食管癌中AKT和PTEN蛋白表达及其临床相关性研究 被引量：12

1

作者 蒋虹 徐志飞 +2 位作者 邱秀华 曹惠芳 唐亮 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第4期265-268,共4页

目的:探讨食管癌组织中AKT和PTEN的表达及其临床相关性。方法:应用Western blot和免疫组织化学方法检测42例食管癌组织及其癌旁组织中AKT,FFEN蛋白的表达情况。结果:食管癌组织中,AKT蛋白水平高于癌旁组织(P<0.01),PTEN蛋白水平低于... 目的:探讨食管癌组织中AKT和PTEN的表达及其临床相关性。方法:应用Western blot和免疫组织化学方法检测42例食管癌组织及其癌旁组织中AKT,FFEN蛋白的表达情况。结果:食管癌组织中,AKT蛋白水平高于癌旁组织(P<0.01),PTEN蛋白水平低于癌旁组织(P<0.01),二者呈负线形相关(r=-0.583,P<0.01)。AKT蛋白表达在Ⅲ_b-Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移的食管癌中的表达高于Ⅱ-Ⅲ_a期、高分化、无淋巴结转移的食管癌(P<0.01),而PTEN则完全相反(P<0.01)。二者的表达均与年龄、性别、肿瘤大小无关(P>0.05)。结论:AKT蛋白的高表达在食管癌的发生、发展起重要作用,而PTEN则抑制这一作用过程。 展开更多

关键词 食管癌 AKT蛋白 PTEN蛋白 相关性研究

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通心络通过PI-3K/Akt/HIF信号通路改善血管内皮细胞缺氧损伤 被引量：39

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作者 梁俊清 徐海波 +6 位作者 陈小娟 邢志军 尹蓓珮 吴琨 张梓倩 周丽涛 吴以岭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期846-851,共6页

目的:观察通心络对缺氧血管内皮细胞中缺氧诱导因子(HIF)及其上游信号转导通路PI-3K/Akt的影响,探讨PI-3K/Akt/HIF信号通路在通心络改善血管内皮细胞抗缺氧损伤中的作用。方法:将体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)分为常氧对照组... 目的:观察通心络对缺氧血管内皮细胞中缺氧诱导因子(HIF)及其上游信号转导通路PI-3K/Akt的影响,探讨PI-3K/Akt/HIF信号通路在通心络改善血管内皮细胞抗缺氧损伤中的作用。方法:将体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)分为常氧对照组、通心络组、缺氧组和缺氧+通心络组。采用CCK-8试剂盒检测各组细胞的活性,Western blotting检测HIF-1α、Bcl-2、Mcl-1、Bax表达变化及Akt的磷酸化情况。利用HIF-1α的显性负性突变体(DN-HIF)瞬时转染HUVECs,流式细胞仪分析细胞的凋亡情况。利用PI-3K和Akt的显性负性突变体瞬时转染HUVECs,探讨PI-3K/Akt信号通路在通心络改善血管内皮细胞抗缺氧损伤中的作用。结果:与常氧条件下比较,通心络对缺氧内皮细胞虽有明显的促增殖作用,但程度明显减弱。通心络可显著上调HIF-1α、Bcl-2、Mcl-1蛋白表达水平及Akt磷酸化水平,且下调Bax的表达。利用DN-HIF抑制HIF-1α的活化后,通心络提高缺氧HUVECs活性的程度明显下降,但仍可一定程度上降低细胞凋亡百分率。进一步利用PI-3K显性负性突变体(Δp85)和Akt显性负性突变体(DN-Akt)阻断HIF-1α上游信号通路PI-3K/Akt后,通心络上调缺氧HUVECs HIF-1α蛋白表达的作用明显减弱,促进Akt磷酸化的作用基本消失。结论:在缺氧条件下,通心络上调HUVECs HIF-1α蛋白表达水平,促进抗凋亡因子同时抑制促凋亡因子的表达,降低细胞凋亡率,从而提高缺氧细胞的增殖率,这些作用在一定程度上依赖于PI-3K/Akt/HIF通路的活性。 展开更多

