微生物产赖氨酸的研究进展 被引量：18

1

作者 刘晓飞 高学军 +2 位作者 刘营 敖金霞 王青竹 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期157-160,共4页

赖氨酸是人和动物营养的9种必需氨基酸中的第一必需氨基酸,广泛应用于医药、食品和饲料等领域。发酵法是目前生产赖氨酸最主要的方法。文章从赖氨酸的生产现状、生物合成途径、代谢调控,育种等方面阐述了微生物生产赖氨酸的研究进展。

关键词 赖氨酸 发酵 生物合成 代谢调控

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整合素生物学功能的研究进展 被引量：4

2

作者 童津津 曲波 李庆章 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第10期35-39,共5页

整合素是细胞黏附的跨膜蛋白,主要参与细胞和细胞外基质的结合反应。整合素将细胞外基质同细胞内的骨架网络连成一个整体,这就是整合素所起的细胞黏着作用,而且整合素将细胞外的信号传递到细胞内,反之亦然。作者对整合素的结构和功能、... 整合素是细胞黏附的跨膜蛋白,主要参与细胞和细胞外基质的结合反应。整合素将细胞外基质同细胞内的骨架网络连成一个整体,这就是整合素所起的细胞黏着作用,而且整合素将细胞外的信号传递到细胞内,反之亦然。作者对整合素的结构和功能、细胞黏附、信号转导的最新研究进展等方面进行综述。 展开更多

关键词 整合素 细胞黏附 信号转导

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实时荧光定量PCR技术在转基因检测中的应用 被引量：30

3

作者 敖金霞 高学军 +1 位作者 仇有文 郭士成 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期141-144,共4页

实时荧光定量PCR技术是一种新型的核酸定性、定量检测、分析技术。随着转基因产品大规模商业化,转基因生物的环境安全和食用安全性问题引起了全球范围内广泛的争论和关注。实时监测、定量准确、灵敏度高、反应速度快、重复性好及PCR反... 实时荧光定量PCR技术是一种新型的核酸定性、定量检测、分析技术。随着转基因产品大规模商业化,转基因生物的环境安全和食用安全性问题引起了全球范围内广泛的争论和关注。实时监测、定量准确、灵敏度高、反应速度快、重复性好及PCR反应后不需电泳检测等优点,使RQ-PCR逐步成为转基因检测的重要工具。 展开更多

关键词 实时荧光定量PCR TaqMan探针法 SYBR Green I染料法 转基因检测

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壳寡糖对酸乳后酸化抑制效果的研究 被引量：8

4

作者 曹维强 王静 +1 位作者 张英春 王学东 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期115-118,共4页

采用过氧化氢氧化法制备壳寡糖,研究其对酸乳后酸化抑制作用的效果。结果表明,当壳寡糖的浓度为0.25%时,对酸乳的后酸化能起到明显的抑制作用,空白对照比添加0.25%壳寡糖酸乳的酸度高24.99°Т,其原因是壳寡糖能与细胞体内带有负电... 采用过氧化氢氧化法制备壳寡糖,研究其对酸乳后酸化抑制作用的效果。结果表明,当壳寡糖的浓度为0.25%时,对酸乳的后酸化能起到明显的抑制作用,空白对照比添加0.25%壳寡糖酸乳的酸度高24.99°Т,其原因是壳寡糖能与细胞体内带有负电荷的细胞质结合,扰乱细胞的正常生理活动,改变了细胞膜的选择透过性,从而抑制嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌生长繁殖,有效的抑制了酸乳的后酸化。 展开更多

