亚胺环己酮对猪卵母细胞人工孤雌激活作用的研究 被引量：17

1

作者 李光鹏 孟庆刚 +3 位作者 魏鹏 李子义 孙兴参 谭景和 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期416-420,共5页

本文以体外成熟的猪卵母细胞为材料 ,以乙醇、电脉冲和氯化锶为人工刺激条件 ,研究了蛋白质合成抑制剂———亚胺环己酮 (CHX)对猪卵母细胞的孤雌激活效果的影响。结果表明 ,乙醇、电脉冲和SrCl2 均可使猪卵母细胞激活 ,而电脉冲的激活... 本文以体外成熟的猪卵母细胞为材料 ,以乙醇、电脉冲和氯化锶为人工刺激条件 ,研究了蛋白质合成抑制剂———亚胺环己酮 (CHX)对猪卵母细胞的孤雌激活效果的影响。结果表明 ,乙醇、电脉冲和SrCl2 均可使猪卵母细胞激活 ,而电脉冲的激活效果最好。当分别与CHX联合使用时 ,激活率显著高于单独的乙醇、电脉冲或SrCl2 刺激。说明 ,CHX与乙醇、电脉冲及SrCl2 联合使用对猪IVM卵母细胞激活具有显著的协同促进作用。 展开更多

关键词 亚胺环己酮 孤雌激活 卵母细胞 猪 细胞核移植

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猪小腔卵泡卵母细胞体外成熟研究 被引量：30

2

作者 孟庆刚 张成林 +2 位作者 张永忠 李光鹏 谭景和 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期213-219,共7页

本实验通过与 2～ 6mm猪卵泡卵母细胞相对比 ,研究了猪 2mm以下卵泡卵母细胞的体外成熟。结果如下 :(1)由 2mm以下卵泡获得的小 (直径 10 0 2 9± 7 9μm)、中 (10 9 36± 3 71μm)和大 (118 90± 2 4 6 μm) 3类卵母细... 本实验通过与 2～ 6mm猪卵泡卵母细胞相对比 ,研究了猪 2mm以下卵泡卵母细胞的体外成熟。结果如下 :(1)由 2mm以下卵泡获得的小 (直径 10 0 2 9± 7 9μm)、中 (10 9 36± 3 71μm)和大 (118 90± 2 4 6 μm) 3类卵母细胞培养 4 8h的成熟率分别为 0、2 2 31%和 4 5 4 5%。 (2 ) 2mm以下卵泡卵母细胞的成熟率 (52 6 3% )显著低于 2～ 6mm卵泡卵母细胞的成熟率 (80 39% )。(3)以含PFF的培养液培养 2mm以下卵泡卵母细胞其成熟率 (53 54% )显著高于不含PFF的对照组 (2 2 77% )。 (4 )在培养的前 2 4h加入PMSG、后 2 4h去除PMSG ,其成熟率 (4 1 86 % )与含PMSG的培养液连续培养 4 8h的成熟率 (50 0 % )无显著差异 ,而显著高于前 2 4h不加PMSG ,后2 4h加入PMSG培养的成熟率 (5 4 1% ) ;也显著高于以下不含PMSG的培养液连续培养 4 8h的成熟率 (3 3% )。 展开更多

关键词 猪 小腔卵泡 卵母细胞 体外成熟 体外受精

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牛体外成熟卵母细胞冷冻保存的研究 被引量：9

3

作者 冯怀亮 孙青原 +3 位作者 李子义 杨庆章 刘国艺 秦鹏春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第6期481-486,共6页

