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题名猪乳铁蛋白在大肠杆菌中的表达及其活性研究
被引量：1
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作者
唐丽杰
黄薇薇
于慧
葛俊伟
乔薪瑗
李一经
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机构
东北农业大学大学生命科学学院
东北农业大学动医学院
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出处
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第12期16-21,共6页
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基金
国家自然科学基金(31072057
30871809)
黑龙江省教育厅创新团队基金(2011TD001)
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文摘
乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)是一种天然活性铁离子结合糖蛋白,具有抗菌、抗病毒及调节免疫系统等功能。本研究将全基因合成的猪乳铁蛋白基因(Porcine Lactoferrin,PLF)在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中进行表达,表达产物主要以包涵体的形式存在;通过对温度、时间及诱导剂浓度等表达条件的摸索提高其表达量;表达的包涵体经裂解和纯化后,对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureas)以琼脂扩散法进行体外抑菌活性检测,并以透射电镜观察法研究猪乳铁蛋白对该菌的抑制作用机制;检测重组猪乳铁蛋白体外对水疱性口炎病毒(VSV)在MDCK(Madin-Daby canine kidney)细胞上的增殖抑制作用。结果表明,PLF在大肠杆菌中成功表达约79ku;重组菌在32℃经0.8 mmol·L-1IPTG诱导3 h可获得最佳表达量,重组蛋白占菌体蛋白的31.4%;琼脂孔穴扩散抑菌圈法结果表明0.1 mg的重组猪乳铁蛋白对金黄色葡萄球菌的最大抑菌直径达15 mm,透射电镜观察可见经重组猪乳铁蛋白作用后,细菌细胞壁和胞浆内电子密度都降低,菌体细胞壁及细胞膜出现断裂,核心溶解,菌体近似空壳;体外抗病毒试验结果表明,该蛋白可以明显的抑制VSV在MDCK细胞上细胞病变的产生。结果显示,重组的猪乳铁蛋白具有一定的抗菌和抗病毒活性,为其在生产中进一步应用奠定基础。
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关键词
猪乳铁蛋白
大肠杆菌表达
抑菌活性
抗病毒活性
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Keywords
porcine lactoferdn
expression in E.coli
AnUmicrobial activity
Antiviral activity
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分类号
Q93
[生物学—微生物学]
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题名长期定位施肥黑土富里酸与Cu(Ⅱ)配位能力的研究
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作者
魏自民
赵富阳
魏丹
周宝库
李艳平
李书玲
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机构
东北农业大学大学生命科学学院
黑龙江省农业科学院土壤肥料与环境研究所
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出处
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第11期50-54,共5页
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基金
黑龙江省杰出青年基金(JC200622)
哈尔滨市创新人才基金项目(2008RFXYN029)
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文摘
选取哈尔滨长期定位施肥对照处理(CK)、施用氮磷钾化肥(NPK)、施用有机肥马粪(OM)及有机肥与无机肥混施(MNPK)四个不同处理的土壤样品,对富里酸(Fulvic acid,FA)进行分离提纯。利用荧光光谱检测技术,对各处理土壤FA与Cu(Ⅱ)络合的能力进行分析。结果表明,与CK处理相比较施肥后低浓度的Cu(Ⅱ)与FA的荧光猝灭反应更加强烈。与CK比较,不同施肥处理FA与Cu(Ⅱ)的配位比例得到显著的提高,由大到小的顺序为:(MNPK)0.95>(NPK)0.93>(M)0.92>(CK)0.81。分析结果表明,长期定位施肥均使土壤FA与Cu(Ⅱ)配位结合位点增多。
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关键词
长期定位施肥
富里酸
荧光光谱
Cu(Ⅱ)
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Keywords
long-term fertilization
fulvic acid
fluorescence spectrum
Cu（Ⅱ）
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分类号
S158
[农业科学—土壤学]
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