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人脂肪干细胞的分离、体外培养及鉴定
被引量：
2
1
作者
兰珊珊
赵自然
+3 位作者
李玉新
鲍永利
王淼
张舵
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期1079-1082,1121,共5页
目的:进行人脂肪干细胞的分离、体外培养及鉴定,为组织工程的进一步研究提供实验依据。方法:将剪碎的人脂肪组织加入Ⅰ型胶原酶消化,离心。将细胞悬液置于6孔培养板中,37℃、5%CO2培养箱中培养,细胞达80%融合时进行传代。选取第3代细胞...
目的:进行人脂肪干细胞的分离、体外培养及鉴定,为组织工程的进一步研究提供实验依据。方法:将剪碎的人脂肪组织加入Ⅰ型胶原酶消化,离心。将细胞悬液置于6孔培养板中,37℃、5%CO2培养箱中培养,细胞达80%融合时进行传代。选取第3代细胞,进行免疫组织化学染色,检测细胞表面抗原标记物;选取第3代细胞,分为成骨诱导组和成脂诱导组,每组又分为诱导组(加入相应诱导培养基)及对照组(未经诱导的细胞)。成骨诱导72h后进行碱性磷酸酶(AKP)含量检测,8d后进行茜素红染色,检验细胞内是否出现钙沉积;成脂诱导2周后进行油红O染色,检测细胞内是否形成脂滴。结果:培养细胞均有CD44、CD49d抗原阳性表达,不表达CD45、CD106抗原;成骨诱导72h后,诱导组细胞内AKP含量(0.4883U·g-1prot)较对照组(0.0632U·g-1prot)明显增高(P<0.05);8d后诱导组茜素红染色阳性,对照组阴性;成脂诱导2周后油红O脂肪颗粒染色为阳性,对照组为阴性。结论:利用原代细胞培养技术可成功地从人脂肪组织中分离出脂肪干细胞。
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关键词
干细胞
细胞分离
细胞培养
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职称材料
题名
人脂肪干细胞的分离、体外培养及鉴定
被引量：
2
1
作者
兰珊珊
赵自然
李玉新
鲍永利
王淼
张舵
机构
吉林
大学
第一医院整形外科
东北师范大学生命科学学院细胞遗传所
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期1079-1082,1121,共5页
基金
国家自然科学基金资助课题(30670563)
吉林省科技厅资助课题(20030423-01)
文摘
目的:进行人脂肪干细胞的分离、体外培养及鉴定,为组织工程的进一步研究提供实验依据。方法:将剪碎的人脂肪组织加入Ⅰ型胶原酶消化,离心。将细胞悬液置于6孔培养板中,37℃、5%CO2培养箱中培养,细胞达80%融合时进行传代。选取第3代细胞,进行免疫组织化学染色,检测细胞表面抗原标记物;选取第3代细胞,分为成骨诱导组和成脂诱导组,每组又分为诱导组(加入相应诱导培养基)及对照组(未经诱导的细胞)。成骨诱导72h后进行碱性磷酸酶(AKP)含量检测,8d后进行茜素红染色,检验细胞内是否出现钙沉积;成脂诱导2周后进行油红O染色,检测细胞内是否形成脂滴。结果:培养细胞均有CD44、CD49d抗原阳性表达,不表达CD45、CD106抗原;成骨诱导72h后,诱导组细胞内AKP含量(0.4883U·g-1prot)较对照组(0.0632U·g-1prot)明显增高(P<0.05);8d后诱导组茜素红染色阳性,对照组阴性;成脂诱导2周后油红O脂肪颗粒染色为阳性,对照组为阴性。结论:利用原代细胞培养技术可成功地从人脂肪组织中分离出脂肪干细胞。
关键词
干细胞
细胞分离
细胞培养
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人脂肪干细胞的分离、体外培养及鉴定
兰珊珊
赵自然
李玉新
鲍永利
王淼
张舵
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
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