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载体和基因片段的选择对戊型肝炎病毒基因免疫抗原表达的影响
被引量：
4
1
作者
房雪峰
王立新
+3 位作者
孟继鸿
董晨
田华
翟理杰
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期22-25,共4页
目的比较不同载体和不同大小的目的基因片段对戊型肝炎病毒(HEV)基因免疫抗原表达的影响,为基于HEV中和抗原表位的HEV基因免疫提供一定的依据。方法将含Ⅳ型HEV中国株中和抗原表位的p166和p179片段编码基因分别克隆入pTR421和pCDNA3.1...
目的比较不同载体和不同大小的目的基因片段对戊型肝炎病毒(HEV)基因免疫抗原表达的影响,为基于HEV中和抗原表位的HEV基因免疫提供一定的依据。方法将含Ⅳ型HEV中国株中和抗原表位的p166和p179片段编码基因分别克隆入pTR421和pCDNA3.1两种真核表达载体,用脂质体介导基因转染HepG2人肝癌细胞系,经间接免疫荧光和Western blot分析以及将质粒注射小鼠局部肌肉组织后经免疫组织化学染色检测,分析目的基因在体内外的表达水平。结果成功构建了pTR421-166、pTR421-179、pCDNA3.1-166和pCDNA3.1-179四种重组质粒,经限制性内切酶双酶切和核苷酸测序鉴定,编码基因正确无误;pTR421-179转染的细胞以及注射小鼠的局部肌肉组织可以检测到p179的表达,而pCDNA3.1-179、pCDNA3.1-166以及pTR421-166均检测不到目的基因在体内、外的抗原表达。结论载体和目的基因片段的选择显著影响HEV抗原在体内、外的表达,直接关系到基因免疫的成功与否。
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关键词
戊型肝炎病毒
基因免疫
中和抗原表位
基因表达
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职称材料
mIL-21基因转染的Sp2/0瘤苗细胞的抗肿瘤机制探讨
被引量：
5
2
作者
褚莉莉
窦骏
+4 位作者
赵枫姝
唐权
张爱凤
王永仿
顾宁
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期507-510,共4页
目的:探讨小鼠IL-21瘤苗-Sp2/0-mIL-21抗肿瘤效应的机制。方法:用流式细胞术检测Sp2/0-mIL-2瘤苗细胞表面MHC-Ⅰ类分子及CD80分子的表达。以瘤苗细胞接种BALB/c小鼠,以CFSE,7-AAD标记,用流式细胞术检测NK细胞、CTL的细胞毒活性。观察肿...
目的:探讨小鼠IL-21瘤苗-Sp2/0-mIL-21抗肿瘤效应的机制。方法:用流式细胞术检测Sp2/0-mIL-2瘤苗细胞表面MHC-Ⅰ类分子及CD80分子的表达。以瘤苗细胞接种BALB/c小鼠,以CFSE,7-AAD标记,用流式细胞术检测NK细胞、CTL的细胞毒活性。观察肿瘤组织中淋巴细胞的浸润。用RT-PCR检测肿瘤组织中CXC家族趋化因子I-TAC的表达。结果:与对照组相比,瘤苗细胞膜表面MHC-Ⅰ类分子的表达明显上调。瘤苗接种组小鼠NK细胞、CTL的细胞毒活性明显增强。病理分析发现,肿瘤组织中有较多的淋巴细胞浸润并检测到干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC)的表达上调。结论:肿瘤细胞瘤苗Sp2/0-mIL21可增强小鼠的细胞免疫作用,其抗肿瘤机制可能与T细胞的增殖、活化,促进NK细胞的分化成熟,淋巴细胞向肿瘤组织浸润,以及增强NK细胞和CTL的细胞毒活性有关。
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关键词
白细胞介素-21
瘤苗
羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)
7-氨基放线菌素D(7-AAD)
干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC)
抗肿瘤机制
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职称材料
题名
载体和基因片段的选择对戊型肝炎病毒基因免疫抗原表达的影响
被引量：
4
1
作者
房雪峰
王立新
孟继鸿
董晨
田华
翟理杰
机构
东南大学基础医学院病原生物学和免疫学系