本实验探讨了用６种不同方法冷冻保存的牛体外成熟卵母细胞体外受精后的发育潜力及其冷冻损伤。尽管用不同方法冷冻的牛卵母细胞多数（８６．１％）形态正常，仅体外受精后的受精率（３０．０％）和卵裂率（７．４％）明显低于对照组（... 本实验探讨了用６种不同方法冷冻保存的牛体外成熟卵母细胞体外受精后的发育潜力及其冷冻损伤。尽管用不同方法冷冻的牛卵母细胞多数（８６．１％）形态正常，仅体外受精后的受精率（３０．０％）和卵裂率（７．４％）明显低于对照组（６９．０％和５２．９％），卵裂后继续发育的能力严重受损。在６种冷冻方法中，１．６Ｍ丙二醇分步平衡、程序冷冻效果最好，受精率和卵裂率分别达３６．４％和１３．５％。冷冻后卵母细胞发育潜力下降的原因是皮质颗粒胞吐引起的透明带变硬及亚细胞结构损伤。玻璃化法冷冻的卵母细胞损伤较轻，是值得进一步研究的一种方法。 展开更多

关键词 牛 卵母细胞 冷冻保存

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导入四碳二羧酸转移酶基因对费氏中华根瘤菌共生固氮效率的影响 被引量：8

4

作者 李友国 李杰 +2 位作者 刘墨青 周岷江 周俊初 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第5期1-7,共7页

将来自苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti)的四碳二羧酸转移酶基因(dctABD)经 pIJ2 92 5克隆到广宿主、稳定性质粒 pTR10 2上 ,获得诱导型表达的重组质粒 pHN2 0 2。在此基础上再引入来自 pDB30所含的发光酶基因 (luxAB)作分子标... 将来自苜蓿中华根瘤菌 (Sinorhizobiummeliloti)的四碳二羧酸转移酶基因(dctABD)经 pIJ2 92 5克隆到广宿主、稳定性质粒 pTR10 2上 ,获得诱导型表达的重组质粒 pHN2 0 2。在此基础上再引入来自 pDB30所含的发光酶基因 (luxAB)作分子标记 ,以 pTR10 2为基础构建成带有dctABD和luxAB的重组质粒 pHN2 0 5。经三亲本接合转移 ,将重组质粒 pHN2 0 5导入费氏中华根瘤菌 (Sinorhizobium fredii)HNO1,GR3和YC4。与出发菌相比较的盆栽试验结果表明 :HN0 1(pHN2 0 5)和GR3(pHN2 0 5)分别在宁镇一号和川早一号大豆上能显著提高植株地上部分干重 (生物量 )和总氮量 ,YC4 (pHN2 0 5)在黑龙 33大豆上能同时显著提高植株地上部分干重 (生物量 ) ,总氮量和根瘤鲜重。本研究结果表明 :导入dctABD基因对共生固氮效率的增效性与受体根瘤菌和大豆品种等因素有关。以luxAB为报告基因进行的转移接合子培养条件下分离单菌落和共生条件下形成根瘤的发光活性检测结果表明 :pHN2 0 5可在供试费氏中华根瘤菌中稳定遗传。 展开更多

关键词 四碳二羧酸转移酶基因 费氏中华根瘤菌 发光酶

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人组织型纤溶酶原激活剂乳腺定位表达载体的构建及其表达 被引量：3

5

作者 王凯 赖良学 +5 位作者 付殿国 乔贵林 安靓 扈荣良 杨庆章 殷震 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第10期52-56,共5页

将编码人组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ） 的１７６６ｂｐ 基因片段插入大鼠β－乳酪蛋白 （β－Ｃａｓｅｉｎ） 启动子的下游及ｐＳＶＬ质粒的ＰｏｌｙＡ上游。构建了ｐβ－Ｃａｓｅｉｎ－ＰＡ１、ｐβ－Ｃａｓｅｉｎ－ＰＡ２ 两个乳... 将编码人组织型纤溶酶原激活剂（ｔＰＡ） 的１７６６ｂｐ 基因片段插入大鼠β－乳酪蛋白 （β－Ｃａｓｅｉｎ） 启动子的下游及ｐＳＶＬ质粒的ＰｏｌｙＡ上游。构建了ｐβ－Ｃａｓｅｉｎ－ＰＡ１、ｐβ－Ｃａｓｅｉｎ－ＰＡ２ 两个乳腺定位表达载体。将其分别与脂质体混合制备转染液后， 直接注入妊娠２９ 天的青紫蓝母兔乳腺中。结果表明：两种载体均能在乳腺中表达，且具有溶纤活性，表达量在２００—５００ｎｇ／ｍ ｌ之间。这不仅证明了所构建载体可用于转基因乳腺生物反应器的建立， 而且提示， 展开更多