关键词 通心络 缺氧诱导因子 血管内皮细胞 信号转导 缺氧损伤

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绞股蓝总皂苷对免疫性肝纤维化大鼠肝功能和肝纤维化的影响 被引量：14

3

作者 万丽 万兴旺 胡晋红 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1319-1321,共3页

目的:研究绞股蓝总皂苷(GPs)对免疫性肝纤维化大鼠肝功能和肝纤维化的影响。方法:36只大鼠随机分为正常对照组、肝纤维化组和GPs组3组,每阻各12只。采用人血清白蛋白攻击注射大鼠建立免疫性肝纤维化模型,GPs治疗组大鼠则在连续30 d给予... 目的:研究绞股蓝总皂苷(GPs)对免疫性肝纤维化大鼠肝功能和肝纤维化的影响。方法:36只大鼠随机分为正常对照组、肝纤维化组和GPs组3组,每阻各12只。采用人血清白蛋白攻击注射大鼠建立免疫性肝纤维化模型,GPs治疗组大鼠则在连续30 d给予白蛋白攻击注射的同时给予0.5 mg GPs。采用全自动生化仪检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)水平以评价肝功能,应用放射免疫法(RIA)检测血清中透明质酸(HA)、Ⅲ型胶原(PCⅢ)和层粘蛋白(LN)含量以评价肝纤维化程度,并以大鼠肝组织切片病理变化验证。结果:白蛋白攻击注射可显著升高肝纤维化大鼠血清中ALT、TBIL、TBA水平和HA、PCⅢ、LN水平(P<0.01,P<0.05)。GPs治疗可显著降低大鼠血清中 ALT、TBIL、TBA水平和HA、PCⅢ和LN水平(P<0.01,P<0.05)。GPs还可显著减少白蛋白攻击所致的胶原纤维生成,并改善大鼠肝纤维化病理损伤。结论:GPs可保护大鼠肝功能,抑制大鼠肝纤维化形成。 展开更多

关键词 绞股蓝总皂苷 免疫性肝纤维化 大鼠 肝功能 肝纤维化 谷丙转氨酶 总胆红素

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聚糖蛋白3在原发性肝癌病理诊断中的意义 被引量：7

4

作者 方芳 王红阳 +1 位作者 吴秀菊 周赟 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期568-570,共3页

目的:检测聚糖蛋白3(glypican-3,GPC3)在原发性肝癌组织中的表达以研究其在病理诊断中的意义。方法:应用免抗人GPC3多抗对270例石蜡切片组织以及芯片肝癌组织进行免疫组化检测。结果:正常肝组织不表达GPC3蛋白。肝癌组织中GPC3阳性率达... 目的:检测聚糖蛋白3(glypican-3,GPC3)在原发性肝癌组织中的表达以研究其在病理诊断中的意义。方法:应用免抗人GPC3多抗对270例石蜡切片组织以及芯片肝癌组织进行免疫组化检测。结果:正常肝组织不表达GPC3蛋白。肝癌组织中GPC3阳性率达到74.5%(182/244),肝细胞癌及肝内胆管细胞癌中GPC3阳性率分别为78.2%(176/225)、31.6%(6/ 19),有显著性差异(P<0.05),且肝细胞癌中几乎所有癌细胞均呈阳性,强度较强,但肝内胆管细胞癌中GPC3蛋白分布有限,强度较弱。GPC3蛋白在Ⅰ-Ⅱ级与Ⅲ一Ⅳ级、直径≤3 cm与>3 cm、AFP>20μg/L与AFP≤20μg/L HCC分化组织中的阳性率分别为82.9%(63/76)及75.8%(113/149)、75.4%(43/57)及79.2%(133/168)、77.5%(131/170)及80.0%(44/55),均无显著性差异。在AFP阴性小肝癌中的阳性率为71.4%(10/14),在23例复发癌组织中的阳性率高达91.3%(21/23)。结论:GPC3广泛存在于肝癌组织细胞中,可作为一种新的肿瘤标志物应用于肝癌的临床病理免疫组化诊断与鉴别诊断。 展开更多

