荧光定量PCR方法快速检测原料乳中的大肠杆菌 被引量：20

1

作者 周微 张伟钦 +2 位作者 付宇 贡汉生 孟祥晨 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2009年第11期39-42,共4页

利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR技术建立一种快速检测原料乳中大肠杆菌数量的方法。根据大肠杆菌的ITS保守序列设计特异性引物,应用常规PCR方法确定引物特异性,然后优化SYBR GreenⅠ的添加量和Mg2+的额外添加量,确定对原料乳中大肠杆菌的... 利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR技术建立一种快速检测原料乳中大肠杆菌数量的方法。根据大肠杆菌的ITS保守序列设计特异性引物,应用常规PCR方法确定引物特异性,然后优化SYBR GreenⅠ的添加量和Mg2+的额外添加量,确定对原料乳中大肠杆菌的最低检测限。结果表明,引物具有很强的特异性,最终确定的SYBR GreenⅠ(20×)的添加量为0.75μL,Mg2+的额外添加量为0.875mmol/L;在不增菌的前提下,对原料乳中大肠杆菌的最低检测限为1.7×103mL-1。检测的10份样品中有四份样品的大肠杆菌数超过103mL-1,与平板菌落计数结果无显著差异。该方法特异性强,灵敏度高,操作简便快捷,整个检测过程仅需3h,具有较大的推广及应用价值。 展开更多

关键词 大肠杆菌 原料乳 荧光定量PCR

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益生菌抗氧化活性及菌体抗氧化相关成分的分析 被引量：31

2

作者 白明 孟祥晨 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期6-11,共6页

目的比较乳杆菌、双歧杆菌、嗜热链球菌和乳酸乳球菌的抗氧化活性,分析抗氧化活性较高菌株内与抗氧化相关的成分。方法采用清除DPPH自由基、清除羟自由基以及抗脂质过氧化能力3种方法评价40株益生菌的抗氧化活性,选出抗氧化活性较高的... 目的比较乳杆菌、双歧杆菌、嗜热链球菌和乳酸乳球菌的抗氧化活性,分析抗氧化活性较高菌株内与抗氧化相关的成分。方法采用清除DPPH自由基、清除羟自由基以及抗脂质过氧化能力3种方法评价40株益生菌的抗氧化活性,选出抗氧化活性较高的菌株分析其超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和总巯基化合物(TTG)的含量。结果所比较的40株益生菌的抗氧化能力差别较大,既具有种属特异性,又具有菌株特异性;7株嗜热链球菌和11株乳酸乳球菌中的SOD活性最高[(平均分别为124.02U/mg(蛋白质)和107.10U/mg(蛋白质)]、2株双歧杆菌中GSH的含量最高(平均为311.03μmol/L细胞破碎液),所分析的菌株中TTG含量均较高。研究结果表明,实验菌乳酸乳球菌清除自由基能力最强,其次是嗜热链球菌,所试验的乳杆菌和双歧杆菌最弱;SOD对益生菌的抗氧化起主要作用;GSH的存在因种属和菌株的不同而差别较大;TTG对益生菌的抗氧化起了积极作用。 展开更多

关键词 益生菌 抗氧化 SOD GSH 总巯基化合物

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乳酸菌细菌素分类与作用机制 被引量：27

3

作者 贡汉生 孟祥晨 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期105-109,共5页

乳酸菌细菌素作为天然的食品防腐剂,可抑制或杀灭食品中致病微生物和腐败微生物从而保护食品的安全。文中介绍了乳酸菌细菌素传统分类方法和新提出的分类方法,并且综述了乳酸菌细菌素的作用机制。

关键词 乳酸菌 细菌素 分类 作用机制 食品防腐剂

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酶水解脱脂乳培养基对植物乳杆菌KLDS1.0391发酵产抑菌物质的影响 被引量：5

4

作者 陈琳 孟祥晨 +1 位作者 贡汉生 王辉 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期78-82,共5页

以中性蛋白酶水解脱脂乳为培养基,研究脱脂乳水解度对植物乳杆菌KLDS1.0391发酵产抑菌物质的影响,并优化发酵pH和时间。采用毛细管电泳和SDS-PAGE技术分析不同水解度脱脂乳的肽分布,采用3.7L发酵罐,通过单因素试验确定发酵pH和时间。研... 以中性蛋白酶水解脱脂乳为培养基,研究脱脂乳水解度对植物乳杆菌KLDS1.0391发酵产抑菌物质的影响,并优化发酵pH和时间。采用毛细管电泳和SDS-PAGE技术分析不同水解度脱脂乳的肽分布,采用3.7L发酵罐,通过单因素试验确定发酵pH和时间。研究结果表明:15%水解度的脱脂乳中,酪蛋白被全部水解,乳清蛋白被部分水解,水解后的低分子量肽更易于被该菌利用;以15%水解度的脱脂乳为培养基,恒pH 5.0发酵24 h后,所产抑菌物质的抑菌活性最高,达538.53 IU/mL。 展开更多