关键词 人组织型 纤溶酶原激活剂 载体 乳腺定位表达

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鸡ＩｇＧ几种不同纯化方法的比较研究 被引量：7

6

作者 李景鹏 王宏 张建光 《黑龙江八一农垦大学学报》 1994年第3期85-88,共4页

试用三种不同的方法纯化鸡免疫球蛋白G(IgG),其中硫酸葡聚糖钠法虽好,但因其价格昂贵,不易推广;氯仿法是一种简便、快速而又经济的好方法,它的产率高,且不影响IgG的活性。

关键词 鸡 比较 免疫球蛋白 禽类 提纯

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黄曲霉毒素对大白鼠细胞免疫的作用 被引量：1

7

作者 李景鹏 秦礼让 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第5期435-440,共6页

本文研究了玉米中的黄曲霉毒素（Ａｆ含Ｂ＿１１０００ｐｐｂ）慢性中毒对大白鼠细胞免疫能力的影响。实验共用４０周，把４３只大鼠分成两组，实验组（Ｅ）２６只，每只共摄入ＡｆＢ＿１２ｍｇ，对照组（Ｃ）１７只，实验组自然死亡２... 本文研究了玉米中的黄曲霉毒素（Ａｆ含Ｂ＿１１０００ｐｐｂ）慢性中毒对大白鼠细胞免疫能力的影响。实验共用４０周，把４３只大鼠分成两组，实验组（Ｅ）２６只，每只共摄入ＡｆＢ＿１２ｍｇ，对照组（Ｃ）１７只，实验组自然死亡２只，均发生纤维型间皮瘤，其中一鼠发生细胞型肝癌，Ｅ组腹腔巨噬细胞吞噬能力显著下降，（Ｐ＜０．０５）。血流中Ｔ细胞数量没有明显变化，而分泌淋巴因子的能力却显著降低（Ｐ＜０．０５）。表明Ａｆ慢性中毒对大白鼠细胞免疫功能有明显的损伤作用。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素 细胞免疫 大白鼠 中毒

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哺乳动物的卵母细胞成熟机理 被引量：3

8

作者 孙青原 秦鹏春 《黑龙江动物繁殖》 1995年第1期41-43,共3页

卵母细胞的成熟(包括细胞核成熟和细胞质成熟)是完成正常受精及早期胚胎发育所必须的,是指卵母细胞获得完成减数分裂、为受精及胚胎发育做好准备的能力。在哺乳动物,这一过程非常复杂,有许多问题至今仍没搞清。 一、卵母细胞减数分裂能... 卵母细胞的成熟(包括细胞核成熟和细胞质成熟)是完成正常受精及早期胚胎发育所必须的,是指卵母细胞获得完成减数分裂、为受精及胚胎发育做好准备的能力。在哺乳动物,这一过程非常复杂,有许多问题至今仍没搞清。 一、卵母细胞减数分裂能力的恢复 在大多数哺乳动物,出生前后卵原细胞停止有丝分裂,进入减数分裂,并停滞于第一次减数分裂前期的双线期。性成熟以后,每一繁殖周期都有一批卵母细胞在迄今未知的某些信号的作用下,进入生长期,卵母细胞体积快速增加。接近生长期结束时,获得减数分裂的能力,但仍停滞于双线期。在许多动物,该期细胞核明显。 展开更多