关键词 聚糖蛋白3 肝肿瘤 肿瘤标记 生物学

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运用激光捕获显微切割对肝细胞癌与肝内胆管癌蛋白质组的分析 被引量：4

5

作者 周福平 胡和平 +3 位作者 艾建华 陆豪杰 王红阳 吴孟超 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1111-1114,共4页

目的:分析肝细胞癌和肝内胆管癌蛋白质的表达差异,获取鉴别两者的分子标志物。方法:通过激光捕获显微切割技术分离肝细胞癌和肝内胆管癌的纯细胞,通过双向电泳和质谱的方法检测两者表达的差异蛋白,再通过免疫组化染色的方法证实差异蛋... 目的:分析肝细胞癌和肝内胆管癌蛋白质的表达差异,获取鉴别两者的分子标志物。方法:通过激光捕获显微切割技术分离肝细胞癌和肝内胆管癌的纯细胞,通过双向电泳和质谱的方法检测两者表达的差异蛋白,再通过免疫组化染色的方法证实差异蛋白表达的情况。结果:肝细胞癌和肝内胆管癌图谱分别检测到(1124±110)、(938±90)个蛋白点。分析发现78个差异蛋白点,通过质谱鉴定出28个有意义的蛋白,20个蛋白仅在肝细胞癌表达或表达明显增高,8个蛋白仅在肝内胆管癌中表达或者高表达。同时免疫组化证实BK125H2.1在肝细胞癌中表达强阳性,而肝内胆管癌中缺失表达。结论:激光捕获显微切割是蛋白质组研究中的一个突破性的技术,可以有效地解决组织异质性的问题;本实验检测到的差异蛋白例如BK125H2.1可能成为鉴别肝细胞癌与肝内胆管癌特异性的分子标记物。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 胆管肿瘤 蛋白质组 激光捕获显微切割

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丝裂霉素C对肝癌细胞中NF-κB基因表达和分布的影响 被引量：2

6

作者 唐亮 满晓波 +5 位作者 曹惠芳 邱秀华 刘淑琴 谈冶雄 吴孟超 王红阳 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第2期97-100,共4页

目的 :探讨丝裂霉素C(MMC)对肝癌细胞中NF κB分布和基因表达的影响。方法 :应用细胞免疫组织化学检测不同浓度的MMC对SK HEP 1细胞中NF κB分布的影响 ,Western blot检测 5 0 μg/mlMMC作用不同时间的NF κB蛋白水平 ,RT PCR方法比较 5... 目的 :探讨丝裂霉素C(MMC)对肝癌细胞中NF κB分布和基因表达的影响。方法 :应用细胞免疫组织化学检测不同浓度的MMC对SK HEP 1细胞中NF κB分布的影响 ,Western blot检测 5 0 μg/mlMMC作用不同时间的NF κB蛋白水平 ,RT PCR方法比较 5 0 μg/mlMMC持续处理细胞不同时间和作用 2h停止用药后不同时间NF κB基因表达水平的影响。结果 :不同剂量的MMC能够不同程度地使细胞核中NF κB免疫组化染色增强 ,5 0 μg/ml的MMC导致了NF κB蛋白蛋白印迹水平升高 ,并在MMC处理 8h的细胞中升至最高 ,RT PCR方法检测NF κB基因mRNA水平在MMC持续处理的细胞中也上升 ,在第 2小水平最高 ,随后下降 ,但是在MMC处理 2h停止用药后NF κB基因mRNA水平没有下降反而继续上升 ,并持续到第 12小。结论 :MMC能够促进NF κB自细胞浆进入细胞核 ,5 0 μg/ml的MMC导致了NF κB自身表达升高并在撤除用药后仍旧存在 ,提示NF κB同细胞抗MMC活性密切相关。 展开更多

