期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
基于qPCR的VGM-R02b定量检测方法建立及其在食蟹猴组织分布特征
1
作者
高彩虹
任欣怡
+2 位作者
洛文靖
张雨飞
程远国
《中国药理学与毒理学杂志》
北大核心
2025年第2期100-108,共9页
目的建立基于实时定量聚合酶链式反应(qPCR)的高灵敏度检测方法,定量分析基因治疗药物VGM-R02b(腺相关病毒9载体)在食蟹猴体内组织分布特征。方法利用VGM-R02b质粒标准品构建qPCR标准曲线,优化扩增程序等关键参数并验证方法的定量范围...
目的建立基于实时定量聚合酶链式反应(qPCR)的高灵敏度检测方法,定量分析基因治疗药物VGM-R02b(腺相关病毒9载体)在食蟹猴体内组织分布特征。方法利用VGM-R02b质粒标准品构建qPCR标准曲线,优化扩增程序等关键参数并验证方法的定量范围、精密度、准确度、稀释线性、选择性、特异性及样本稳定性。单次单侧脑室注射VGM-R02b后,于给药后第29天(D29)和第92天(D92)采集食蟹猴全血及多组织样本,检测目的基因含量并分析其组织分布特点。结果建立了定量检测食蟹猴体内VGM-R02b目的基因的qPCR方法并完成了方法学验证。该方法定量范围为5.00×10^(9)~5.00×10^(1)copies·μg^(-1)DNA,R2≥0.9989,精密度、准确性、稀释线性、选择性和特异性均良好。目的基因在食蟹猴组织(以肝为例)中经室温放置4 h、-15~-25℃放置9 d、反复冻融5次、-60~-80℃放置90 d,在食蟹猴全血中经室温放置4 h、-15~-25℃放置9 d,反复冻融5次、-60~-80℃放置93 d及提取的核酸样本经室温放置4.25 h、2~8℃放置24.16 h、反复冻融5次、-60~-80℃放置109 d均保持稳定。基于qPCR定量检测结果显示,给药后D29和D92,对照组均未检测出目的基因,给药组目的基因分布于所有组织,其中脑、肝、脾和脊髓分布较高。与D29相比,D92所有组织中目的基因含量均无显著变化。结论建立的qPCR方法稳健可靠,可用于定量检测食蟹猴体内VGM-R02b目的基因含量。VGM-R02b给药后D29和D92目的基因分布于所有组织,其中脑、肝、脾和脊髓中分布较高。
展开更多
关键词
基因治疗
实时定量聚合酶链式反应
方法学
验证
生物分析
在线阅读
下载PDF
职称材料
Long Evans大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型的特征及其造模前后谷氨酸的含量
2
作者
熊亚妮
孟永
+3 位作者
钱仪敏
张鹏
张慧
李华
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2023年第6期54-61,共8页
目的观察Long Evans大鼠视网膜缺血再灌注(retinal ischemia reperfusion,RIR)损伤后视网膜的功能、结构及谷氨酸含量的变化,为视网膜的损伤及可能保护机制研究提供参考。方法随机选取30只成年SPF级Long Evans大鼠,对其左眼前房持续60 ...
目的观察Long Evans大鼠视网膜缺血再灌注(retinal ischemia reperfusion,RIR)损伤后视网膜的功能、结构及谷氨酸含量的变化,为视网膜的损伤及可能保护机制研究提供参考。方法随机选取30只成年SPF级Long Evans大鼠,对其左眼前房持续60 min灌注高压生理盐水(132 mmHg),构建RIR损伤模型,右侧眼不处理作为自身对照。在造模后1、3、7和14 d,利用闪光全视网膜电图(flash electroretinogram,f-ERG)检测视网膜电生理功能的变化情况;在造模前及造模后3、7、14 d,利用光学相干断层技术(optical coherence tomography,OCT)测量视网膜厚度,眼底成像观察眼底血管的变化情况;于造模后14 d处死大鼠,进行石蜡包埋、苏木精伊红(hematoxylin eosin,HE)染色和缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)荧光染色观察视网膜形态结构、细胞凋亡及分布情况,ELISA检测视网膜谷氨酸的含量。结果与对照眼相比,造模眼从第1天开始视网膜电图b波振幅极显著下降(P<0.01),潜伏期极显著延迟(P<0.01);OCT显示从第3天开始视网膜神经节细胞复合体(retinal ganglion cell complex,GCC)厚度极显著变薄(P<0.01),从第7天开始全层视网膜厚度极显著变薄(P<0.01),且都随着时间延长越来越薄(P<0.05);眼底照片显示视网膜从第3天开始出现明显的缺血,一直到第14天都没有恢复到正常水平;第14天HE染色切片结果显示视网膜萎缩,内层明显变薄,视网膜神经节细胞(ganglion cells,RGCs)减少;TUNEL荧光染色结果显示视网膜各层出现明显的细胞凋亡;ELISA结果显示造模后视网膜谷氨酸含量增加(P<0.05)。结论Long Evans大鼠RIR损伤引起视觉电生理功能严重损伤,视网膜萎缩,尤其GCC厚度减少最明显,且随着时间延长损伤加剧,不可逆转,RGCs凋亡,眼底血管缺血,视网膜谷氨酸含量增加,为视网膜损伤类疾病的研究提供良好的动物模型。
展开更多
关键词
Long
Evans大鼠
RIR损伤
视网膜
谷氨酸
动物模型
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
基于qPCR的VGM-R02b定量检测方法建立及其在食蟹猴组织分布特征
1
作者
高彩虹
任欣怡
洛文靖
张雨飞
程远国
机构
上海鼎岳生物技术有限公司
复旦大学生命科学学院
上海
天泽云泰
生物
医药
有限公司
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
北大核心
2025年第2期100-108,共9页
文摘
