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复方制剂中黄芩甙成分在奶牛血浆和乳中药动学的研究 被引量：4
1
作者 韩建春 佟恒敏 +1 位作者 李继昌 郭世宁 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第2期167-171,共5页
文章以高效液相色谱 (HPL C)法为定量手段 ,研究复方制剂中黄芩甙经子宫内灌注给药后在奶牛血浆和乳汁中药物代谢动力学特征。采用 MCPKP药代动力学程序处理药时数据 ,分析黄芩甙在血浆和乳中的药动学参数。结果表明 ,黄芩甙在血浆、乳... 文章以高效液相色谱 (HPL C)法为定量手段 ,研究复方制剂中黄芩甙经子宫内灌注给药后在奶牛血浆和乳汁中药物代谢动力学特征。采用 MCPKP药代动力学程序处理药时数据 ,分析黄芩甙在血浆和乳中的药动学参数。结果表明 ,黄芩甙在血浆、乳中的药动学特征均符合一级吸收一室开放模型。黄芩甙在血浆中的主要药动学参数为 :C0=0 .37︼g· m L- 1 、Ka=1.73· h- 1 、K =0 .2 5· h- 1 、t1/ 2 Ka=0 .70 h、t1/ 2β=2 .93h、Cm ax=0 .2 4︼g· m L- 1 、Tmax=2 .2 3h、AU C=1.5 2 m g· (L h) - 1 、Tlag=0 .5 0 h。黄芩甙在乳汁中的主要药动学参数为 :C0 =0 .76︼g· m L- 1 、Ka=0 .88· h- 1 ,K=0 .38h- 1、t1/ 2 Ka=0 .79h、t1/ 2 β=1.82 h、Cm ax=0 .31︼g· m L- 1、Tmax=3.2 7h、AU C=2 .0 0mg· (L h) - 1、Tlag=1.6 0 h。 展开更多
关键词 复方制剂 黄芩甙 奶牛 血浆 乳汁 药动学 子宫内膜炎 高效液相色谱 药理学
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金黄色葡萄球菌实时荧光PCR快速检测方法的建立 被引量：10
2
作者 李丹丹 徐义刚 +3 位作者 邱索平 王昱 高会江 高慎阳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期198-201,共4页
为建立检测金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)的快速检测方法,以SA Sa442基因为靶基因设计合成引物及Taq Man探针,建立了实时荧光PCR快速检测SA的方法。结果显示,对16株试验菌株进行荧光PCR检测,只有SA检测为阳性,表明该检测方... 为建立检测金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)的快速检测方法,以SA Sa442基因为靶基因设计合成引物及Taq Man探针,建立了实时荧光PCR快速检测SA的方法。结果显示,对16株试验菌株进行荧光PCR检测,只有SA检测为阳性,表明该检测方法特异性强;该方法的灵敏度为7.5 CFU/m L,利用该检测方法对采集的175份样品进行检测,共计检出5份SA阳性样品,与国标法(GB 4789.10—2010)检测结果一致,显示了良好的实用性。该检测方法灵敏度高、特异性强,具有良好的实用性。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 Sa442基因 实时荧光PCR
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肠出血性大肠埃希菌O157∶H7实时荧光定量PCR快速检测方法的建立 被引量：5
3
作者 李丹丹 徐义刚 +2 位作者 王绥家 高慎阳 李一经 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第7期81-84,共4页
本试验针对肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7高度保守的rfbE基因序列设计合成引物及TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了检测EHEC O157∶H7实时荧光定量PCR方法。结果显示,该法灵敏度约为7.3CFU/mL... 本试验针对肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7高度保守的rfbE基因序列设计合成引物及TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了检测EHEC O157∶H7实时荧光定量PCR方法。结果显示,该法灵敏度约为7.3CFU/mL,对310份肉类、蛋、奶及其制品和动物腹泻物、人工污染样品等进行检测,共检出阳性样本20份,与采用AOAC标准检测结果的符合率为100%。表明建立的实时荧光定量PCR方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性。 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌0157 H7 rfbE基因 荧光定量PCR 快速检测
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猪乳铁蛋白在大肠杆菌中的表达及其活性研究 被引量：1
