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广东省东莞市犬猫狂犬病免疫抗体消长情况调查
1
作者 杨振波 邹潍力 +5 位作者 张端秀 王振谦 郭永添 黄炳炽 张险朋 李小军 《中国动物检疫》 2025年第8期13-17,共5页
为了解东莞市犬猫狂犬病免疫抗体水平,评估狂犬病疫苗免疫效果,进一步优化犬猫狂犬病免疫程序,采用ELISA方法对2024年从东莞市168个委托免疫注射点采集的912份犬猫血清样品进行狂犬病病毒抗体检测,选出100份血清样品(98份阳性、2份阴性... 为了解东莞市犬猫狂犬病免疫抗体水平,评估狂犬病疫苗免疫效果,进一步优化犬猫狂犬病免疫程序,采用ELISA方法对2024年从东莞市168个委托免疫注射点采集的912份犬猫血清样品进行狂犬病病毒抗体检测,选出100份血清样品(98份阳性、2份阴性)进行中和试验,检验ELISA试剂盒的有效性。结果显示:东莞市犬猫狂犬病免疫抗体合格率为89.25%,其中犬为89.64%,猫为85.37%;免疫12个月后,犬抗体合格率为83.33%,猫为70.00%,猫抗体较犬下降快;进口狂犬病疫苗A免疫抗体合格率为89.59%,狂犬病疫苗B为85.53%;1次免疫的抗体合格率为84.47%,2次免疫的为86.67%,3次及以上的为94.93%。结果表明:东莞市使用的两种进口狂犬病疫苗对犬猫均具有较好免疫效果,对犬效果更佳,多次免疫可获得持续有效的免疫抗体保护水平。 展开更多
关键词 狂犬病疫苗 免疫抗体 犬猫 东莞市
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东莞市牲畜屠宰检疫检验无纸化出证模式的实践及探讨 被引量：1
2
作者 林其明 蒋文武 +6 位作者 吴志鹏 钟亮宁 欧阳志良 龙海鹰 刘庆辉 黄育浩 潘杰 《畜牧兽医科技信息》 2024年第11期61-65,共5页
东莞市牲畜屠宰检疫检验无纸化出证是根据农业农村部、广东省农业农村厅部署开展的一项数字信息化创新项目。东莞市结合本市牲畜屠宰行业特点,打造动物检疫及肉品检验全程智慧监管,旨在通过无纸化出证,实现动物养殖、运输、屠宰、检疫... 东莞市牲畜屠宰检疫检验无纸化出证是根据农业农村部、广东省农业农村厅部署开展的一项数字信息化创新项目。东莞市结合本市牲畜屠宰行业特点,打造动物检疫及肉品检验全程智慧监管,旨在通过无纸化出证,实现动物养殖、运输、屠宰、检疫检验到消费终端等环节的肉品可追溯全链条监管,以简便快捷、服务群众、节约成本、提质增效、强化监管为目标,构建链长、面广和高效协同的智慧动监监管网络,实现无纸化出证及流通环节二维码扫码溯源,有效提升监管效能和肉食品安全。该项目于2024年1月1日正式全面实施,并取得显著成效,本文主要对东莞市牲畜屠宰检疫检验无纸化出证的模式、实际应用和延伸思考进行阐述,为提高动物卫生数字信息化监管提供参考。 展开更多
关键词 牲畜屠宰 检疫检验 无纸化出证 信息化
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布鲁氏菌超快速荧光PCR方法建立与临床应用
3
作者 徐振娜 吴志鹏 +9 位作者 洪伟彬 管知深 林其明 莫钻兰 叶毅飞 谢海燕 李敏 朱燕秋 李小军 张险朋 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第3期278-283,共6页
目的 建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,应用于临床样品的快速检测。方法 以外源性重组质粒为内参,选取布鲁氏菌重要毒力因子T4SS分泌系统为靶基因设计引物、探针,建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法。评价该方法的灵敏度、特异性、... 目的 建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,应用于临床样品的快速检测。方法 以外源性重组质粒为内参,选取布鲁氏菌重要毒力因子T4SS分泌系统为靶基因设计引物、探针,建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法。评价该方法的灵敏度、特异性、重复性,绘制标准曲线,与荧光PCR方法检测临床样品比较符合率。结果 该方法检测时间短,10 min即可完成。标准曲线Y=-3.410 7x+38.357,R^(2)=0.998 5,线性关系良好,最低检测限为10 copies/μL。