关键词 壳寡糖 乳酸菌 酸乳 后酸化 抑制效果 壳寡糖 过氧化氢氧化法 保加利亚乳杆菌 抑制作用 选择透过性 嗜热链球菌

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EPSP合成酶的特性及新抑制剂的研究进展 被引量：8

5

作者 向文胜 张文吉 +1 位作者 王相晶 覃兆海 《农药学学报》 CAS CSCD 2000年第2期1-8,共8页

概述了 EPSP合成酶的生理作用。高等植物前体 EPSP合成酶进入叶绿体后 ,经剪切而成成熟 EPSP合成酶并定位于叶绿体内质膜上 ;EPSP合成酶的三维结构上存在三个活性区域 ,改变活性区域的氨基酸残基可对草甘膦产生抗性 ,同时表明了酶与草... 概述了 EPSP合成酶的生理作用。高等植物前体 EPSP合成酶进入叶绿体后 ,经剪切而成成熟 EPSP合成酶并定位于叶绿体内质膜上 ;EPSP合成酶的三维结构上存在三个活性区域 ,改变活性区域的氨基酸残基可对草甘膦产生抗性 ,同时表明了酶与草甘膦的结合位点 ;不同生物的 EPSP合成酶有高的同源性。 EPSP合成酶催化底物反应机理为 :PEP首先与酶形成过渡态 ,而后和 S3P形成缩酮四面体 ,最后生成 EPSP。草甘膦与 EPSP合成酶、EPSP形成三元复合物而阻断了 EPSP合成酶的催化作用 ;以 EPSP和 S3P· glyphosate为分子模型 ,设计合成的化合物对 EPSP合成酶的活性有抑制作用。 展开更多

关键词 EPSP合成酶 抑制剂 5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合成酶 生理作用 草甘磷 催化机理 除草剂 特性

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耐草甘膦菜豆耐性分子学机理研究 被引量：4

6

作者 向文胜 李孱 +4 位作者 陶波 王相晶 李景鹏 苏少泉 张文吉 《农药学学报》 CAS CSCD 2001年第1期23-29,共7页

用耐性菜豆根尖为材料，以λgt10为载体获得了4.8×105个重组噬菌体的cDNA文库。以植物EPSP合成酶基因保守序列合成二段探针，经噬菌体原位杂交筛选出了阳性克隆，并进行了酶切鉴定。测定 cDNA 序列长度为2024个核苷酸，其中编码长1... 用耐性菜豆根尖为材料，以λgt10为载体获得了4.8×105个重组噬菌体的cDNA文库。以植物EPSP合成酶基因保守序列合成二段探针，经噬菌体原位杂交筛选出了阳性克隆，并进行了酶切鉴定。测定 cDNA 序列长度为2024个核苷酸，其中编码长1569个核苷酸，共编码523个氨基酸和一个终止密码子，与已发表的其它植物成熟EPSP合成酶氨基酸序列相比具有很高的同源性（≥84.8%），但进入叶绿体运输肽的氨基酸同源性低。以耐性菜豆EPSP合成酶的cDNA序列为模板，用RT-PCR方法扩增感性菜豆EPSP合成酶cDNA片段，并克隆于pUC18质粒上，经测定序列并比较发现：感性菜豆EPSP合成酶cDNA核苷酸序列1737位碱基为G，而耐性的为C，从而表达出的513位氨基酸残基感性的为E，耐性的为Q，表明两种菜豆EPSP合成酶cDNA核苷酸序列一位点的差异是它们对草甘膦耐性不同的原因。 展开更多

关键词 菜豆 草甘膦 EPSP合成酶 CDNA克隆 耐性机理 核苷酸序列

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沙棘果实中黄色素的研究——沙棘脂溶性色素的提取及其稳定性的研究 被引量：12

7

作者 王静 睢薇 +2 位作者 孙郁柱 王晴 滕冰 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2001年第1期80-89,共10页

以沙棘果实为原料提取色素 ,经正交试验选取最佳提取条件 ,并对脂溶性色素进行了部分理化性质的研究。结果表明 ,沙棘黄色素主要系脂溶性类胡萝卜素。其最佳提取剂为丙酮。最佳提取条件为 :样品研磨 5 min,丙酮与样品的配比为 2∶ 1,多... 以沙棘果实为原料提取色素 ,经正交试验选取最佳提取条件 ,并对脂溶性色素进行了部分理化性质的研究。结果表明 ,沙棘黄色素主要系脂溶性类胡萝卜素。其最佳提取剂为丙酮。最佳提取条件为 :样品研磨 5 min,丙酮与样品的配比为 2∶ 1,多次洗涤 ,提取温度 :4 0℃ ,提取时间 90 min。 PH值、温度、室内自然光、 BHT、 Vc等对沙棘色素稳定性影响较小 ,直射阳光、 Fe3 + ,Fe2 + 。 展开更多