4
作者 唐丽杰 黄薇薇 +3 位作者 于慧 葛俊伟 乔薪瑗 李一经 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期16-21,共6页
乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)是一种天然活性铁离子结合糖蛋白,具有抗菌、抗病毒及调节免疫系统等功能。本研究将全基因合成的猪乳铁蛋白基因(Porcine Lactoferrin,PLF)在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中进行表达,表达产物主要以包... 乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)是一种天然活性铁离子结合糖蛋白,具有抗菌、抗病毒及调节免疫系统等功能。本研究将全基因合成的猪乳铁蛋白基因(Porcine Lactoferrin,PLF)在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中进行表达,表达产物主要以包涵体的形式存在;通过对温度、时间及诱导剂浓度等表达条件的摸索提高其表达量;表达的包涵体经裂解和纯化后,对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureas)以琼脂扩散法进行体外抑菌活性检测,并以透射电镜观察法研究猪乳铁蛋白对该菌的抑制作用机制;检测重组猪乳铁蛋白体外对水疱性口炎病毒(VSV)在MDCK(Madin-Daby canine kidney)细胞上的增殖抑制作用。结果表明,PLF在大肠杆菌中成功表达约79ku;重组菌在32℃经0.8 mmol·L-1IPTG诱导3 h可获得最佳表达量,重组蛋白占菌体蛋白的31.4%;琼脂孔穴扩散抑菌圈法结果表明0.1 mg的重组猪乳铁蛋白对金黄色葡萄球菌的最大抑菌直径达15 mm,透射电镜观察可见经重组猪乳铁蛋白作用后,细菌细胞壁和胞浆内电子密度都降低,菌体细胞壁及细胞膜出现断裂,核心溶解,菌体近似空壳;体外抗病毒试验结果表明,该蛋白可以明显的抑制VSV在MDCK细胞上细胞病变的产生。结果显示,重组的猪乳铁蛋白具有一定的抗菌和抗病毒活性,为其在生产中进一步应用奠定基础。 展开更多
关键词 猪乳铁蛋白 大肠杆菌表达 抑菌活性 抗病毒活性
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人轮状病毒HRB-02株的分离鉴定 被引量：3
5
作者 宋岩 魏丽丽 程志 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期104-107,共4页
从哈尔滨医科大学第二临床医学院发生腹泻患儿粪便中取得标本 ,用MA10 4细胞传代培养 ,传至第4代时 ,细胞出现明显病变 ;电镜观察见到典型的轮状病毒颗粒 ;其RNA电泳型为 4∶2∶3∶2型 ,属A群轮状病毒。对其蚀斑特性和血凝特性进行了初... 从哈尔滨医科大学第二临床医学院发生腹泻患儿粪便中取得标本 ,用MA10 4细胞传代培养 ,传至第4代时 ,细胞出现明显病变 ;电镜观察见到典型的轮状病毒颗粒 ;其RNA电泳型为 4∶2∶3∶2型 ,属A群轮状病毒。对其蚀斑特性和血凝特性进行了初步研究 ,把这株轮状病毒地方株命名为HRB 0 2株。为研究该株轮状病毒的分子生物学特性 ,从而研制诊断性抗原和疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 轮状病毒 分离鉴定 特性研究
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基于vvhA基因检测创伤弧菌实时荧光PCR方法的建立 被引量：3
6
作者 李丹丹 徐义刚 +3 位作者 邱索平 王昱 高会江 高慎阳 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2016年第9期31-33,70,共4页
为建立创伤弧菌(VV)的快速检测方法,根据vvhA基因序列设计合成引物和探针,建立实时荧光PCR方法。结果显示:所建立的方法能特异扩增出VV标准阳性菌株,而对其它14种菌株没有扩增;该方法的灵敏度为15CFU/mL;稳定性和重复性试验结果表明,同... 为建立创伤弧菌(VV)的快速检测方法,根据vvhA基因序列设计合成引物和探针,建立实时荧光PCR方法。结果显示:所建立的方法能特异扩增出VV标准阳性菌株,而对其它14种菌株没有扩增;该方法的灵敏度为15CFU/mL;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测4次Ct值(循环阈值)的变异系数均小于2%;利用该检测方法对采集的156份样品进行检测,共计检出2份VV阳性样品,与行标法(SN/T 1870—2007)检测结果一致。该检测方法灵敏度高、特异性强,具有良好的实用性。 展开更多
关键词 创伤弧菌 vvhA基因 实时荧光定量PCR
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溶藻弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立 被引量：2
7
作者 李丹丹 徐义刚 +4 位作者 李梦圆 王昱 邱索平 高会江 高慎阳 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期69-71,76,共4页
