究以低致敏婴幼儿配方乳粉为研究对象,结合抗原表位特征序列和质谱响应,对先前挖掘的18条表征牛乳过敏蛋白的特征多肽进一步筛选,得到6条定量多肽。随后建立了同时定量测定低致敏婴幼儿配方乳粉中6种牛乳致敏蛋白(α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、αS1-酪蛋白、αS2-酪蛋白、β-酪蛋白及κ-酪蛋白)的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)分析方法。添加牛乳致敏蛋白标准品的空白低致敏婴幼儿配方乳粉经过蛋白提取、酶解和净化后进行UHPLC-MS/MS分析。根据每种蛋白不同添加浓度和质谱响应建立标准曲线。结果表明:6种牛乳致敏蛋白在0.05~500 mg/kg内线性范围良好,相关系数(r^(2))均大于0.99,检出限为0.05~5.0 mg/kg,定量限为0.1~10.0 mg/kg,优于文献报道的3种基于质谱和2种基于酶联免疫吸附试验(ELISA)的检测方法。在低、中、高3个添加水平下,6种牛乳致敏蛋白的加标回收率为74.8%~93.4%,日内准确度为-25.09%~-6.09%,日间准确度为-24.0%~-5.41%;日内精密度为1.08%~5.05%,日间精密度为1.35%~4.85%。运用该方法对市售低致敏婴幼儿配方乳粉进行检测,3种部分水解低致敏婴幼儿配方乳粉(pHF)和2种深度水解低致敏婴幼儿配方乳粉(eHF)检出牛乳过敏蛋白,检出量为0.48~27.36 mg/kg。本方法灵敏度好,通量高,可用于低致敏婴幼儿配方乳粉中牛乳过敏原的定量筛查。
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关键词
牛乳过敏原
超高效液相色谱-串联质谱法
多肽
非标定量
低致敏婴幼儿配方乳粉
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职称材料
题名
超高效液相色谱-串联质谱法定量测定低致敏婴幼儿配方乳粉中牛乳过敏原
1
作者
徐道坤
杨洋
黄浩伦
孙小杰
胡文彦
刘新梅
杨军
机构
南京市食品药品监督检验院
江苏省市场监管局重点实验室(食品真实性鉴别技术)
东部战区空军医院普外科
出处
《色谱》
北大核心
2025年第11期1244-1251,共8页
基金
江苏省市场监管局科技计划项目(KJ2022076)。
文摘
本研究以低致敏婴幼儿配方乳粉为研究对象,结合抗原表位特征序列和质谱响应,对先前挖掘的18条表征牛乳过敏蛋白的特征多肽进一步筛选,得到6条定量多肽。随后建立了同时定量测定低致敏婴幼儿配方乳粉中6种牛乳致敏蛋白(α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、αS1-酪蛋白、αS2-酪蛋白、β-酪蛋白及κ-酪蛋白)的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)分析方法。添加牛乳致敏蛋白标准品的空白低致敏婴幼儿配方乳粉经过蛋白提取、酶解和净化后进行UHPLC-MS/MS分析。根据每种蛋白不同添加浓度和质谱响应建立标准曲线。结果表明:6种牛乳致敏蛋白在0.05~500 mg/kg内线性范围良好,相关系数(r^(2))均大于0.99,检出限为0.05~5.0 mg/kg,定量限为0.1~10.0 mg/kg,优于文献报道的3种基于质谱和2种基于酶联免疫吸附试验(ELISA)的检测方法。在低、中、高3个添加水平下,6种牛乳致敏蛋白的加标回收率为74.8%~93.4%,日内准确度为-25.09%~-6.09%,日间准确度为-24.0%~-5.41%;日内精密度为1.08%~5.05%,日间精密度为1.35%~4.85%。运用该方法对市售低致敏婴幼儿配方乳粉进行检测,3种部分水解低致敏婴幼儿配方乳粉(pHF)和2种深度水解低致敏婴幼儿配方乳粉(eHF)检出牛乳过敏蛋白,检出量为0.48~27.36 mg/kg。本方法灵敏度好,通量高,可用于低致敏婴幼儿配方乳粉中牛乳过敏原的定量筛查。
关键词
牛乳过敏原
超高效液相色谱-串联质谱法
多肽
非标定量
低致敏婴幼儿配方乳粉
Keywords
cow’s milk allergens(CMAs)
ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry(UHPLC-MS/MS)
peptides,label-free quantification(LFQ)
hypoal⁃lergenic infant formula
分类号
O658 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
超高效液相色谱-串联质谱法定量测定低致敏婴幼儿配方乳粉中牛乳过敏原
徐道坤
杨洋
黄浩伦
孙小杰
胡文彦
刘新梅
杨军
《色谱》
北大核心
2025
0
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职称材料
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