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期22-25,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30271212
30271231)
+1 种基金
教育部留学回国人员科研启动基金资助项目(No.2004-176)
江苏省自然科学基金资助项目(No.BK2002053)
文摘
目的比较不同载体和不同大小的目的基因片段对戊型肝炎病毒(HEV)基因免疫抗原表达的影响,为基于HEV中和抗原表位的HEV基因免疫提供一定的依据。方法将含Ⅳ型HEV中国株中和抗原表位的p166和p179片段编码基因分别克隆入pTR421和pCDNA3.1两种真核表达载体,用脂质体介导基因转染HepG2人肝癌细胞系,经间接免疫荧光和Western blot分析以及将质粒注射小鼠局部肌肉组织后经免疫组织化学染色检测,分析目的基因在体内外的表达水平。结果成功构建了pTR421-166、pTR421-179、pCDNA3.1-166和pCDNA3.1-179四种重组质粒,经限制性内切酶双酶切和核苷酸测序鉴定,编码基因正确无误;pTR421-179转染的细胞以及注射小鼠的局部肌肉组织可以检测到p179的表达,而pCDNA3.1-179、pCDNA3.1-166以及pTR421-166均检测不到目的基因在体内、外的抗原表达。结论载体和目的基因片段的选择显著影响HEV抗原在体内、外的表达,直接关系到基因免疫的成功与否。
关键词
戊型肝炎病毒
基因免疫
中和抗原表位
基因表达
Keywords
hepatitis E virus
gene immunization
neutralization antigenic epitope
gene expression
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
mIL-21基因转染的Sp2/0瘤苗细胞的抗肿瘤机制探讨
被引量：
5
2
作者
褚莉莉
窦骏
赵枫姝
唐权
张爱凤
王永仿
顾宁
机构
东南大学基础医学院病原生物学和免疫学系
东南大学
病理
学
系
东南大学
生物
科
学
与
医学
工程
系
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期507-510,共4页
基金
江苏省"六大人才高峰"资助项目(医药行业D14)
国家自然科学基金资助项目(90406023)
文摘
目的:探讨小鼠IL-21瘤苗-Sp2/0-mIL-21抗肿瘤效应的机制。方法:用流式细胞术检测Sp2/0-mIL-2瘤苗细胞表面MHC-Ⅰ类分子及CD80分子的表达。以瘤苗细胞接种BALB/c小鼠,以CFSE,7-AAD标记,用流式细胞术检测NK细胞、CTL的细胞毒活性。观察肿瘤组织中淋巴细胞的浸润。用RT-PCR检测肿瘤组织中CXC家族趋化因子I-TAC的表达。结果:与对照组相比,瘤苗细胞膜表面MHC-Ⅰ类分子的表达明显上调。瘤苗接种组小鼠NK细胞、CTL的细胞毒活性明显增强。病理分析发现,肿瘤组织中有较多的淋巴细胞浸润并检测到干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC)的表达上调。结论:肿瘤细胞瘤苗Sp2/0-mIL21可增强小鼠的细胞免疫作用,其抗肿瘤机制可能与T细胞的增殖、活化,促进NK细胞的分化成熟,淋巴细胞向肿瘤组织浸润,以及增强NK细胞和CTL的细胞毒活性有关。
关键词
白细胞介素-21
瘤苗
羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)
7-氨基放线菌素D(7-AAD)
干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC)
抗肿瘤机制
Keywords
murine interleukin-21
tumor vaccine
CFSE
7-AAD
I-TAC
anti-tumor mechanism
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
载体和基因片段的选择对戊型肝炎病毒基因免疫抗原表达的影响
房雪峰
王立新
孟继鸿
董晨
田华
翟理杰
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
mIL-21基因转染的Sp2/0瘤苗细胞的抗肿瘤机制探讨
褚莉莉
窦骏
赵枫姝
唐权
张爱凤
王永仿
顾宁
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
5
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