关键词 卵母细胞成熟 减数分裂阻滞 减数分裂恢复 哺乳动物 卵丘细胞 卵丘扩展 颗粒细胞 CAMP 蛋白质合成 间隙连接

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哺乳动物精子性别鉴定 被引量：3

9

作者 白玉妍 杨增明 《国外畜牧科技》 2001年第2期34-37,共4页

性别鉴定技术与人们的日常生活及畜牧业的发展有着密切的关系。精子性别鉴定技术的迅速发展为这一技术的应用提供了广阔的前景。目前最常用的精子性别鉴定技术是流式细胞分选法 ,此法依据 X-精子及 Y-精子 DNA含量的不同将两种精子分开 ... 性别鉴定技术与人们的日常生活及畜牧业的发展有着密切的关系。精子性别鉴定技术的迅速发展为这一技术的应用提供了广阔的前景。目前最常用的精子性别鉴定技术是流式细胞分选法 ,此法依据 X-精子及 Y-精子 DNA含量的不同将两种精子分开 ,还可以用作分类后精子的检验。因流式细胞分选法存在一些不适于大规模应用的缺陷 ,人们希望能依据分类后的精子之间的对比研究找出特异的蛋白制成抗体 ,设计出高效免疫的精子性别鉴定技术 。 展开更多

关键词 性别鉴定 哺乳动物 精子

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海狸鼠卵母细胞体外成熟培养初探 被引量：1

10

作者 孙凤俊 邴印忠 +3 位作者 高冰 于兴钟 孟庆刚 谭景和 《黑龙江动物繁殖》 1996年第3期9-11,共3页

实验用ＰＭＳＧ或ＰＭＳＧ＋ＨＣＧ处理或未经激素处理的海狸鼠８只，共获卵巢卵母细胞１３８枚。激素处理对获取卵巢卵母细胞的数量没有影响，而对体外成熟发育至卵丘扩展和半成熟阶段有促进作用。三种不同培养液（Ｗｈｉｔｅｎ＋ＦＣ... 实验用ＰＭＳＧ或ＰＭＳＧ＋ＨＣＧ处理或未经激素处理的海狸鼠８只，共获卵巢卵母细胞１３８枚。激素处理对获取卵巢卵母细胞的数量没有影响，而对体外成熟发育至卵丘扩展和半成熟阶段有促进作用。三种不同培养液（Ｗｈｉｔｅｎ＋ＦＣＳ；ＴＣＭ１９９＋ＰＭＳＧ＋ＦＣＳ；ＴＣＭ１９９＋ＨＣＧ＋ＦＣＳ）共培养１２５枚卵母细胞，培养后卵丘扩展率及半成熟率分别为５６．５％，４５．７％，４７．６％和２１．７％，１２．３％，９．５％，以Ｗｈｉｔｅｎ液较高（分别为５６．５％和２１．７％），但只有ＴＣＭ１９９＋ＰＭＳＧ＋ＦＣＳ组有２枚卵母细胞出现第一极体。结果表明海狸鼠卵母细胞与其它啮齿动物的卵母细胞一样，能够在体外培养成熟，完成第一次减数分裂。 展开更多

关键词 海狸鼠 卵母细胞 体外成熟

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奶牛卵巢疾病的诊断与治疗 被引量：2

11

作者 岳奎忠 王琨 李志宇 《黑龙江动物繁殖》 2000年第1期24-26,共3页

关键词 奶牛 卵巢疾病 诊断 治疗

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生长因子与动物繁殖 被引量：4

12

作者 秦鹏春 秦志远 石惠芝 《黑龙江动物繁殖》 1996年第1期38-40,共3页

生长因子与动物繁殖秦鹏春秦志远石惠芝（东北农业大学生物工程系）（黑龙江省农业广播电视学校）（黑龙江省家畜指导站）生长因子是一系列多肽生长因子的总称，是细胞间传递信号、信息交流的物质基础，它既能促进细胞的生长和分裂，又... 生长因子与动物繁殖秦鹏春秦志远石惠芝（东北农业大学生物工程系）（黑龙江省农业广播电视学校）（黑龙江省家畜指导站）生长因子是一系列多肽生长因子的总称，是细胞间传递信号、信息交流的物质基础，它既能促进细胞的生长和分裂，又可以在其它某些具体条件下，抑制细胞... 展开更多