关键词 沙棘颗粒 脂溶性色素 提取 理化性质

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耐草甘膦菜豆耐性机理的初步研究 被引量：3

8

作者 向文胜 赵长山 +3 位作者 陶波 王相晶 苏少泉 张文吉 《农药学学报》 CAS CSCD 1999年第3期33-38,共6页

采用液谱测定耐性、感性菜豆叶片对草甘膦的吸收及草甘膦传导入根中的量。耐性、感性菜豆吸收、传导草甘膦无差异。耐性、感性菜豆 EPSP合成酶提取物中的蛋白质含量分别为 3.0 0 mg/ m L和 3.0 8mg/ m L ,EPSP合成酶的比活性分别为 2 .1... 采用液谱测定耐性、感性菜豆叶片对草甘膦的吸收及草甘膦传导入根中的量。耐性、感性菜豆吸收、传导草甘膦无差异。耐性、感性菜豆 EPSP合成酶提取物中的蛋白质含量分别为 3.0 0 mg/ m L和 3.0 8mg/ m L ,EPSP合成酶的比活性分别为 2 .13nmol· min-1· mg-1蛋白和 1.97nmol· min-1· mg-1蛋白 ,但耐性、感性菜豆 EPSP合成酶比活性被草甘膦不同浓度抑制的差异大 ,抑制耐性菜豆 EPSP合成酶活性的草甘膦浓度 I50 为 19.2μmol/ L ,而感性的 I50 为 6 .3μmol/ L。两种菜豆对草甘膦的耐性差异在于各自的 EPSP合成酶比活性被草甘膦的抑制程度不同。 展开更多

关键词 菜豆 草甘膦 耐性机理 EPSP 合成酶 除草剂 液相色谱 测定

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实时荧光定量PCR技术在转基因大豆A5547-127检测中的应用 被引量：4

9

作者 仇有文 张明辉 +5 位作者 于艳波 王傲雪 高学军 敖金霞 袁肖寒 刘营 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期6-10,F0002,共6页

采用实时荧光定量PCR技术检测耐除草剂转基因大豆A5547-127,并对检测方法的精确度和准确度指标进行评估,分析检测方法的特异性和适用性。结果表明,定量PCR检测方法的LOD和LOQ分别是1和10copies.μL-1,检测方法试验得到的所有偏差值均在... 采用实时荧光定量PCR技术检测耐除草剂转基因大豆A5547-127,并对检测方法的精确度和准确度指标进行评估,分析检测方法的特异性和适用性。结果表明,定量PCR检测方法的LOD和LOQ分别是1和10copies.μL-1,检测方法试验得到的所有偏差值均在允许范围之内,表明建立的定量PCR检测方法能够为转基因大豆A5547-127提供科学的定量检测依据,为转基因作物的鉴定、检测提供新方法。 展开更多

关键词 大豆 实时荧光定量PCR A5547-127 定量检测

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乳蛋白生物活性肽的药理学作用及应用前景 被引量：7

10

作者 姜毓君 李庆章 闫宏博 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2004年第5期30-33,共4页

以乳蛋白生物活性肽中酪蛋白磷酸肽为重点,就乳蛋白生物活性肽的离子载体作用、细胞凋亡诱导作用、细胞免疫调节作用、DNA合成促进作用、抗菌作用、抗高血压作用和抗血栓作用进行了阐述,并对这些药理学作用的研究进展加以介绍,同时展望... 以乳蛋白生物活性肽中酪蛋白磷酸肽为重点,就乳蛋白生物活性肽的离子载体作用、细胞凋亡诱导作用、细胞免疫调节作用、DNA合成促进作用、抗菌作用、抗高血压作用和抗血栓作用进行了阐述,并对这些药理学作用的研究进展加以介绍,同时展望了乳蛋白生物活性肽在乳品和医药工业中的应用前景。 展开更多

