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金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶Ply187的CHAP结构域的表达及抗菌活性分析 被引量:2
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作者 吴蒙 陆海荣 黄青山 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期232-238,共7页
噬菌体裂解酶是一种高效的抗菌蛋白,系统地分析噬菌体裂解酶催化域的活性,有助于设计高效杂合裂解酶。合成噬菌体裂解酶Ply187的CHAP催化结构域(CHAPPly187)基因,并构建表达载体p ET28a-CHAPPly187转化至大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱... 噬菌体裂解酶是一种高效的抗菌蛋白,系统地分析噬菌体裂解酶催化域的活性,有助于设计高效杂合裂解酶。合成噬菌体裂解酶Ply187的CHAP催化结构域(CHAPPly187)基因,并构建表达载体p ET28a-CHAPPly187转化至大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达和两步纯化,获得高纯度的CHAPPly187,再与溶葡萄球菌酶催化域(CATLysn)进行活性比较。比浊法检测显示CHAPPly187和CATLysn对金黄色葡萄球菌都具有较强的抗菌活性;CHAPPly187具有更宽的抗菌谱,最适作用p H范围更大,对离子强度的耐受能力更好,易受EDTA的影响。低浓度的二价金属离子Ca2+、Mg2+、Mn2+对两种催化域都有明显的促进作用,低浓度的Zn2+、Cu2+、Fe2+对它们有很强的抑制作用。 展开更多
关键词 噬菌体裂解酶 溶葡萄球菌酶 催化结构域 CHAP 抗菌活性
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重组溶葡萄球菌酶对奶牛子宫内膜炎的疗效研究 被引量:6
2
作者 张继恩 史为民 +11 位作者 吴聪明 孙永学 王赞江 刘明春 孙春娣 张洪雷 郭刚 曾东平 刘宇 向蓉 沈建忠 黄青山 《中国兽药杂志》 2009年第3期17-23,共7页
为研究重组溶葡萄球菌酶对奶牛子宫内膜炎的疗效,以青霉素钠、土霉素为对照药物,子宫内灌注给药,分别在河北、内蒙古、广州、上海奶牛场试验,共治疗急、慢性子宫内膜炎病例359头,抽检249头奶牛子宫分泌物进行细菌学分离鉴定与统计分析... 为研究重组溶葡萄球菌酶对奶牛子宫内膜炎的疗效,以青霉素钠、土霉素为对照药物,子宫内灌注给药,分别在河北、内蒙古、广州、上海奶牛场试验,共治疗急、慢性子宫内膜炎病例359头,抽检249头奶牛子宫分泌物进行细菌学分离鉴定与统计分析。结果表明,大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、化脓棒状杆菌是4种检出率较高的病原菌。重组溶葡萄球菌酶治疗组与土霉素、青霉素钠比较,按400、800、1200 U/次的三个浓度剂量治疗,隔日投药1次,连续用药3次,800、1200 U/次的浓度剂量显效率超过80%,显著优于青霉素钠的疗效(P<0.01),与土霉素注射液组相当。追加用药次数可进一步提高奶牛子宫内膜炎的痊愈率。重组溶葡萄球菌酶能有效治疗由金黄色葡菌球菌、链球菌、化脓棒状杆菌等革兰氏阳性菌感染的子宫内膜炎,治愈后受孕率在70%左右。尤其是对抗生素治疗无效的慢性子宫内膜炎同样具有很好的疗效。因此,用重组溶葡萄球菌酶治疗奶牛子宫内膜炎安全、高效。 展开更多
关键词 重组溶葡萄球菌酶 奶牛 子宫内膜炎 疗效
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重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎的疗效研究 被引量:4
