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抗果蝇ECP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定
被引量:
2
1
作者
刘加彬
汪道涌
+3 位作者
孙明宽
徐敏
刘琍
谢维
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期745-746,共2页
目的: 制备抗果蝇ECP蛋白的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定.方法: 用大肠杆菌表达并纯化的GST-ECP融合蛋白, 免疫6~8 wk的雌性BALB/c小鼠, 取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合, 经间接ELISA筛选和克隆化培养制备杂交瘤细胞系.用间接ELISA...
目的: 制备抗果蝇ECP蛋白的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定.方法: 用大肠杆菌表达并纯化的GST-ECP融合蛋白, 免疫6~8 wk的雌性BALB/c小鼠, 取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合, 经间接ELISA筛选和克隆化培养制备杂交瘤细胞系.用间接ELISA及Western blot等方法对mAb的Ig亚类(型)、腹水效价及特异性进行鉴定.结果: 获得1株杂交瘤细胞株, 命名为8G9.Ig亚类(型)鉴定表明, 此株mAb为IgG1(κ型).腹水mAb的效价为 1∶ 1×105.Western blot分析表明, 该株mAb可与果蝇的幼虫、蛹及成虫组织中表达的ECP特异性结合, 可特异性的识别ECP抗原的231~300aa区段.结论: 获得1株能稳定分泌抗ECP mAb的细胞株, 为进一步研究ECP的功能奠定了基础.
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关键词
黑腹果蝇
ECP
单克隆抗体
抗原表位
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职称材料
题名
抗果蝇ECP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定
被引量:
2
1
作者
刘加彬
汪道涌
孙明宽
徐敏
刘琍
谢维
机构
东南大学基础医学院遗传学研究中心
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期745-746,共2页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30300062)
文摘
目的: 制备抗果蝇ECP蛋白的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定.方法: 用大肠杆菌表达并纯化的GST-ECP融合蛋白, 免疫6~8 wk的雌性BALB/c小鼠, 取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合, 经间接ELISA筛选和克隆化培养制备杂交瘤细胞系.用间接ELISA及Western blot等方法对mAb的Ig亚类(型)、腹水效价及特异性进行鉴定.结果: 获得1株杂交瘤细胞株, 命名为8G9.Ig亚类(型)鉴定表明, 此株mAb为IgG1(κ型).腹水mAb的效价为 1∶ 1×105.Western blot分析表明, 该株mAb可与果蝇的幼虫、蛹及成虫组织中表达的ECP特异性结合, 可特异性的识别ECP抗原的231~300aa区段.结论: 获得1株能稳定分泌抗ECP mAb的细胞株, 为进一步研究ECP的功能奠定了基础.
关键词
黑腹果蝇
ECP
单克隆抗体
抗原表位
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗果蝇ECP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定
刘加彬
汪道涌
孙明宽
徐敏
刘琍
谢维
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
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