关键词 乳蛋白 生物活性肽 药理学作用 应用前景 酪蛋白磷酸肽

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转基因水稻深加工产品两种荧光定量方法的比较研究 被引量：3

11

作者 敖金霞 高学军 +4 位作者 权东升 徐迪 于艳波 李璐 袁肖寒 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期34-39,共6页

根据转基因水稻中外源基因Cry1A(B)和内源基因SPS设计SYBR GreenⅠ引物、TaqMan引物和荧光探针,以内源基因SPS作为内参照,使用两种FQ-PCR方法对水稻深加工产品中转基因水稻的含量进行定量检测。建立了转基因水稻标准品Cry1A(B)和SPS之... 根据转基因水稻中外源基因Cry1A(B)和内源基因SPS设计SYBR GreenⅠ引物、TaqMan引物和荧光探针,以内源基因SPS作为内参照,使用两种FQ-PCR方法对水稻深加工产品中转基因水稻的含量进行定量检测。建立了转基因水稻标准品Cry1A(B)和SPS之间的△Ct与样品中转基因水稻含量百分比之间的校正曲线和线性回归方程,并对4种未知水稻深加工样品进行检测,同时比较两者的检测结果。结果表明,TaqMan和SYBR GreenⅠ两种荧光定量PCR检测技术的检测结果可靠,且均可用于转基因深加工产品的检测。 展开更多

关键词 转基因水稻 深加工制品 实时荧光定量PCR TAQMAN SYBR GreenⅠ

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应用流式细胞仪分选中性粒细胞的研究 被引量：9

12

作者 李璐 刘向宇 李德山 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期52-55,共4页

以外周血为样本,应用FACS Aria流式细胞仪分选中性粒细胞,摸索分选最佳条件。采用分选质控试剂Accudrop Beads和鞘液为材料,在FACS Aria流式细胞仪上,对分选液滴的振荡频率(Freq)、振动幅度(Ampl)和液滴间隔值(Gap)进行调试,摸索分选的... 以外周血为样本,应用FACS Aria流式细胞仪分选中性粒细胞,摸索分选最佳条件。采用分选质控试剂Accudrop Beads和鞘液为材料,在FACS Aria流式细胞仪上,对分选液滴的振荡频率(Freq)、振动幅度(Ampl)和液滴间隔值(Gap)进行调试,摸索分选的最佳设定值。结果表明,喷嘴使用70mm,主液流窗Ampl值设定为5.5,Drop1值为197,Gap值为8,侧液流断点窗液滴延迟值为45.31,2nd值为15,3rd值为7,从白细胞中分选中性粒细胞,纯度可达99%。 展开更多

关键词 流式细胞仪 分选 中性粒细胞

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重组β酪蛋白磷酸肽二聚体基因的构建、表达及其生物活性分析 被引量：3

13

作者 姜毓君 李庆章 +1 位作者 耿丽晶 闫宏博 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期750-756,共7页

生物活性短肽 β酪蛋白磷酸肽 (β CPP)能够增加细胞对二价离子的吸收、促进受精过程并对细胞增殖产生影响 .为深入研究其生物学功能 ,采用基因工程方法得到β CPP的二聚体基因并构建真核表达载体 ,转染CHO细胞建立稳定表达细胞系 .鉴... 生物活性短肽 β酪蛋白磷酸肽 (β CPP)能够增加细胞对二价离子的吸收、促进受精过程并对细胞增殖产生影响 .为深入研究其生物学功能 ,采用基因工程方法得到β CPP的二聚体基因并构建真核表达载体 ,转染CHO细胞建立稳定表达细胞系 .鉴定纯化所表达产物 ,考察表达产物对精子细胞内游离Ca2 + 水平、细胞增殖和细胞凋亡等方面的影响 .结果表明 ,重组 β CPP二聚体能够显著增加精子细胞对Ca2 + 的吸收、促进脾细胞的增殖并诱导某些肿瘤细胞的凋亡 。 展开更多

关键词 β酪蛋白磷酸肽 二聚体 真核表达 生物活性

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Taqman定量PCR技术检测转基因大豆中外源基因拷贝数 被引量：3