3
作者 蒋司嘉 张继恩 +4 位作者 吴聪明 李国栋 左之才 沈建忠 黄青山 《中国兽药杂志》 2011年第12期23-28,共6页
以85头患乳房炎奶牛共104个乳区为研究对象,随机分为4组,每组26个,分别用重组溶葡萄球菌酶粉低(200 U/乳区)、中(400 U/乳区)、高(800 U/乳区)三个剂量,对照组为青霉素G钠(160万IU/乳区),每天早晚挤奶后乳池灌注给药,共4 d,研究不同剂... 以85头患乳房炎奶牛共104个乳区为研究对象,随机分为4组,每组26个,分别用重组溶葡萄球菌酶粉低(200 U/乳区)、中(400 U/乳区)、高(800 U/乳区)三个剂量,对照组为青霉素G钠(160万IU/乳区),每天早晚挤奶后乳池灌注给药,共4 d,研究不同剂量重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎的治疗效果。试验结果显示,低、中、高剂量重组溶葡萄球菌酶均能有效清除感染乳区的链球菌、葡萄球菌、化脓隐秘杆菌等G+菌,大幅降低牛奶中的白细胞数,提高日产奶量。其中低剂量组对隐性乳房炎、临床型乳房炎的有效率和治愈率略优于青霉素G钠(P>0.05);中、高剂量对隐性乳房炎、临床型乳房炎的有效率和治愈率显著优于青霉素G钠(P<0.05);中、高剂量的疗效相当(P>0.05)。重组溶葡萄球菌酶是一种很好的治疗奶牛隐性乳房炎和临床乳房炎备选药物。 展开更多
关键词 重组溶葡萄球菌酶 奶牛 临床乳房炎 隐性乳房炎 疗效
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抗溶葡萄球菌酶N端合成多肽抗体的制备与鉴定 被引量:1
4
作者 吴宏宇 黄晋江 +1 位作者 张继恩 黄青山 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第S1期352-355,共4页
为了制备抗溶葡萄球菌酶N端合成多肽抗体,合成了溶葡萄球菌酶(lysostaphin)分子的3-13位的11个氨基酸的多肽(THEHSAQWLN),并利用戊二醛双功能试剂将人工合成多肽成功地与KLH进行偶联,免疫新西兰兔制备抗lysostaphin合成多肽的抗体,并经... 为了制备抗溶葡萄球菌酶N端合成多肽抗体,合成了溶葡萄球菌酶(lysostaphin)分子的3-13位的11个氨基酸的多肽(THEHSAQWLN),并利用戊二醛双功能试剂将人工合成多肽成功地与KLH进行偶联,免疫新西兰兔制备抗lysostaphin合成多肽的抗体,并经亲和层析进行了纯化。对此抗体进行鉴定的结果表明,抗溶葡萄球菌酶合成多肽抗体可与重组溶葡萄球菌酶分子发生特异性反应,并可用于蛋白免疫印迹。该抗体的制备为使用亲和层析纯化溶葡萄球菌酶提供了有用的配基。 展开更多
关键词 溶葡萄球菌酶 抗原性多肽 多克隆抗体 酶联免疫吸附测定法 蛋白免疫印迹
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重组溶葡萄球菌酶在牛奶中的性质研究 被引量:1
5
作者 陆敏 许黎明 +3 位作者 吴宏宇 张继恩 李国栋 黄青山 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期162-166,共5页
溶葡萄球菌酶(Lysostaphin)是一种能高效裂解葡萄球菌细胞壁的肽链内切酶,已有研究表明其能够有效预防和去除奶牛乳腺中葡萄球菌的感染,但该酶在牛奶中的性质研究还缺少详细的研究数据。现对重组溶葡萄球菌酶在牛奶中的一些性质进行研... 溶葡萄球菌酶(Lysostaphin)是一种能高效裂解葡萄球菌细胞壁的肽链内切酶,已有研究表明其能够有效预防和去除奶牛乳腺中葡萄球菌的感染,但该酶在牛奶中的性质研究还缺少详细的研究数据。现对重组溶葡萄球菌酶在牛奶中的一些性质进行研究。检测了加入溶葡萄球菌酶后牛奶性状的变化和重组溶葡萄球菌酶在牛奶中的酶活的稳定性以及溶葡萄球菌酶在牛奶中的抑、杀菌活性。结果显示,重组溶葡萄球菌酶未改变牛奶的外观性状;并且重组溶葡萄球菌酶在39℃牛奶中可以稳定存放至少20 h以上,酶活性保持稳定;同时重组溶葡萄球菌酶在牛奶中对金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌仍然保持了良好的抑杀菌效果。该研究为今后溶葡萄球菌酶用于奶牛乳腺炎的治疗提供参考依据。 展开更多