该方法具有良好的特异性,对布鲁氏菌以外的几个临床常见细菌均无特异性扩增。检测3种浓度的阳性质粒,CV值为0.20%~0.91%,说明该方法具有极好的重复性。与荧光PCR方法同时检测140份临床样品,结果完全一致,符合率100%。结论 本研究建立了一种用时短、特异性强、灵敏度高、重复性好布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,可用于布鲁氏菌临床检测和疫情紧急排查,对布鲁氏菌早期诊断具有重要意义。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 超快速荧光PCR 外源性内参 实时荧光PCR
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基于环介导等温扩增微流控芯片技术检测4种鱼类病毒方法的建立
4
作者 任向阳 丁宁 +7 位作者 苗子毅 黄献培 潘一峰 柏建山 黎浩权 袁建文 陈进会 张险朋 《广东海洋大学学报》 北大核心 2025年第5期106-112,共7页
【目的】建立适合鲤春病毒血症病毒(SVCV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、神经坏死病毒(NNV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV)联合检测的环介导等温扩增(LAMP)微流控芯片检测体系,为4种鱼类病毒等温快速联检提供技术支撑。【方法】根据病毒SVCV、... 【目的】建立适合鲤春病毒血症病毒(SVCV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、神经坏死病毒(NNV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV)联合检测的环介导等温扩增(LAMP)微流控芯片检测体系,为4种鱼类病毒等温快速联检提供技术支撑。【方法】根据病毒SVCV、KHV、NNV和VHSV各自保守基因设计LAMP引物,预包埋LAMP引物至微流控芯片,注入等温扩增反应试剂,通过电浸润法将反应试剂驱动至各反应位点,复溶预包埋的LAMP引物,在各反应位点进行等温扩增反应。分析该检测体系的特异性、灵敏性和重复性验证,并应用于实际样品检测。【结果】本研究建立的LAMP微流控芯片检测体系对SVCV、KHV、NNV和VHSV阳性样品均出现特异性扩增反应,且不同病毒间未出现交叉反应;对鱼类易感的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)、大口黑鲈虹彩病毒、传染性脾肾坏死病毒、草鱼呼肠孤病毒、本尼登虫(Benedenia girellae)和刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)等8种常见病原体阳性样品均无特异性扩增反应。灵敏度实验结果表明,对SVCV、VHSV的检测限均为10 fg/μL,对KHV、NNV的检测限均为1 fg/μL。重复性实验结果表明,4种病毒的变异系数均<5%。该检测体系与实时荧光PCR方法相比,对20份实际样品的检测结果均保持一致。【结论】本研究建立的LAMP微流控芯片检测体系于63℃等温扩增30 min即可完成对SVCV、KHV、NNV和VHSV的同时检测,且特异性好、灵敏度高、重复性好,可为鱼类SVCV、KHV、NNV和VHSV等温快速联检提供技术支撑。 展开更多
关键词 环介导等温扩增微流控芯片技术 鲤春病毒血症病毒 锦鲤疱疹病毒 神经坏死病毒 病毒性出血性败血症病毒
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不同厂家非洲猪瘟荧光PCR试剂盒检测性能比对与分析 被引量：1
5
作者 徐振娜 郭永添 +4 位作者 黄炳炽 莫钻兰 王健青 钟群芳 洪伟彬 《畜牧兽医科技信息》 2024年第12期73-76,共4页