关键词 丝裂霉素C 肝癌细胞 NF-KB 基因表达 分布 影响

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spp1基因在肺癌组织中表达的定量检测及其意义 被引量：2

7

作者 曹惠芳 满晓波 +6 位作者 蒋虹 徐志飞 唐亮 邱秀华 谈冶雄 吴孟超 王红阳 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第2期119-121,共3页

目的 :探讨定量检测骨桥蛋白编码基因在原发性肺癌中的表达及其意义。方法 :制备 2 4例肺癌患者癌及癌周正常肺组织中总RNA ,采用RT PCR及实时荧光定量PCR技术分析spp1基因的mRNA表达水平。 结果 :在所有 2 4例肺癌中肺癌组织的骨桥蛋... 目的 :探讨定量检测骨桥蛋白编码基因在原发性肺癌中的表达及其意义。方法 :制备 2 4例肺癌患者癌及癌周正常肺组织中总RNA ,采用RT PCR及实时荧光定量PCR技术分析spp1基因的mRNA表达水平。 结果 :在所有 2 4例肺癌中肺癌组织的骨桥蛋白表达高于相邻的癌周正常肺组织 ,并且全部在 6倍以上 ,其中 7例在 10 0倍以上。结论 :肺癌组织中骨桥蛋白的表达明显升高 ,是肺癌诊断的重要标志物。 展开更多

关键词 spp1基因 肺癌组织 表达 定量检测

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Ir-MEK/ir-LEK在N-硝基-L-精氨酸抑制吗啡耐受形成中的作用 被引量：2

8

作者 万兴旺 黄矛 +4 位作者 何雅琴 万丽 李万亥 由振东 路长林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期119-120,共2页

关键词 Ir-MEK/ir-LEK N-硝基-L-精氨酸 吗啡耐受 吗啡 一氧化氮 脑啡肽

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PTP-BAS基因在原发性肾细胞癌中的表达及意义(英文)

9

作者 许传亮 徐振宇 +4 位作者 高旭 邱秀华 钱松溪 王红阳 孙颖浩 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期410-413,共4页

目的 :探讨 PTP- BAS基因在原发性肾细胞癌组织中的表达及其与临床各病理特征的关系。 方法 :利用 Northern印迹技术检测 31例肾细胞癌及其癌旁组织中 PTP- BAS m RNA表达水平。 结果 :肾细胞癌组织的 PTP- BAS m RNA表达明显弱于相应... 目的 :探讨 PTP- BAS基因在原发性肾细胞癌组织中的表达及其与临床各病理特征的关系。 方法 :利用 Northern印迹技术检测 31例肾细胞癌及其癌旁组织中 PTP- BAS m RNA表达水平。 结果 :肾细胞癌组织的 PTP- BAS m RNA表达明显弱于相应的癌旁组织 (P<0 .0 1 ) ,肾癌细胞系 786 - O细胞呈低表达 ;肾细胞癌的 PTP- BAS m RNA表达与临床各病理特征无关。 结论 :PTP- BAS基因在肾细胞癌组织的表达降低 ,推测其可能是肾细胞癌的一个抑癌基因 ,且与肾细胞癌的发生发展有关。 展开更多

关键词 PTP—BAS基因 原发性肾细胞癌 表达 病理 癌组织 Northern印迹技术

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牛初乳免疫球蛋白 A的纯化与原子力显微镜观测 被引量：6

10

作者 傅骁勇 谭璐 +3 位作者 徐敬 朱国栋 李杰 王红阳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期108-110,共3页