目的建立基于实时定量聚合酶链式反应(qPCR)的高灵敏度检测方法,定量分析基因治疗药物VGM-R02b(腺相关病毒9载体)在食蟹猴体内组织分布特征。方法利用VGM-R02b质粒标准品构建qPCR标准曲线,优化扩增程序等关键参数并验证方法的定量范围、精密度、准确度、稀释线性、选择性、特异性及样本稳定性。单次单侧脑室注射VGM-R02b后,于给药后第29天(D29)和第92天(D92)采集食蟹猴全血及多组织样本,检测目的基因含量并分析其组织分布特点。结果建立了定量检测食蟹猴体内VGM-R02b目的基因的qPCR方法并完成了方法学验证。该方法定量范围为5.00×10^(9)~5.00×10^(1)copies·μg^(-1)DNA,R2≥0.9989,精密度、准确性、稀释线性、选择性和特异性均良好。目的基因在食蟹猴组织(以肝为例)中经室温放置4 h、-15~-25℃放置9 d、反复冻融5次、-60~-80℃放置90 d,在食蟹猴全血中经室温放置4 h、-15~-25℃放置9 d,反复冻融5次、-60~-80℃放置93 d及提取的核酸样本经室温放置4.25 h、2~8℃放置24.16 h、反复冻融5次、-60~-80℃放置109 d均保持稳定。基于qPCR定量检测结果显示,给药后D29和D92,对照组均未检测出目的基因,给药组目的基因分布于所有组织,其中脑、肝、脾和脊髓分布较高。与D29相比,D92所有组织中目的基因含量均无显著变化。结论建立的qPCR方法稳健可靠,可用于定量检测食蟹猴体内VGM-R02b目的基因含量。VGM-R02b给药后D29和D92目的基因分布于所有组织,其中脑、肝、脾和脊髓中分布较高。
关键词
基因治疗
实时定量聚合酶链式反应
方法学
验证
生物分析
Keywords
gene therapy
quantitative real time polymerase chain reaction
methodology
validation
bioanalysis
分类号
R965 [医药卫生—药理学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
Long Evans大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型的特征及其造模前后谷氨酸的含量
2
作者
熊亚妮
孟永
钱仪敏
张鹏
张慧
李华
机构
上海
工程
技术
大学
中国医药工业研究总院
上海
益诺思
生物技术
股份
有限公司
益诺思
生物技术
南通
有限公司
上海鼎岳生物技术有限公司
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2023年第6期54-61,共8页
基金
江苏省创新能力建设计划科技公共服务平台项目(BM2021002)。
文摘
目的观察Long Evans大鼠视网膜缺血再灌注(retinal ischemia reperfusion,RIR)损伤后视网膜的功能、结构及谷氨酸含量的变化,为视网膜的损伤及可能保护机制研究提供参考。方法随机选取30只成年SPF级Long Evans大鼠,对其左眼前房持续60 min灌注高压生理盐水(132 mmHg),构建RIR损伤模型,右侧眼不处理作为自身对照。在造模后1、3、7和14 d,利用闪光全视网膜电图(flash electroretinogram,f-ERG)检测视网膜电生理功能的变化情况;在造模前及造模后3、7、14 d,利用光学相干断层技术(optical coherence tomography,OCT)测量视网膜厚度,眼底成像观察眼底血管的变化情况;于造模后14 d处死大鼠,进行石蜡包埋、苏木精伊红(hematoxylin eosin,HE)染色和缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)荧光染色观察视网膜形态结构、细胞凋亡及分布情况,ELISA检测视网膜谷氨酸的含量。结果与对照眼相比,造模眼从第1天开始视网膜电图b波振幅极显著下降(P<0.01),潜伏期极显著延迟(P<0.01);OCT显示从第3天开始视网膜神经节细胞复合体(retinal ganglion cell complex,GCC)厚度极显著变薄(P<0.01),从第7天开始全层视网膜厚度极显著变薄(P<0.01),且都随着时间延长越来越薄(P<0.05);眼底照片显示视网膜从第3天开始出现明显的缺血,一直到第14天都没有恢复到正常水平;第14天HE染色切片结果显示视网膜萎缩,内层明显变薄,视网膜神经节细胞(ganglion cells,RGCs)减少;TUNEL荧光染色结果显示视网膜各层出现明显的细胞凋亡;ELISA结果显示造模后视网膜谷氨酸含量增加(P<0.05)。结论Long Evans大鼠RIR损伤引起视觉电生理功能严重损伤,视网膜萎缩,尤其GCC厚度减少最明显,且随着时间延长损伤加剧,不可逆转,RGCs凋亡,眼底血管缺血,视网膜谷氨酸含量增加,为视网膜损伤类疾病的研究提供良好的动物模型。
关键词
Long
Evans大鼠
RIR损伤
视网膜
谷氨酸
动物模型
Keywords
Long Evans rats
RIR injury
retina
glutamate
animal model
分类号
R-33 [医药卫生]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于qPCR的VGM-R02b定量检测方法建立及其在食蟹猴组织分布特征
高彩虹
任欣怡
洛文靖
张雨飞
程远国
《中国药理学与毒理学杂志》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Long Evans大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型的特征及其造模前后谷氨酸的含量
熊亚妮
孟永
钱仪敏
张鹏
张慧
李华
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2023
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