为评价非洲猪瘟荧光PCR试剂盒检测性能,从市场上挑选4种非洲猪瘟检测试剂盒,用最低检出限、准确性、重复性等指标对试剂盒进行评价。结果显示:3个厂家试剂盒最低检测限5.8~58 copies/μL,一家试剂盒最低检测限> 5.8×10^(3)copi... 为评价非洲猪瘟荧光PCR试剂盒检测性能,从市场上挑选4种非洲猪瘟检测试剂盒,用最低检出限、准确性、重复性等指标对试剂盒进行评价。结果显示:3个厂家试剂盒最低检测限5.8~58 copies/μL,一家试剂盒最低检测限> 5.8×10^(3)copies/μL。4个试剂盒与临床常见病原无交叉反应。有2个厂家试剂盒的准确性较好,有3个试剂盒在检测高浓度样品时重复性较好,在检测低浓度样品时重复性较差。通过研究,能够挑选到合适的检测试剂盒,适合临床推广应用。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 荧光PCR试剂盒 比对 分析
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锦鲤疱疹病毒微滴式数字PCR检测方法的建立及临床应用
6
作者 钟亮宁 何洪桂 +11 位作者 李小军 叶毅飞 王红兵 刘烺 潘杰 谢海燕 莫钻兰 赖颖 黄洁莹 朱燕秋 李敏 张险朋 《广东海洋大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期19-28,共10页
【目的】构建一种敏感性高、特异性强、重复性好的锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,为锦鲤疱疹病毒的定量检测和低浓度样品检测提供技术支持。【方法】参照靶位基因锦鲤疱疹病毒TK基因(GenBank登录号:KX... 【目的】构建一种敏感性高、特异性强、重复性好的锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,为锦鲤疱疹病毒的定量检测和低浓度样品检测提供技术支持。【方法】参照靶位基因锦鲤疱疹病毒TK基因(GenBank登录号:KX609547.1)设计合成引物和探针,通过比对筛选出最佳引物探针,优化反应体系和退火温度,建立与实时荧光PCR方法的线性关系,并分析该方法的敏感性、特异性、重复性,最后应用于临床样品检测。【结果】当引物、探针浓度分别为900、300 nmol/L且退火温度为57℃时,建立的KHVddPCR扩增反应效率最高,阴阳性微滴分布界限最为明显。KHVddPCR敏感性强,检测限低至0.46拷贝/μL,在0~8.1×10^(4)拷贝/μL范围内,与实时荧光PCR检测结果的线性关系较佳(R2=0.9949)。检测变异系数低,批内变异系数为2.70%,批间变异系数为3.02%。与鲤浮肿病毒、鲫造血器官坏死病毒、真鲷虹彩病毒、草鱼出血病毒、罗非鱼湖病毒、十足目虹彩病毒、虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei)和诺卡氏菌(Nocardia seriolae)等其他8种常见的水生动物疫病阳性样品无非特异性反应。在88份的临床样品检测中,阳性2份,阳性检出率为2.27%;在8份能力验证样品检测中,5份阳性,与能力验证满意结果一致,与实时荧光PCR方法和套式PCR方法检测结果一致。【结论】建立的锦鲤疱疹病毒ddPCR检测方法敏感性高、特异性强、重复性好,可定量检测锦鲤疱疹病毒DNA,为锦鲤疱疹病毒的研究提供参考。 展开更多
关键词 锦鲤疱疹病毒 微滴式数字PCR 线性关系 特异性 变异系数
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黄唇鱼迟缓爱德华氏菌分离鉴定及药敏分析 被引量：3
7
作者 李敏 叶毅飞 +10 位作者 李永福 谢海燕 李鸿超 李春枝 李希国 李本旺 陈灼均 莫介化 卢伟华 朱燕秋 张险朋 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期140-149,共10页
2023年入夏以来,东莞市黄唇鱼(Bahaba taipingensis)自然保护区救护基地出现黄唇鱼发病和死亡病例,症状主要为食欲下降,体表发红、充血,眼球突出,角膜白浊溃烂,吻部溃烂;解剖后发现腹腔有大量腹水,肝肿大呈褐色。为确定其病因,针对性制... 2023年入夏以来,东莞市黄唇鱼(Bahaba taipingensis)自然保护区救护基地出现黄唇鱼发病和死亡病例,症状主要为食欲下降,体表发红、充血,眼球突出,角膜白浊溃烂,吻部溃烂;解剖后发现腹腔有大量腹水,肝肿大呈褐色。为确定其病因,针对性制定防治措施,采集死亡病鱼的心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肠、鳃丝等组织样品。