关键词 植物乳杆菌 脱脂乳 水解 抑菌物质

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高效液相色谱法检测牛乳中掺加的胶原水解蛋白 被引量：23

5

作者 李景红 孟祥晨 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2008年第11期56-59,共4页

本研究的目的是建立采用高效液相色谱测定牛乳中掺加胶原水解蛋白的方法：其基本原理是通过高效液相色谱法测得羟脯氨酸的含量，由测得的羟脯氨酸含量换算得出乳中掺加的胶原水解蛋白的量。以symmetry—C18（150mm×3．9mm，i．d．5... 本研究的目的是建立采用高效液相色谱测定牛乳中掺加胶原水解蛋白的方法：其基本原理是通过高效液相色谱法测得羟脯氨酸的含量，由测得的羟脯氨酸含量换算得出乳中掺加的胶原水解蛋白的量。以symmetry—C18（150mm×3．9mm，i．d．5μm）为色谱柱，2，4-二硝基氟苯为衍生试剂，梯度洗脱。流动相A：浓度为0．05mol／LG酸钠缓冲溶液（pH=6．5，含10mL／L四氢呋喃），流动相B：乙腈-水（体积比1：1）。羟脯氨酸质量浓度在2～10mg／L的范围内与峰面积之间具有良好的线性关系，回收率为93．47％～101．20％．检出限为2．5mg／L。测定结果的相对标准偏差为1．62％． 展开更多

关键词 高效液相色谱法 柱前衍生 胶原水解蛋白 2 4-二硝基氟苯 羟脯氨酸

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羧甲基纤维素钠对酸性乳饮料稳定作用的研究 被引量：8

6

作者 姚晶 孟祥晨 王红梅 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期156-158,共3页

通过测定添加不同含量的羧甲基纤维素钠(CMC)对酸性乳饮料的沉淀率、粘度、粒径分布、水分子流动性及Zeta电位的影响,研究了CMC对酸性乳饮料的稳定作用。结果表明,CMC对酸性乳饮料的稳定作用表现为使产品的沉淀率降低,粘度升高,在微观... 通过测定添加不同含量的羧甲基纤维素钠(CMC)对酸性乳饮料的沉淀率、粘度、粒径分布、水分子流动性及Zeta电位的影响,研究了CMC对酸性乳饮料的稳定作用。结果表明,CMC对酸性乳饮料的稳定作用表现为使产品的沉淀率降低,粘度升高,在微观性质上表现为使产品的粒径减小,水分流动性减弱,Zeta电位的绝对值升高。 展开更多

关键词 羧甲基纤维素钠 酸性乳饮料 稳定性

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果胶对酸性乳饮料稳定作用的研究 被引量：7

7

作者 姚晶 孟祥晨 张筠 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期162-164,共3页

通过测定添加不同含量的果胶对酸性乳饮料的沉淀率、粘度、粒径分布、水分子流动性及Zeta电位的影响,研究了果胶对酸性乳饮料的稳定作用。结果表明,果胶对酸性乳饮料的稳定作用表现为使产品的沉淀率降低,粘度升高,在微观性质上表现为使... 通过测定添加不同含量的果胶对酸性乳饮料的沉淀率、粘度、粒径分布、水分子流动性及Zeta电位的影响,研究了果胶对酸性乳饮料的稳定作用。结果表明,果胶对酸性乳饮料的稳定作用表现为使产品的沉淀率降低,粘度升高,在微观性质上表现为使产品的粒径减小,水分流动性减弱,Zeta电位的绝对值升高。 展开更多

关键词 果胶 酸性乳饮料 稳定性

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益生菌酸性应激的研究进展 被引量：4

8

作者 刘怀龙 孟祥晨 庄翘楚 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期300-303,共4页

乳杆菌和双歧杆菌是两种应用较多的益生菌,益生菌多以发酵乳制品作为载体,而发酵乳制品本身属于低酸性食品;另外,益生菌制剂在被食用时,又要经过人体消化道的低酸性环境。以上这些酸胁迫作用都会使益生菌的活性下降,而亚致死酸性应激可... 乳杆菌和双歧杆菌是两种应用较多的益生菌,益生菌多以发酵乳制品作为载体,而发酵乳制品本身属于低酸性食品;另外,益生菌制剂在被食用时,又要经过人体消化道的低酸性环境。以上这些酸胁迫作用都会使益生菌的活性下降,而亚致死酸性应激可以提高益生菌对酸的耐受力,有助于益生菌在消化道逆环境中的存活。因此,提高益生菌的酸性应激具有非常重要的意义,本文主要综述了益生菌酸性应激可能的机制以及提高益生菌酸耐受力的方法。 展开更多