关键词 重组溶葡萄球菌酶 牛奶 酶活性 杀菌
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重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎和子宫内膜炎常见病原菌的体外抑杀菌试验 被引量:2
6
作者 贾敏 吴聪明 +1 位作者 沈建忠 黄青山 《中国奶牛》 2007年第6期38-42,共5页
从患乳房炎和子宫内膜炎奶牛的奶或子宫黏液中分离菌株后经鉴定选取金黄色葡萄球菌105株、表皮葡萄球菌20株、大肠埃希氏菌20株、链球菌38株(其中停乳链球菌8株,无乳链球菌30株)和牛多杀性巴氏杆菌5株,在体外用重组溶葡萄球菌酶、苯唑... 从患乳房炎和子宫内膜炎奶牛的奶或子宫黏液中分离菌株后经鉴定选取金黄色葡萄球菌105株、表皮葡萄球菌20株、大肠埃希氏菌20株、链球菌38株(其中停乳链球菌8株,无乳链球菌30株)和牛多杀性巴氏杆菌5株,在体外用重组溶葡萄球菌酶、苯唑西林、氨苄西林、庆大霉素按照微量肉汤稀释法进行抑杀菌实验。结果表明:重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎和子宫内膜炎分离的金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌(包括耐药菌株和敏感菌株)具有良好抑杀效果,对链球菌(包括无乳链球菌和停乳链球菌)和牛多杀性巴氏杆菌具有一定的抑杀效果,对大肠杆菌作用较差;苯唑西林、氨苄西林、庆大霉素都有一定量的耐药菌株产生,而重组溶葡萄球菌酶对苯唑西林、氨苄西林、庆大霉素耐药菌株同样具有良好抑杀效果。 展开更多
关键词 重组溶葡萄球菌酶 奶牛乳房炎 子宫内膜炎 抑杀菌试验
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CHAP抗生酶数据库的构建及其信息分析 被引量:1
7
作者 唐立成 吴宏宇 黄青山 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2019年第8期904-909,共6页
目的建立CHAP抗生酶数据库,对已知的CHAP抗生酶信息进行收集整理,为研究其功能机制,和设计研发新型CHAP抗生酶提供帮助。方法收集公共数据库和科学文献中的CHAP抗生酶信息,使用UniProtKB,InterPro,PDB,GO和BioPerl进行信息关联和信息注... 目的建立CHAP抗生酶数据库,对已知的CHAP抗生酶信息进行收集整理,为研究其功能机制,和设计研发新型CHAP抗生酶提供帮助。方法收集公共数据库和科学文献中的CHAP抗生酶信息,使用UniProtKB,InterPro,PDB,GO和BioPerl进行信息关联和信息注释;使用Apache,MySQL,PHP,Perl和jQuery构建数据库及WEB页面。结果构建了基于WAMP架构的CHAP抗生酶数据库(http://biotechlab.fudan.edu.cn/database/chap),包含来自于263种来源的1572种CHAP抗生酶,WEB界面提供浏览、搜索和统计信息等功能,允许用户以自定义的搜索标准快速获取数据,并对CHAP抗生酶的序列、结构、来源、功能、物化性质等信息进行分析。结论本研究建立的CHAP抗生酶数据库作为抗生酶研究的一个独特工具,具有多种潜在的应用,为进行CHAP抗生酶研究的研究者提供了一个极有用的研究平台。 展开更多
关键词 细菌耐药性 抗生酶 CHAP结构域 数据库
