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人源抗TLR4抗体IgG2对对乙酰氨基酚诱导小鼠急性肝损伤的保护作用 被引量:3
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作者 姚传霞 王怡雯 +5 位作者 龚丹丹 李丽莉 马艳 匡衡 周婷婷 汪茂荣 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期645-651,共7页
目的:研究人源抗TLR4抗体IgG2(human-TLR4 IgG2,h TLR4 IgG2)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导肝损伤的保护效应,探讨其在药物性肝损伤中的保护作用。方法:以人源抗TLR4抗体Fab基因为模板,扩增其可变区基因,构建人源抗TLR4抗体I... 目的:研究人源抗TLR4抗体IgG2(human-TLR4 IgG2,h TLR4 IgG2)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导肝损伤的保护效应,探讨其在药物性肝损伤中的保护作用。方法:以人源抗TLR4抗体Fab基因为模板,扩增其可变区基因,构建人源抗TLR4抗体IgG2真核表达载体,转染CHO-S细胞,筛选稳定表达细胞株,收集细胞上清,Protein G柱纯化抗TLR4抗体IgG2。将18只C57BL/6J小鼠随机分成3组:生理盐水组、APAP(600 mg/kg)组和APAP+hTLR4 IgG2(5 mg/kg)组,统计小鼠腹腔注射APAP后24 h的存活率;重复上述实验分组,检测小鼠腹腔注射APAP 8 h后,血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)、白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平,取肝脏做病理分析并使用Western blot检测凋亡蛋白的表达。结果:成功构建并表达纯化人源抗TLR4抗体IgG2;ELISA结果显示,抗体效价为1∶204800。与APAP组相比,APAP+hTLR4 IgG2组小鼠的24 h存活率显著增加(P<0.05);血清AST、ALT以及炎性细胞因子的表达水平显著降低,具有统计学意义(P<0.05);病理分析结果显示,与模型组相比,人源抗TLR4抗体IgG2治疗组的小鼠肝组织炎性细胞浸润、充血和坏死等症状明显改善;Western blot结果显示凋亡相关蛋白的表达减少。结论:人源抗TLR4抗体IgG2能够抑制炎症因子的表达及细胞凋亡,对APAP诱导的小鼠肝损伤有显著的保护作用。 展开更多
关键词 人源抗TLR4抗体IgG2 对乙酰氨基酚 炎症因子 细胞凋亡
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