关键词 益生菌 酸性应激 应激蛋白 细胞膜

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冷冻干燥对长双歧杆菌损伤作用的研究 被引量：4

9

作者 刘丽凤 孟祥晨 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期32-35,共4页

冷冻干燥是乳酸菌和益生菌干燥的主要方式,冷冻和干燥2个过程都会影响菌体细胞的存活率,探讨冷冻和干燥过程对长双歧杆菌的损伤作用有利于指导高存活性益生菌粉的生产。采用透射电镜观察菌体在冷冻干燥过程中的微结构,通过溢出胞外的β... 冷冻干燥是乳酸菌和益生菌干燥的主要方式,冷冻和干燥2个过程都会影响菌体细胞的存活率,探讨冷冻和干燥过程对长双歧杆菌的损伤作用有利于指导高存活性益生菌粉的生产。采用透射电镜观察菌体在冷冻干燥过程中的微结构,通过溢出胞外的β-半乳糖苷酶活性评价冷冻和干燥后细胞膜通透性的变化,通过测定冷冻和干燥后胞内Na^+和K^+浓度的变化研究离子效应的影响。研究结果表明,长双歧杆菌在冷冻干燥过程中的形态、细胞膜通透性和胞内离子浓度变化程度随冻结时间的延长而加剧;冷冻干燥过程使菌体出现细胞质浓缩、质壁分离、菌体皱缩以及破损现象;冷冻干燥使细胞膜通透性增大,使胞内Na^+、K^+浓度显著下降,并伴随比例失调。 展开更多

关键词 冷冻干燥 长双歧杆菌 损伤

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大豆水溶性多糖对酸性乳饮料稳定作用的研究 被引量：3

10

作者 姚晶 孟祥晨 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2009年第6期54-56,61,共4页

通过测定添加不同质量分数的大豆水溶性多糖对酸性乳饮料的沉淀率、黏度、粒径分布、水分子流动性及Zeta电位的影响,研究了大豆水溶性多糖对酸性乳饮料的稳定作用。结果表明,大豆水溶性多糖对酸性乳饮料的稳定作用表现为使产品的沉淀率... 通过测定添加不同质量分数的大豆水溶性多糖对酸性乳饮料的沉淀率、黏度、粒径分布、水分子流动性及Zeta电位的影响,研究了大豆水溶性多糖对酸性乳饮料的稳定作用。结果表明,大豆水溶性多糖对酸性乳饮料的稳定作用表现为使产品的沉淀率降低,黏度升高,在微观性质上表现为使产品的粒径减小,水分流动性减弱,Zeta电位的绝对值升高。其中大豆水溶性多糖对产品的粒径分布有较大影响,对产品的Zeta电位和水分子的流动性影响较小。 展开更多

关键词 大豆水溶性多糖 酸性乳饮料 稳定性

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酸应激对1株乳酸乳球菌质膜F_1F_0-ATPase活性的影响 被引量：1

11

作者 刘怀龙 孟祥晨 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期63-65,共3页

评价10株乳酸乳球菌的酸应激能力,选用应激能力较高的菌株,确定其最佳酸应激条件。将4 h、10 h、20 h培养的该菌菌体在此条件下应激,以硫酸亚铁钼蓝比色法测定应激前后的质膜F_1 F_0-ATPase活性。结果表明,菌株KLDS 4.0312具有较高应激... 评价10株乳酸乳球菌的酸应激能力,选用应激能力较高的菌株,确定其最佳酸应激条件。将4 h、10 h、20 h培养的该菌菌体在此条件下应激,以硫酸亚铁钼蓝比色法测定应激前后的质膜F_1 F_0-ATPase活性。结果表明,菌株KLDS 4.0312具有较高应激能力,应激后耐酸性可提高7542倍,其最佳酸应激条件为pH4.5,30 min。4 h、10 h、20 h培养的该菌菌体应激后,质膜F_1F_0-ATPase活性分别提高56.68%、11.05%、5.16%。 展开更多

关键词 酸应激 乳酸乳球菌 F1F0-ATPase 存活率

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乳杆菌质粒基因工具的发展概况 被引量：1

12

作者 刘红娟 孟祥晨 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2008年第5期39-43,共5页

乳杆菌作为重要的益生菌已经被广泛地应用于食品及饮料加工业。利用分子生物学技术可改造乳杆菌的性状,改善其工业特性,满足生产需要。但相对于大肠杆菌,乳杆菌基因工程尚处于起步阶段。由于乳杆菌自身含有很多质粒,因此可以自身质粒为... 乳杆菌作为重要的益生菌已经被广泛地应用于食品及饮料加工业。利用分子生物学技术可改造乳杆菌的性状,改善其工业特性,满足生产需要。但相对于大肠杆菌,乳杆菌基因工程尚处于起步阶段。由于乳杆菌自身含有很多质粒,因此可以自身质粒为基础构建克隆载体或表达载体。主要介绍了乳杆菌质粒概况以及质粒基因工具的发展概况,并展望了乳杆菌质粒基因工具的发展前景。 展开更多

