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肝细胞癌细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达及意义 被引量:15
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作者 杨连君 王文亮 司晓辉 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期411-414,共4页
目的:探讨原发性肝细胞癌(简称肝癌)细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达情况及其意义。方法:采用免疫组化ABC法检测bcl-2和bax蛋白在66例人肝癌组织和24例人正常肝组织,以及3种人肝癌细胞系HCC-9204、SMMC-7721、HHCC和1种人正... 目的:探讨原发性肝细胞癌(简称肝癌)细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达情况及其意义。方法:采用免疫组化ABC法检测bcl-2和bax蛋白在66例人肝癌组织和24例人正常肝组织,以及3种人肝癌细胞系HCC-9204、SMMC-7721、HHCC和1种人正常肝细胞系QZG的表达情况,并分析肝癌组织的bcl-2和bax蛋白表达阳性率与其病理分级之间的关系。结果:bcl-2蛋白在正常肝组织中表达的阳性率只有4.2 %(1/24),在肝癌组织中的阳性率为25.8 %(17/66),二者具有显著性差异(P<0.05)。bax蛋白在正常肝组织中表达的阳性率为70.8 %(17/24),在肝癌组织中的阳性率为43.9 %(29/66),二者也具有显著性差异(P<0.05)。肝癌组织的bcl-2和bax蛋白表达阳性率与其病理分级之间均未见明显的相关性。在正常肝和肝癌组织中,bcl-2蛋白的阳性率均明显低于bax蛋白(P<0.01,P<0.05)。在正常肝细胞系QZG中未见明显的bcl-2阳性信号,bax蛋白的阳性细胞计数率为61.0%。肝癌细胞系SMMC-7721和HHCC的bcl-2蛋白阳性细胞计数率分别为14.3%和11.8%,bax蛋白阳性细胞计数率分别为58.3%和47.1%。肝癌细胞系HCC-9204中未见明显的bcl-2阳性信号,bax蛋白阳性细胞计数率为43.2%。结论:与正常肝组? 展开更多
关键词 BCL-2 BAX 肝细胞癌 细胞凋亡
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骨形成蛋白2基因转染的人牙周膜成纤维细胞的骨诱导作用 被引量:22
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作者 司晓辉 刘正 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期347-349,共3页
目的 建立表达骨形成蛋白 2 (BMP_2 )的人牙周膜成纤维细胞 (HPDLFs) ,观察其体内成骨作用 ,为牙周缺损修复基因疗法的建立提供实验依据。方法 采用脂质体载体将人BMP_2噬菌粒表达载体pBK_B2转染至HPDLFs。利用免疫组化ABC法检测转染... 目的 建立表达骨形成蛋白 2 (BMP_2 )的人牙周膜成纤维细胞 (HPDLFs) ,观察其体内成骨作用 ,为牙周缺损修复基因疗法的建立提供实验依据。方法 采用脂质体载体将人BMP_2噬菌粒表达载体pBK_B2转染至HPDLFs。利用免疫组化ABC法检测转染细胞内BMP_2蛋白的表达 ,并于无菌条件下将转染细胞注射于裸鼠股部肌肉内 ,2 1d后取材 ,苏木精—伊红染色观察肌肉组织内骨形成情况。结果 BMP_2基因转染后HPDLFs内有BMP_2蛋白的表达。在注射BMP_2基因转染细胞的肌肉组织内可见明显的新骨形成。结论 BMP_2基因成功转入HP DLFs中并得到有效表达 。 展开更多
关键词 骨形成蛋白2 基因转染 人牙周膜成纤维细胞 牙周缺损 修复 基因疗法
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乙醇诱导的肝癌细胞HCC-9204凋亡及其与Bax和Bcl-2蛋白的关系 被引量:5
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作者 杨连君 王文亮 司晓辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期315-317,358,共4页