从病死鱼体内分离到一株优势菌株,命名为DG230920,通过对菌株的形态特征、生理生化特性和16S rRNA基因序列综合分析,鉴定该菌为迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)。病理组织学检测结果显示,心脏、肝脏、脾脏、肾脏和鳃均有明显的炎症反应,肠出血、黏膜上皮细胞脱落,脾淋巴细胞稀疏、内皮细胞变性坏死,肾小管变性坏死,鳃见鳃丝脱落、出血。对分离菌株进行药敏分析,结果为对环丙沙星、左氧氟沙星高度敏感,最低抑菌质量浓度仅≤0.25 mg·mL^(-1);其次是厄他培南,最低抑菌质量浓度≤0.5 mg·mL^(-1)。结果表明,黄唇鱼发病原因可能是迟缓爱德华氏菌感染,分离菌株遗传序列稳定,对临床使用的抗菌药物均为敏感。研究提示,应加强黄唇鱼迟缓爱德华氏菌感染的防治,选用敏感药物科学治疗。 展开更多
关键词 黄唇鱼 迟缓爱德华氏菌 细菌分离鉴定 病理组织切片 药物敏感分析
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迟缓爱德华氏菌荧光PCR方法的建立及初步应用
8
作者 叶毅飞 梁国华 +9 位作者 吴志鹏 殷进方 龙海鹰 周柱辉 莫钻兰 邓海燕 谢翠美 林其明 李敏 张险朋 《中国动物检疫》 CAS 2024年第9期89-96,共8页
为构建一种灵敏、特异、准确的迟缓爱德华氏菌(Edwardsiellatarda)检测方法,以gyr B为靶基因设计特异性引物和探针,经过优化反应体系和退火温度,建立了迟缓爱德华氏菌荧光PCR方法。随后对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了评估,并... 为构建一种灵敏、特异、准确的迟缓爱德华氏菌(Edwardsiellatarda)检测方法,以gyr B为靶基因设计特异性引物和探针,经过优化反应体系和退火温度,建立了迟缓爱德华氏菌荧光PCR方法。随后对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了评估,并应用该方法进行临床样品检测。结果显示:当引物和探针浓度分别为250和200 nmol/L,退火温度为55℃时,建立的迟缓爱德华氏菌荧光PCR方法荧光曲线标准,线性关系良好,最低检测限可达12.4 CFU/m L,且1 CFU/m L的细菌经35℃培养1 h后即可被检出;与猪链球菌2型以及无乳链球菌等14种常见水生动物病原体无交叉反应;重复性试验变异系数均小于0.95%;在100份临床样品中,检出阳性22份,与细菌分离鉴定结果一致。结果表明,本研究建立的迟缓爱德华氏菌荧光PCR检测方法敏感性高、特异性强、重复性好,为迟缓爱德华氏菌病的临床诊断和研究提供了技术支撑。 展开更多
关键词 迟缓爱德华氏菌 荧光PCR 线性关系 特异性 变异系数 临床应用
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一起人鹦鹉热衣原体的禽间流行病学调查
9
作者 刘庆辉 潘杰 +4 位作者 邹潍力 钟群芳 梁勇 张端秀 杨振波 《广东畜牧兽医科技》 2024年第6期99-103,共5页
2024年2月,东莞市某镇发生一起人感染鹦鹉热衣原体疫情。为确定疫情源头,防止疫情蔓延,消除疫情传播风险,对确诊病例的疑似暴露点、活禽来源地三鸟批发市场和农贸市场及患者在生态园游玩线路开展畜禽间(野鸟)鹦鹉热衣原体流行病学调查... 2024年2月,东莞市某镇发生一起人感染鹦鹉热衣原体疫情。为确定疫情源头,防止疫情蔓延,消除疫情传播风险,对确诊病例的疑似暴露点、活禽来源地三鸟批发市场和农贸市场及患者在生态园游玩线路开展畜禽间(野鸟)鹦鹉热衣原体流行病学调查。调查结果显示:在疑似暴露点和生态园游玩线路上采集的家禽、野鸟样品中未检出鹦鹉热衣原体核酸阳性,但在活禽来源地三鸟批发市场3个活禽档采集样品中检测到8份核酸阳性,阳性率为6.67%;在活禽来源地农贸市场2个水禽档口采集样品中检测到7份核酸阳性,阳性率为8.75%。调查认为:虽然在疑似暴露点未检出阳性样品,但在活禽来源地农贸市场和三鸟批发市场均检出鹦鹉热衣原体核酸阳性样品,疑似暴露点仍然存在一定鹦鹉热衣原体传播和感染风险;由于疑似暴露点存在栏舍分布不合理、活禽来源复杂、不同批次和不同禽类混养、人员防范意识薄弱等,进一步增加了人感染鹦鹉热衣原体的风险。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 流行病学调查 家禽
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