关键词 表皮生长因子 动物繁殖 颗粒细胞 卵母细胞 转化生长因子 胚胎发育 子宫内膜 氨基酸组成 滋养层细胞 细胞生长因子

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牛卵母细胞冷冻保存的研究进展 被引量：7

13

作者 孙青原 《国外畜牧科技》 1993年第6期8-10,共3页

1977年,Whittingham 首次用-196℃保存的小鼠成熟卵母细胞培育出后代。目前,小鼠成熟卵母细胞的冷冻保存方法已趋于完善。1986年,Chen 第一次报道冷冻人成熟卵母细胞成功,获双胎妊娠。家畜的卵母细胞冷冻保存研究起步较晚,但随着卵母细... 1977年,Whittingham 首次用-196℃保存的小鼠成熟卵母细胞培育出后代。目前,小鼠成熟卵母细胞的冷冻保存方法已趋于完善。1986年,Chen 第一次报道冷冻人成熟卵母细胞成功,获双胎妊娠。家畜的卵母细胞冷冻保存研究起步较晚,但随着卵母细胞体外成熟、体外受精、细胞核移植、基因转移等,以卵母细胞为材料的生物技术的迅猛发展,人们对超低温冷冻保存家畜卵母细胞的兴趣大增,渴望象建立“精子库”和“胚胎库”那样,建立起“卵子库”。 展开更多

关键词 牛 卵母细胞 冷冻保存

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猪射出精子体外获能与顶体反应的超微结构研究

14

作者 韩毅冰 朱宏飞 +3 位作者 秦鹏春 黄东平 庄凯 蔡志明 《中国罕少疾病杂志》 1999年第2期1-4,共4页

应用透射电镜技术，研究了猪射出精子的超微结构，添加咖啡因和透明质酸，对体外培养猪射出精子获能和顶体反应的影响。在体外培养液中，精子发生两种顶体反应，主要表现为质膜大部分完整，顶体外膜在质膜下发生囊泡化和质膜消失；顶体... 应用透射电镜技术，研究了猪射出精子的超微结构，添加咖啡因和透明质酸，对体外培养猪射出精子获能和顶体反应的影响。在体外培养液中，精子发生两种顶体反应，主要表现为质膜大部分完整，顶体外膜在质膜下发生囊泡化和质膜消失；顶体外膜发生囊泡化两种类型。透明质酸处理，不能产生诱导顶体反应：添加获能剂的自发顶体反应中，主要表现为前一种类型，而在咖啡因诱导的顶体反应中，第二种类型反应增加，质膜可能与顶体外膜发生融合而产生杂合泡。 展开更多

关键词 射出精子 结构研究 体外获能 猪 透射电镜技术 自发顶体反应 主要表现 超微结构 透明质酸 精子获能 体外培养 精子发生 咖啡因 囊泡化 质膜 培养液 外膜 酸处理 添加

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牛输卵管上皮细胞的培养

15

作者 刘国艺 杨信志 +1 位作者 杨庆章 成华峰 《黑龙江动物繁殖》 1995年第3期17-17,共1页

在牛体外受精研究中,人们常用共同培养方法克服早期胚胎体外发育8～16细胞阻断。用于共同培养的体细胞有很多种,其中牛输卵管上皮细胞的效果较好。许多学者的实验都说明了这一点,但他们均未说明如何培养牛输卵管上皮细胞。本实验对牛输... 在牛体外受精研究中,人们常用共同培养方法克服早期胚胎体外发育8～16细胞阻断。用于共同培养的体细胞有很多种,其中牛输卵管上皮细胞的效果较好。许多学者的实验都说明了这一点,但他们均未说明如何培养牛输卵管上皮细胞。本实验对牛输卵管上皮细胞的培养进行了研究。 展开更多