目的探讨乙醇对肝癌细胞凋亡的诱导作用及其与凋亡相关基因bax和bcl-2表达的关系。方法用噻唑蓝(MTT)法检测浓度分别为20~100 mL/ L的乙醇对肝癌细胞系HCC-9204的杀伤作用。然后,用60 mL/ L乙醇作用6 h诱导HCC-9204细胞凋亡。以May-Gr... 目的探讨乙醇对肝癌细胞凋亡的诱导作用及其与凋亡相关基因bax和bcl-2表达的关系。方法用噻唑蓝(MTT)法检测浓度分别为20~100 mL/ L的乙醇对肝癌细胞系HCC-9204的杀伤作用。然后,用60 mL/ L乙醇作用6 h诱导HCC-9204细胞凋亡。以May-Grunwald-Giemsa (MGG)染色法、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法和流式细胞术分别分析凋亡细胞的形态学变化、DNA断裂情况和不同细胞周期的DNA含量变化。用免疫细胞化学染色图象分析法,检测诱导凋亡前、后Bax和Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果随着乙醇浓度的增加,其对HCC-9204细胞的杀伤作用逐渐增强。60 mL/ L乙醇可使HCC-9204细胞发生明显的细胞凋亡的形态学变化,并且大部分细胞为TUNEL阳性着色。流式细胞术分析可见明显的亚二倍体凋亡峰。诱导凋亡后的HCC-9204细胞Bax蛋白的表达水平明显增高,而Bcl-2在诱导凋亡前、后的HCC-9204细胞中均未见表达。结论低浓度乙醇对肝癌细胞HCC-9204具有明显的凋亡诱导作用,其凋亡的发生与Bax蛋白表达水平的增高有关。 展开更多
关键词 乙醇 细胞凋亡 肝细胞癌 BCL-2基因 HCC-9204 BAX
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肝癌细胞凋亡相关蛋白Bax的表达及意义 被引量:2
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作者 杨连君 王文亮 司晓辉 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第1期75-75,共1页
关键词 BAX 肝细胞癌 细胞凋亡
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乙醇诱导肝癌细胞凋亡及其单克隆抗体的制备
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作者 杨连君 王文亮 司晓辉 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期249-252,共4页
目的 :探讨原发性肝细胞癌 (简称肝癌 )细胞凋亡过程中相关分子的表达情况 ,制备抗肝癌凋亡细胞相关抗原的单克隆抗体 (mAb)。方法 :用含 6%乙醇的培养液培养肝癌细胞系HCC 92 0 4细胞 6h诱导其凋亡 ,透射电镜观察细胞形态变化 ,TUNEL... 目的 :探讨原发性肝细胞癌 (简称肝癌 )细胞凋亡过程中相关分子的表达情况 ,制备抗肝癌凋亡细胞相关抗原的单克隆抗体 (mAb)。方法 :用含 6%乙醇的培养液培养肝癌细胞系HCC 92 0 4细胞 6h诱导其凋亡 ,透射电镜观察细胞形态变化 ,TUNEL法检测细胞DNA片段化发生情况 ,流式细胞仪分析细胞DNA含量变化。环磷酰胺消减免疫法免疫小鼠。杂交瘤法制备抗凋亡细胞的mAb。ELISA法筛选在凋亡细胞高表达 ,而在非凋亡细胞低表达的mAb。有限稀释法连续克隆化。用免疫细胞化学ABC法进一步筛选和分析 ,并进行杂交瘤细胞染色体和免疫球蛋白 (Ig)类型分析。 结果 :6%乙醇作用HCC 92 0 4细胞 6h后 ,可见明显的凋亡形态学变化 ,大部分细胞为TUNEL染色阳性 ,并且流式细胞仪检测可见亚二倍体凋亡峰。经连续克隆化筛选出 1株在乙醇诱导凋亡的HCC 92 0 4细胞的胞核高表达 ,而在未经诱导凋亡的HCC 92 0 4细胞低表达的mAb。染色体分析结果符合mAb杂交瘤细胞特征 ,其Ig类型为IgG1。 结论 :低浓度乙醇诱导凋亡的HCC 92 0 4肝癌细胞中有某些相关分子的表达升高。初步获得了 1株可能是抗乙醇诱导的肝癌细胞凋亡相关抗原的mAb。 展开更多
关键词 细胞凋亡 单克隆抗体 肝细胞癌 乙醇
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