为建立溶藻弧菌(VA)的快速检测方法,本研究以VA Collagenase基因为靶基因设计合成引物及Taq Man探针,建立了实时荧光定量PCR快速检测VA的方法。结果显示,对15株实验菌株进行荧光定量PCR检测,只有VA菌株检测为阳性,表明该检测方法特异性... 为建立溶藻弧菌(VA)的快速检测方法,本研究以VA Collagenase基因为靶基因设计合成引物及Taq Man探针,建立了实时荧光定量PCR快速检测VA的方法。结果显示,对15株实验菌株进行荧光定量PCR检测,只有VA菌株检测为阳性,表明该检测方法特异性强;该方法的灵敏度为18 cfu/m L;稳定性和重复性实验结果表明,同一样品重复检测4次Ct值的变异系数均小于2%;利用该检测方法对采集的165份样品进行检测,共计检出2份VA阳性样品,与SN/T2564-2010行标法检测结果一致,显示了良好的实用性。该检测方法灵敏度高、特异性强,具有良好的实用性。 展开更多
关键词 溶藻弧菌 Collagenase基因 实时荧光定量PCR
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猪轮状病毒JL94株vp4全基因克隆及原核表达载体构建
8
作者 于晓龙 宋岩 +1 位作者 李宝贤 李一经 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期54-57,共4页
根据GenBank已发表的猪轮状病毒vp4基因保守序列,设计一对引物扩增猪轮状病毒地方株JL94株vp4全基因;将扩增产物与载体pMD-18T连接进行序列测定并将测序结果同国外分离株进行序列比较。用限制性内切酶BamHI和SalI将vp4基因从pMD-18T-vp... 根据GenBank已发表的猪轮状病毒vp4基因保守序列,设计一对引物扩增猪轮状病毒地方株JL94株vp4全基因;将扩增产物与载体pMD-18T连接进行序列测定并将测序结果同国外分离株进行序列比较。用限制性内切酶BamHI和SalI将vp4基因从pMD-18T-vp4切下;同样用BamHI和SalI双酶切表达载体pGEX-6P-1;将这2个双酶切产物连接并转化,通过酶切鉴定和PCR鉴定证明完成了vp4原核表达载体的构建。测序结果表明:vp4全基因长2362bp,JL94株同国外分离株BEN307株、Gottfried株vp4全基因片段核苷酸同源性分别为93.44%和69.43%;氨基酸同源性分别为96.06%和71.88%。说明JL94株同BEN-307株属同一VP4血清型,而同Gottfried株属于不同血清型。重组原核表达载体pGEX-6P1-vp4的构建为表达VP4蛋白,研制诊断性抗原和病毒重组活载体疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 猪轮状病毒 VP4基因 克隆 原核表达载体构建
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用聚乙二醇-600(PEG-600)制作小鼠整体标本 被引量：3
9
作者 张筱雨 陈宇 +3 位作者 高莹 徐博 罗继龙 白志坤 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第4期42-43,共2页
为了探索替代福尔马林制作标本的基本方法,采用聚乙二醇(PEG)浸渍法制作经久耐用、适于兽医教学的解剖标本。其基本方法是先将标本在福尔马林固定后,经过流水冲洗,在梯度聚乙二醇-600中浸渍。通过使用这种方法制作出了小鼠整体标本(PEG... 为了探索替代福尔马林制作标本的基本方法,采用聚乙二醇(PEG)浸渍法制作经久耐用、适于兽医教学的解剖标本。其基本方法是先将标本在福尔马林固定后,经过流水冲洗,在梯度聚乙二醇-600中浸渍。通过使用这种方法制作出了小鼠整体标本(PEG浸渍的标本),可以存储在塑料袋或箱子中,具有抵抗真菌和细菌的功效,而且不会对皮肤产生刺激性,已在兽医解剖教学中成功地使用。 展开更多
关键词 聚乙二醇(PEG) 标本 教学 兽医解剖
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浅析奶牛围产期代谢型趴卧不起综合征 被引量：1
10
作者 郑晓妍 张志刚 《中国奶牛》 2022年第10期34-37,共4页
围产期是奶牛整个生产周期中最为重要的时期,与奶牛的健康、泌乳量、繁殖能力等密切相关。围产期奶牛体内的糖、脂肪和蛋白质等物质的代谢会发生显著变化,因此,围产期是奶牛代谢性疾病的高发时期。奶牛趴卧不起综合征是以趴卧在地和无... 围产期是奶牛整个生产周期中最为重要的时期,与奶牛的健康、泌乳量、繁殖能力等密切相关。围产期奶牛体内的糖、脂肪和蛋白质等物质的代谢会发生显著变化,因此,围产期是奶牛代谢性疾病的高发时期。奶牛趴卧不起综合征是以趴卧在地和无法自主站立为主要临床特征的症候群。奶牛趴卧不起综合征的众多类型中,以代谢型趴卧不起综合征最为常见。本文根据奶牛围产期的能量代谢特点,针对围产期多发的代谢性疾病,综述了代谢型趴卧不起综合征的病因,以期提高奶牛养殖相关人员对于奶牛围产期饲养管理的重视,且为兽医临床实践过程中奶牛趴卧不起综合征的诊治提供帮助。 展开更多
关键词 奶牛 围产期 代谢性疾病 趴卧不起综合征 发病原因
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