关键词 牛输卵管上皮细胞 共同培养 体外发育率 牛体外受精 早期胚胎 东北农业大学 培养液 生物工程系 纤毛虫 体细胞

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猪胚胎细胞核移植研究进展

16

作者 李光鹏 孟庆刚 谭景和 《国外畜牧科技》 2000年第5期23-27,共5页

细胞核移植是目前倍受学术界和国际社会关注的焦点问题之一。已经获得牛、羊、猪、兔、鼠等核移植个体 ,而且成功地得到体细胞核移植绵羊和小鼠。尽管猪胚胎细胞核移植也有报道 ,但进展缓慢。现对猪细胞核移植的研究现状 。

关键词 猪 细胞核移植 卵母细胞 孤雌激活 胚胎移植

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哺乳动物的受精机理

17

作者 孙青原 秦鹏春 《黑龙江动物繁殖》 1994年第4期36-39,共4页

哺乳动物的受精机理孙青原，秦鹏春（东北农业大学生物工程系１５ｔｏ３０）受精是雌雄配子结合形成合子的过程，它标志着一个新生命的开始，这一过程涉及到精子和卵子之间复杂的相互作用。精子激活、精卵识别结合、精卵融合、卵子激活... 哺乳动物的受精机理孙青原，秦鹏春（东北农业大学生物工程系１５ｔｏ３０）受精是雌雄配子结合形成合子的过程，它标志着一个新生命的开始，这一过程涉及到精子和卵子之间复杂的相互作用。精子激活、精卵识别结合、精卵融合、卵子激活等都涉及到受体或由受体介导的信号传... 展开更多

关键词 卵子激活 精子发生 透明带 雄原核 卵母细胞 卵子发生 顶体反应 皮质反应 精卵融合 精卵识别

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雄性生殖细胞介导外源 DNA 转移的新方法

18

作者 范衡宇 杨增明 《国外畜牧科技》 2000年第1期32-33,共2页

介绍并评价在传统精子载体法的基础上的改进与发展 ,即辅以生精细胞显微授精的基因转移 ;输精管注射法体内转染成熟精子和曲细精管注射法转染生精干细胞。这些方法的应用将为哺乳动物基因转移提供更为方便和高效的技术手段。

关键词 精子载体法 转基因动物 生精细胞 外源DNA

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推荐我国首册《脊椎动物比较胚胎学》

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作者 秦鹏春 《黑龙江动物繁殖》 1996年第2期47-47,共1页

推荐我国首册《脊椎动物比较胚胎学》秦鹏春教授（东北农业大学生物工程系）胚胎学是研究动物的个体发生和发展规律的科学，是生命科学中生物医学方面的重要领域。几十年来，我国老一辈胚胎学家，在不同动物胚胎研究中，做出了突出贡献... 推荐我国首册《脊椎动物比较胚胎学》秦鹏春教授（东北农业大学生物工程系）胚胎学是研究动物的个体发生和发展规律的科学，是生命科学中生物医学方面的重要领域。几十年来，我国老一辈胚胎学家，在不同动物胚胎研究中，做出了突出贡献，发展和创建了某些胚胎学方面的重要... 展开更多

关键词 比较胚胎学 脊椎动物 胚胎生物工程 发育生物学 东北农业大学 生物工程系 早期胚胎发育 哺乳动物胚胎 细胞核移植 体外受精

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氯前列烯醇(Cloprostenol)在奶牛繁殖中应用的研究

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作者 岳奎忠 张宝金 范有胜 《黑龙江畜牧科技》 1998年第4期5-6,共2页

关键词 奶牛 繁殖 氯前列烯醇 应用 促情

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