14

作者 仇有文 张明辉 +5 位作者 高学军 曲波 敖金霞 袁肖寒 刘营 霍楠 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第17期10150-10152,共3页

[目的]采用Taqman定量PCR技术检测转基因杂交大豆中外源nos终止子基因的拷贝数。[方法]以大豆凝集素基因为内参照基因,以非转基因大豆基因组DNA为内参照基因标准品,通过梯度稀释法分别求取了内参照基因和质粒DNA的Ct值与拷贝数对数值的... [目的]采用Taqman定量PCR技术检测转基因杂交大豆中外源nos终止子基因的拷贝数。[方法]以大豆凝集素基因为内参照基因,以非转基因大豆基因组DNA为内参照基因标准品,通过梯度稀释法分别求取了内参照基因和质粒DNA的Ct值与拷贝数对数值的相关性标准曲线方程,并通过将得到的Ct值代入标准曲线方程求取了样品的拷贝数。[结果]内参照基因标准曲线方程为y=-3.422x+35.201,R2=0.998;外源基因标准曲线方程为y=-3.348x+34.890,R2=0.999。nos终止子基因及其下游边界序列在转基因杂交大豆中为单拷贝。[结论]为确定转基因大豆外源基因拷贝数提供了理论依据。 展开更多

关键词 REAL-TIMEPCR 转基因杂交大豆 拷贝数 LECTIN nos终止子基因边界序列

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牛乳高端产品研究开发现状与发展趋势 被引量：7

15

作者 高学军 刘家福 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2004年第4期23-25,共3页

从牛乳活性成分的提取与应用、特异饲料转化牛乳、生物转化牛乳、转基因牛乳几个方面对国内外牛乳高端产品的现状进行了综述,并就其发展趋势进行了讨论。

关键词 牛乳 活性成分 特异饲料转化牛乳 生物转化牛乳 转基因牛乳 产品开发 发展趋势

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土壤水分对麦蓝菜生物量及王不留行黄酮苷含量的影响 被引量：2

16

作者 袁肖寒 张彦东 +1 位作者 高学军 顾成波 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期835-839,共5页

为探讨土壤水分条件对麦蓝菜生物量及王不留行黄酮苷（VR）含量影响,以盆栽麦蓝菜为材料,采用4种土壤水分（重度干旱、中度干旱、适宜水分和过湿水分）处理麦蓝菜,测定胁迫后15、30和45 d麦蓝菜根、茎、叶、种子生物量,以及VR含量和产... 为探讨土壤水分条件对麦蓝菜生物量及王不留行黄酮苷（VR）含量影响,以盆栽麦蓝菜为材料,采用4种土壤水分（重度干旱、中度干旱、适宜水分和过湿水分）处理麦蓝菜,测定胁迫后15、30和45 d麦蓝菜根、茎、叶、种子生物量,以及VR含量和产量。结果表明,与适宜水分相比,土壤重度干旱、中度干旱、过湿水分均会降低麦蓝菜各器官生物量,而中度干旱能够显著提高麦蓝菜各器官中VR含量,当土壤水分为田间持水量的70%~75%时,可获得最佳的麦蓝菜生物量和VR产量。建议人工种植麦蓝菜时保持适宜土壤水分含量,以兼顾药材的产量和质量。 展开更多

关键词 土壤水分含量 麦蓝菜 生物量 王不留行黄酮苷

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乳用动物乳腺特异性miRNAs研究进展 被引量：2

17

作者 曲波 王春梅 +3 位作者 仇有文 袁肖寒 甄贞 姜毓君 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2014年第9期26-29,共4页

乳用动物具有重要的经济价值,其乳腺的健康发育至关重要。miRNA是一种重要的转录后调控的非编码RNA,参与调控哺乳动物乳腺发育和泌乳。就近年来奶牛与奶山羊乳腺特异性miRNAs研究工作做一概述,为未来miRNAs在乳腺生物学上的深入研究提... 乳用动物具有重要的经济价值,其乳腺的健康发育至关重要。miRNA是一种重要的转录后调控的非编码RNA,参与调控哺乳动物乳腺发育和泌乳。就近年来奶牛与奶山羊乳腺特异性miRNAs研究工作做一概述,为未来miRNAs在乳腺生物学上的深入研究提供理论基础和研究思路。 展开更多

