目的研究不同浓度的葡聚糖/明胶复合水凝胶支架材料对体外构建组织工程髓核的影响,对其性能进行表征,探索适用于组织工程髓核的水凝胶浓度。方法通过Schiff交联反应制备葡聚糖/明胶复合水凝胶支架材料,对不同浓度（6%、8%、10%、12%、14...目的研究不同浓度的葡聚糖/明胶复合水凝胶支架材料对体外构建组织工程髓核的影响,对其性能进行表征,探索适用于组织工程髓核的水凝胶浓度。方法通过Schiff交联反应制备葡聚糖/明胶复合水凝胶支架材料,对不同浓度（6%、8%、10%、12%、14%）水凝胶的内部形态结构、孔径、孔隙率、杨氏模量和细胞相容性进行评估,分离培养猪原代髓核细胞,以P1代细胞在不同浓度的水凝胶内部进行三维培养,MTT染色观察细胞活性,Real-time PCR法检测髓核细胞特异性基因aggrecan和typeⅡcollagen表达。结果葡聚糖/明胶复合水凝胶在电镜扫描下呈现多孔网络结构,随着浓度的升高,水凝胶的孔径（38.182-82.675μm）和孔隙率（95.5%-98.3%）持续下降,杨氏模量不断升高（0.135-11.366 k Pa）;该水凝胶具有较好的细胞相容性,但是6%、8%的水凝胶分别在接种细胞后第4、7天后细胞的黏附和增殖显著下降（P〈0.05）。接种1周后,浓度为10%的水凝胶内部三维培养的髓核细胞活性显著高于其他浓度水凝胶（P〈0.05）,同时aggrecan、typeⅡcollagen基因表达显著高于其他各组（P〈0.05）。结论浓度为10%的葡聚糖/明胶复合水凝胶兼具有适宜的三维多孔网络结构、稳定的力学结构以及较好的细胞相容性,适用于构建组织工程髓核。展开更多
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文摘目的研究不同浓度的葡聚糖/明胶复合水凝胶支架材料对体外构建组织工程髓核的影响,对其性能进行表征,探索适用于组织工程髓核的水凝胶浓度。方法通过Schiff交联反应制备葡聚糖/明胶复合水凝胶支架材料,对不同浓度（6%、8%、10%、12%、14%）水凝胶的内部形态结构、孔径、孔隙率、杨氏模量和细胞相容性进行评估,分离培养猪原代髓核细胞,以P1代细胞在不同浓度的水凝胶内部进行三维培养,MTT染色观察细胞活性,Real-time PCR法检测髓核细胞特异性基因aggrecan和typeⅡcollagen表达。结果葡聚糖/明胶复合水凝胶在电镜扫描下呈现多孔网络结构,随着浓度的升高,水凝胶的孔径（38.182-82.675μm）和孔隙率（95.5%-98.3%）持续下降,杨氏模量不断升高（0.135-11.366 k Pa）;该水凝胶具有较好的细胞相容性,但是6%、8%的水凝胶分别在接种细胞后第4、7天后细胞的黏附和增殖显著下降（P〈0.05）。接种1周后,浓度为10%的水凝胶内部三维培养的髓核细胞活性显著高于其他浓度水凝胶（P〈0.05）,同时aggrecan、typeⅡcollagen基因表达显著高于其他各组（P〈0.05）。结论浓度为10%的葡聚糖/明胶复合水凝胶兼具有适宜的三维多孔网络结构、稳定的力学结构以及较好的细胞相容性,适用于构建组织工程髓核。