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重组溶葡萄球菌酶泡腾栓在母猪体内的药动学与阴道内残留消除研究 被引量:1
8
作者 叶贵子 张幼定 +6 位作者 陆珉 李国栋 张继恩 孙永学 曾东平 陈超 黄青山 《中国猪业》 2013年第3期56-58,共3页
通过双抗夹心酶联免疫学方法,采用药代动力学软件3p97,分别在健康和患阴道炎猪体进行重组溶葡萄球菌酶(rLSP)药代动力学及阴道黏液中活性研究分析,对静脉注射rLSP的药物浓度-时间数据进行最佳模型拟合。结果表明,健康和患阴道炎母猪经... 通过双抗夹心酶联免疫学方法,采用药代动力学软件3p97,分别在健康和患阴道炎猪体进行重组溶葡萄球菌酶(rLSP)药代动力学及阴道黏液中活性研究分析,对静脉注射rLSP的药物浓度-时间数据进行最佳模型拟合。结果表明,健康和患阴道炎母猪经静脉注射rLSP(400U)后,消除半衰期分别为36.10分钟和40.36分钟。健康和患阴道炎母猪经阴道给药rLSP泡腾栓(400U)后,试验母猪血液中均未检测到酶活性,说明rLSP经阴道内黏膜吸收后在血液中没有药物蓄积。健康母猪和患病母猪在给药后36小时阴道内黏液中均能检测到酶活性(分别为7.34ng/mL和4.45ng/mL),而在第48小时均未检出,表明该药物在阴道内至少保持36小时的活性,且作用48小时后无残留。 展开更多
关键词 rLSP泡腾栓 母猪阴道炎 药代动力学 阴道内残留
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重组溶葡萄球菌酶治疗奶牛子宫内膜炎的疗效观察 被引量:3
9
作者 范洪斌 陈雷良 +2 位作者 李滨 张蓓蓓 张继恩 《上海畜牧兽医通讯》 2012年第3期34-35,共2页
奶牛子宫内膜炎(endometritis)主要是由于分娩或产后期间子宫内膜感染病原微生物而引起的生殖系统繁殖障碍性疾病,发病率较高,常造成奶牛屡配不孕、长期不孕而致淘汰,严重影响奶牛生产。奶牛子宫内膜炎的主要致病菌为葡萄球菌、链球... 奶牛子宫内膜炎(endometritis)主要是由于分娩或产后期间子宫内膜感染病原微生物而引起的生殖系统繁殖障碍性疾病,发病率较高,常造成奶牛屡配不孕、长期不孕而致淘汰,严重影响奶牛生产。奶牛子宫内膜炎的主要致病菌为葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、化脓性棒状杆菌、变形杆菌、衣原体等。多年来,奶牛子宫内膜炎一直依赖于传统的治疗方法,即使用抗菌类药物或防腐消毒液子宫内灌注, 展开更多
关键词 奶牛子宫内膜炎 葡萄球菌 疗效观察 治疗 繁殖障碍性疾病 重组 屡配不孕 病原微生物
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动物专用新型抗菌原料药及制剂创制与应用
10
作者 刘雅红 吴连勇 +8 位作者 黄青山 曾振灵 方炳虎 黄显会 程雪娇 孔梅 丁焕中 张晓会 《中国畜牧业》 2020年第4期29-29,共1页
华南农业大学校长刘雅红带领团队完成的“动物专用新型抗菌原料药及制剂创制与应用”项目获得2019年度国家科学技术进步奖二等奖,该项目在国际上首次攻克了溶葡萄球菌酶的产业化难题,解决了我国兽药研发的“卡脖子问题”,提升了我国兽... 华南农业大学校长刘雅红带领团队完成的“动物专用新型抗菌原料药及制剂创制与应用”项目获得2019年度国家科学技术进步奖二等奖,该项目在国际上首次攻克了溶葡萄球菌酶的产业化难题,解决了我国兽药研发的“卡脖子问题”,提升了我国兽药产业的自主创新能力及核心竞争力,为养殖业的可持续发展及保障食品安全和公共卫生安全提供了技术支撑。 展开更多
关键词 核心竞争力 自主创新能力 原料药 公共卫生安全 兽药产业 可持续发展 食品安全 产业化
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