目的 :纯化牛初乳免疫球蛋白 A(Ig A)并在原子力显微镜 (AFM)下进行观测。 方法 :应用逐级盐析、透析和离子交换层析等生化手段 ,从牛初乳中提取 Ig A,SDS- PAGE鉴定纯化结果。应用 AFM对吸附在新剥离云母或多聚赖氨酸 (PL L)处理云母... 目的 :纯化牛初乳免疫球蛋白 A(Ig A)并在原子力显微镜 (AFM)下进行观测。 方法 :应用逐级盐析、透析和离子交换层析等生化手段 ,从牛初乳中提取 Ig A,SDS- PAGE鉴定纯化结果。应用 AFM对吸附在新剥离云母或多聚赖氨酸 (PL L)处理云母片基上的 Ig A进行空气相的结构观测。 结果 :考马斯亮蓝染色鉴定纯化的蛋白含有重链、轻链和分泌片 ;正常生理条件下的 Ig A以寡聚体结构为主 ,单体大约 2 .6 nm× 1 8.0 nm× 2 0 .2 nm,与电镜结果基本吻合 ;Ig A在 PL L 处理云母片基上的吸附呈现树枝状聚集 ,随孵育时间的延长 ,聚集现象更趋明显。 结论 :结合生化方法和 AFM观测 ,可对 Ig A等免疫球蛋白分子进行天然结构状态的微观探测 。 展开更多

关键词 牛初乳 免疫球蛋白A 纯化 原子力显微镜 观测 生理调控

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核因子κB在大鼠多器官功能障碍综合征中的表达及意义 被引量：2

11

作者 张少波 方国恩 +2 位作者 唐亮 杜成辉 华积德 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1212-1214,共3页

目的:探讨多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠肝、肺、肾和小肠组织中核因子xB(NF-kB)的DNA结合蛋白和NF-kB P65蛋白的表达及意义。方法:32只雄性SD大鼠随机分成MODS组(n=16)和正常对照组(n=16),采用二次打击建立MODS大鼠模型,检测大鼠肝功... 目的:探讨多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠肝、肺、肾和小肠组织中核因子xB(NF-kB)的DNA结合蛋白和NF-kB P65蛋白的表达及意义。方法:32只雄性SD大鼠随机分成MODS组(n=16)和正常对照组(n=16),采用二次打击建立MODS大鼠模型,检测大鼠肝功能(ALT、AST)、肾功能(Cr、BUN)、动脉血氧分压(PaO2);用电泳迁移率改变试验(EMSA)检测大鼠肝、肺、肾和小肠组织中NF-kB的DNA结合活性;用Western杂交检测NF-kB P65蛋白表达。结果:衰竭组大鼠肝、肺、肾和小肠组织中NF—kB的DNA结合活性及NF—kB P65蛋白表达明显高于正常组(P<0.01);血清中ALT、BUN分别与肝、肾组织NF—kB的活性呈正相关(P<0.01)。结论:NF—kB活化在MODS的发生发展中可能起重要作用。 展开更多

关键词 核因子ΚB 大鼠 多器官功能障碍综合征 DNA结合蛋白 NF-KBP65蛋白

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嵌合抗原受体修饰T细胞在实体肿瘤治疗中的应用

12

作者 马韵涵 潘宇飞 +1 位作者 董立巍 谈冶雄 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期482-487,共6页

嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)是一种人工修饰的T细胞表面受体,它可以模拟天然的T细胞受体(T cell receptor,TCR)的功能。使用转基因技术可以在T细胞表面稳定表达CAR。CAR修饰T细胞(CAR-T细胞)利用抗体的肿瘤特异性识别... 嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)是一种人工修饰的T细胞表面受体,它可以模拟天然的T细胞受体(T cell receptor,TCR)的功能。使用转基因技术可以在T细胞表面稳定表达CAR。CAR修饰T细胞(CAR-T细胞)利用抗体的肿瘤特异性识别能力,靶向发挥T细胞的效应功能。目前CAR-T细胞在临床治疗白血病、淋巴瘤、黑素瘤等恶性肿瘤中取得了令人鼓舞的效果。但由于实体肿瘤的某些特点,CAR-T细胞在临床治疗实体肿瘤的实践中存在部分障碍。随着研究的深入,三代CAR-T细胞、双重特异性CAR-T细胞等的应用将为CAR-T细胞临床治疗实体肿瘤开拓道路。本文就近年来CAR-T细胞在实体肿瘤中的应用作一综述。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体 T淋巴细胞 实体肿瘤 免疫疗法

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