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线粒体靶向肽SS-31对炎症诱导髓核细胞衰老和焦亡的作用及机制研究
1
作者
彭鑫
王志强
+3 位作者
张桐
杨光
吴小涛
高延征
《中国脊柱脊髓杂志》
北大核心
2025年第4期399-407,共9页
目的:探讨线粒体靶向肽SS-31对炎症诱导的髓核(nucleus pulposus,NP)细胞衰老、焦亡的作用及机制。方法:体外提取培养6周龄SD雄性大鼠的NP细胞,分为对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组和LPS+SS-31组,其中对照组不做处理,LPS组以...
目的:探讨线粒体靶向肽SS-31对炎症诱导的髓核(nucleus pulposus,NP)细胞衰老、焦亡的作用及机制。方法:体外提取培养6周龄SD雄性大鼠的NP细胞,分为对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组和LPS+SS-31组,其中对照组不做处理,LPS组以浓度为100μg/mL的LPS干预NP细胞24h,LPS+SS-31组在LPS干预前30min利用SS-31进行预处理。采用衰老相关β半乳糖苷酶(senescence associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)染色和Western blot(WB)实验评估各组细胞衰老及焦亡水平;采用透射电镜和氧耗率检测分析各组NP细胞线粒体功能;应用WB和免疫荧光检测各组磷酸化核因子-κB-p65(phosphorylated nuclear factor-κB-p65,p-NF-κB-p65)、环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cyclic GMP-AMP synthase,cGAS)和干扰素刺激基因(interferon stimulating gene,STING)的蛋白表达;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色和WB实验分析体内注射SS-31对椎间盘退变、细胞衰老和焦亡的影响。结果:与LPS组相比,LPS+SS-31组的NP细胞SA-β-Gal染色阳性率、衰老标志蛋白(p53、p21)及焦亡相关分子(NLRP3、Caspase-1 p20)的表达均明显降低(P<0.05)。通过透射电镜观察发现LPS组NP细胞线粒体肿胀呈圆形,基质透亮,线粒体嵴间腔扩张;而LPS+SS-31组的线粒体肿胀明显消退,线粒体形态趋于正常。同时,与LPS组相比,LPS+SS-31组的NP细胞最大呼吸水平明显增强(P<0.05)。WB和免疫荧光检测结果显示,LPS干预明显上调了p-NF-κB-p65、cGAS和STING的表达(P<0.05),而SS-31的预处理显著抑制了LPS诱导的p-NF-κB-p65、cGAS和STING的表达(P<0.05)。体内实验证实局部注射SS-31可降低NP细胞衰老、焦亡,减轻纤维环穿刺诱导的椎间盘退变。结论:SS-31减轻了炎症诱导的NP细胞衰老和焦亡,这与其对NF-κB信号通路、cGAS/STING信号通路的抑制有关。
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关键词
SS-31
髓核细胞
炎症
衰老
焦亡
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题名
线粒体靶向肽SS-31对炎症诱导髓核细胞衰老和焦亡的作用及机制研究
1
作者
彭鑫
王志强
张桐
杨光
吴小涛
高延征
机构
河南省人民
医院
脊柱
脊髓
外科
东南大学附属中大医院脊柱脊髓外科
出处
《中国脊柱脊髓杂志》
北大核心
2025年第4期399-407,共9页
基金
国家自然科学基金面上项目(82172438、82372470、81871810)。
文摘
目的:探讨线粒体靶向肽SS-31对炎症诱导的髓核(nucleus pulposus,NP)细胞衰老、焦亡的作用及机制。方法:体外提取培养6周龄SD雄性大鼠的NP细胞,分为对照组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组和LPS+SS-31组,其中对照组不做处理,LPS组以浓度为100μg/mL的LPS干预NP细胞24h,LPS+SS-31组在LPS干预前30min利用SS-31进行预处理。采用衰老相关β半乳糖苷酶(senescence associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)染色和Western blot(WB)实验评估各组细胞衰老及焦亡水平;采用透射电镜和氧耗率检测分析各组NP细胞线粒体功能;应用WB和免疫荧光检测各组磷酸化核因子-κB-p65(phosphorylated nuclear factor-κB-p65,p-NF-κB-p65)、环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cyclic GMP-AMP synthase,cGAS)和干扰素刺激基因(interferon stimulating gene,STING)的蛋白表达;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、免疫组化(immunohistochemistry,IHC)染色和WB实验分析体内注射SS-31对椎间盘退变、细胞衰老和焦亡的影响。结果:与LPS组相比,LPS+SS-31组的NP细胞SA-β-Gal染色阳性率、衰老标志蛋白(p53、p21)及焦亡相关分子(NLRP3、Caspase-1 p20)的表达均明显降低(P<0.05)。通过透射电镜观察发现LPS组NP细胞线粒体肿胀呈圆形,基质透亮,线粒体嵴间腔扩张;而LPS+SS-31组的线粒体肿胀明显消退,线粒体形态趋于正常。同时,与LPS组相比,LPS+SS-31组的NP细胞最大呼吸水平明显增强(P<0.05)。WB和免疫荧光检测结果显示,LPS干预明显上调了p-NF-κB-p65、cGAS和STING的表达(P<0.05),而SS-31的预处理显著抑制了LPS诱导的p-NF-κB-p65、cGAS和STING的表达(P<0.05)。体内实验证实局部注射SS-31可降低NP细胞衰老、焦亡,减轻纤维环穿刺诱导的椎间盘退变。结论:SS-31减轻了炎症诱导的NP细胞衰老和焦亡,这与其对NF-κB信号通路、cGAS/STING信号通路的抑制有关。
关键词
SS-31
髓核细胞
炎症
衰老
焦亡
Keywords
SS-31
Nucleus pulposus cells
Inflammation
Senescence
Pyroptosis
分类号
R446 [医药卫生—诊断学]
Q255 [生物学—细胞生物学]
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1
线粒体靶向肽SS-31对炎症诱导髓核细胞衰老和焦亡的作用及机制研究
彭鑫
王志强
张桐
杨光
吴小涛
高延征
《中国脊柱脊髓杂志》
北大核心
2025
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