关键词 乳杆菌 质粒 基因工具

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H_2O_2适应对双歧杆菌部分特性的影响及其遗传稳定性

13

作者 桂仕林 孟祥晨 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期44-47,共4页

研究H2O2适应对Bifidobacteriumbifidum KLDS2.0613生长特性、疏水性和降胆固醇能力等特性的影响,以及该菌株H2O2适应反应的遗传稳定性。研究结果表明,与未适应菌株相比,经3mg/LH2O2适应后的B.bifidum KLDS2.0613的生长特性和降胆固醇... 研究H2O2适应对Bifidobacteriumbifidum KLDS2.0613生长特性、疏水性和降胆固醇能力等特性的影响,以及该菌株H2O2适应反应的遗传稳定性。研究结果表明,与未适应菌株相比,经3mg/LH2O2适应后的B.bifidum KLDS2.0613的生长特性和降胆固醇能力没有显著变化,而适应菌株的疏水性显著降低。H2O2适应菌株在厌氧条件下培养1代后,其耐受H2O2能力丧失。 展开更多

关键词 双歧杆菌 H2O2 应激适应 遗传稳定性

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喷雾干燥对发酵乳杆菌KLDS1.0709存活影响的研究 被引量：8

14

作者 郭云 孟祥晨 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期109-111,共3页

研究喷雾干燥对高抗氧化活性发酵乳杆菌KLDS1.0709存活的影响。以脱脂乳为菌体悬浮基质,研究不同出风温度对该菌喷雾干燥后菌体存活率的影响,然后在脱脂乳中添加不同比例的海藻糖和蔗糖,比较不同基质对菌体存活率的影响。结果表明,随出... 研究喷雾干燥对高抗氧化活性发酵乳杆菌KLDS1.0709存活的影响。以脱脂乳为菌体悬浮基质,研究不同出风温度对该菌喷雾干燥后菌体存活率的影响,然后在脱脂乳中添加不同比例的海藻糖和蔗糖,比较不同基质对菌体存活率的影响。结果表明,随出风温度的升高,菌体存活率和水分含量均降低;当出风温度为75℃时,菌体存活率为62.98%,残留水分含量为5.80%。以10%脱脂乳+5%海藻糖+5%蔗糖为基质进行喷雾干燥,菌体存活率最高达73.90%,表明海藻糖和蔗糖与脱脂乳混合作为基质时可提高该菌喷雾干燥后的存活率。 展开更多

关键词 喷雾干燥 脱脂乳 发酵乳杆菌 海藻糖 蔗糖

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双组分调节系统对乳酸菌产细菌素过程的影响 被引量：2

15

作者 杨郁荭 王辉 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2011年第6期51-54,共4页

综述了双组分调节系统的组成,以及双组分调节系统对两类细菌素合成的调节作用,来初步了解双组分调节系统在乳酸菌产细菌素过程中的作用机制。

关键词 双组分 细菌素 蛋白激酶 反应调节器

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乳制品中活双歧杆菌检测试剂盒的研制及应用

16

作者 张林芳 孟祥晨 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期165-169,176,共6页

在EMAReal-Time PCR检测方法的基础上,组装检测乳制品中活双歧杆菌的荧光定量PCR试剂盒。建立了EMAReal-Time PCR检测乳制品中活双歧杆菌的标准曲线。组装出检测乳制品中活双歧杆菌的荧光定量PCR试剂盒。该试剂盒批内及批间变异系数(CV... 在EMAReal-Time PCR检测方法的基础上,组装检测乳制品中活双歧杆菌的荧光定量PCR试剂盒。建立了EMAReal-Time PCR检测乳制品中活双歧杆菌的标准曲线。组装出检测乳制品中活双歧杆菌的荧光定量PCR试剂盒。该试剂盒批内及批间变异系数(CV)均小于5%;对乳制品中常见乳酸菌无交叉反应;最低检测限为2×104CFU/mL。该试剂盒在-20℃下,至少可保存6个月,4℃可保存3个月。分别采用研究所获得的试剂盒和平板菌落计数法检测12份市售酸乳中的活双歧杆菌的数量,2种检测方法计数结果差异不显著(P>0.05)。该方法所建立的标准曲线相关系数大于98%。所研制的试剂盒重复性较好、特异性较强、灵敏度较高,可以准确地定量检测乳制品中的活双歧杆菌。 展开更多

关键词 双歧杆菌 实时PCR 试剂盒

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