关键词 奶牛 奶山羊 MIRNA 乳腺

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耐草甘膦菜豆耐性酶学机理的研究 被引量：1

18

作者 向文胜 陶波 +4 位作者 王相晶 王萍 李景鹏 苏少泉 张文吉 《农药学学报》 CAS CSCD 2000年第1期31-35,共5页

感性、耐性菜豆从萌芽到 2 4 d的 EPSP合成酶比活性是不同的 ,但变化规律相似。出苗时比活性较高 ,10 d时降至最低点 ,随后上升 ,16 d时达到最高点 ,然后缓慢下降 ;两种菜豆在生长的同一天酶比活性差异小 ,最大倍数仅为 1.1;用草甘膦处... 感性、耐性菜豆从萌芽到 2 4 d的 EPSP合成酶比活性是不同的 ,但变化规律相似。出苗时比活性较高 ,10 d时降至最低点 ,随后上升 ,16 d时达到最高点 ,然后缓慢下降 ;两种菜豆在生长的同一天酶比活性差异小 ,最大倍数仅为 1.1;用草甘膦处理两种三出复叶时的菜豆 1d后酶比活性上升 15%～ 2 5%。实验测定了经 4步纯化 ,比活性达 6 2 19.4nmol· min-1· mg-1蛋白以上的两种菜豆 EPSP合成酶的一些酶学性质。 PEP是酶的最适底物 ,感性、耐性 K m(PEP)分别为 3.5和 7.1μmol· L-1,两者相差 2倍 ;亲和力 Ki(草甘膦 )分别是 6 .2和 16 .7μmol· L-1,两者相差 2 .7倍。两种菜豆对草甘膦耐性不同的酶学机理在于耐性菜豆的 EPSP合成酶与草甘膦的亲和力小 ,与酶底物亲和力大 ;而感性菜豆 EPSP酶则与草甘膦的亲和力大 ,与其底物亲和力小。 展开更多

关键词 菜豆 EPSP 合成酶 耐性机理 草甘膦 除草剂 农药

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沙棘果实黄色素的应用研究 被引量：3

19

作者 王静 王睛 徐鑫 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第11期27-29,共3页

以沙棘果实为原料提取脂溶性色素，用于人造奶油的着色，以沙棘果粉直接做为饲料添加剂用于蛋黄的着色，试验结果表明，沙棘果实中天然黄色素不仅可用于食品着色，还可以作为营养型添加剂用于食品和饲料。

关键词 沙棘果实 色素 提取 食品着色 添加剂

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木豆叶球松素的超声提取工艺及其抗氧化活性研究 被引量：1

20

作者 付丽楠 袁肖寒 +2 位作者 顾成波 蔡曼 祖元刚 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期224-228,共5页

在考察单因素(甲醇浓度、提取时间、提取温度和料液比)实验条件对木豆叶中球松素提取率影响的基础上,采用正交实验设计法优化得到球松素的最佳提取工艺条件,同时通过DPPH自由基清除实验评价了提取物的抗氧化活性。结果表明,木豆叶中球... 在考察单因素(甲醇浓度、提取时间、提取温度和料液比)实验条件对木豆叶中球松素提取率影响的基础上,采用正交实验设计法优化得到球松素的最佳提取工艺条件,同时通过DPPH自由基清除实验评价了提取物的抗氧化活性。结果表明,木豆叶中球松素超声提取的最佳工艺条件为,甲醇提取浓度80%,提取时间60min,提取温度50℃,料液比1∶40(g/mL),球松素的提取率可达到1.832mg/g;甲醇提取物清除自由基的IC50值为0.281mg/mL。本研究建立的木豆叶中球松素的超声提取工艺具有提取效率高、操作简便等优点,适合木豆叶中球松素的提取,且甲醇提取物具有良好的抗氧化活性。 展开更多

关键词 木豆叶 球松素 正交设计 超声提取 抗氧化

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