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阳离子脂质体介导的基因转染真核细胞的研究
被引量:
8
1
作者
李劲松
叶展
+1 位作者
赵涵芳
陈诗书
《上海第二医科大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第10期1025-1029,共5页
目的研究高效的阳离子转染NIH3T3的方法.方法以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,利用流式细胞仪比较三种脂质体转染效果,用不同的细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间优化转染条件.结果转染效率 LipofectAMINE2000>Gene...
目的研究高效的阳离子转染NIH3T3的方法.方法以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,利用流式细胞仪比较三种脂质体转染效果,用不同的细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间优化转染条件.结果转染效率 LipofectAMINE2000>GenePORTs>LipofectAMINE.在细胞融合度为60% ~ 70%,脂质体/DNA为3 μL/μg,脂质体的量为3 μL,转染时间为5 h时,转染效率最高.转染结束后表达时间可以达一个月.结论 LipofectAMINE2000转染效率最佳,并优化了其最佳转染条件.
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关键词
脂质体
转染
绿色荧光蛋白
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职称材料
2型糖尿病相关基因的研究进展
被引量:
7
2
作者
吴怡
赵涵芳
《上海第二医科大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第6期634-637,共4页
随着分子生物新技术新方法的不断发展,近年来,人们发现了一些与2型糖尿病发病有关的基因,如:组织蛋白酶L基因(CathepsinL基因),胰岛素能上调该基因的表达,从而降低血糖,所以该基因可能是参与血糖调节的中间环节。CAPN10基因,该基因存在...
随着分子生物新技术新方法的不断发展,近年来,人们发现了一些与2型糖尿病发病有关的基因,如:组织蛋白酶L基因(CathepsinL基因),胰岛素能上调该基因的表达,从而降低血糖,所以该基因可能是参与血糖调节的中间环节。CAPN10基因,该基因存在很多多态性位点,如:该基因SNP43、SNP19、SNP64等,都与糖尿病发病有一定关联。青少年起病的成人型糖尿病(MODY)是2型糖尿病的一种,其特点是早期发病(通常25岁以下),伴有胰岛素分泌功能障碍。肝细胞核因子4α(HNF4α)、葡萄糖激酶(GCK)、肝细胞因子1α(HNF1α)、胰岛素启动因子(IPF1)、肝细胞因子1β(HNF1β)和神经元分化因子/β细胞E框反式激活物2(NeuroD1/BETA2)是分别引起6种MODY的因素。这些基因的突变可导致代谢功能障碍,从而引发对β细胞的毒性作用,还可以引起胰腺发育不良。还有一些细胞因子基因,如:IL6基因,该基因的启动子的多态性也与2型糖尿病发病有很大关联。
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关键词
相关基因
2型糖尿病发病
胰岛素分泌功能障碍
cAPN10基因
肝细胞核因子4
组织蛋白酶L
成人型糖尿病
HNF-4Α
HNF-1α
代谢功能障碍
细胞因子基因
IL-6基因
多态性位点
青少年起病
葡萄糖激酶
分子生物
胰岛素能
降低血糖
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职称材料
核骨架/核基质结合区及其功能研究的进展
被引量:
2
3
作者
李颖
卢健
《上海第二医科大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第5期525-527,共3页
长期以来的研究只能用结合试验来证明核基质结合区(MARs)的存在,对其真正的功能了解甚少。直到最近,人们才发现了MARs的一些生物学活性,MARs参与襻环的形成和染色体的高级包装,在真核生物的转录调控和凋亡方面起到了重要作用。对MARs的...
长期以来的研究只能用结合试验来证明核基质结合区(MARs)的存在,对其真正的功能了解甚少。直到最近,人们才发现了MARs的一些生物学活性,MARs参与襻环的形成和染色体的高级包装,在真核生物的转录调控和凋亡方面起到了重要作用。对MARs的生物学功能仍在进一步的研究中,本文主要就MARs的结构、在转录调控中的作用及其它一些研究进展作一综述。
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关键词
核基质结合区
功能研究
核骨架
MARS
转录调控
生物学活性
生物学功能
结合试验
真核生物
染色体
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职称材料
C/EBPε增强U937细胞中PI3Kγ基因的表达
4
作者
蔡蓉
戴冰冰
+2 位作者
梅文瀚
李珂
卢健
《上海第二医科大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第6期562-564,571,共4页
目的研究过量表达转录因子CCAAT-增强子结合蛋白ε(CCAAT/enhancerbindingproteins,C/EBPε)对磷脂酰肌醇-3激酶γ(phosphoinositide3kinase,PI3Kγ)基因的影响。方法将C/EBPε基因的真核表达载体pcDNA3.1C/EBPε电穿孔转染U937细胞,G41...
目的研究过量表达转录因子CCAAT-增强子结合蛋白ε(CCAAT/enhancerbindingproteins,C/EBPε)对磷脂酰肌醇-3激酶γ(phosphoinositide3kinase,PI3Kγ)基因的影响。方法将C/EBPε基因的真核表达载体pcDNA3.1C/EBPε电穿孔转染U937细胞,G418筛选出稳定转染的混合细胞克隆后,用RTPCR与Westernblot的方法,分别检测转染细胞与对照细胞中C/EBPε与PI3Kγ基因的表达水平。结果过量表达转录因子C/EBPε后,可以显著提高U937细胞中PI3Kγ基因的表达水平。结论核内转录因子C/EBPε可能参与了PI3Kγ基因的转录调控。
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关键词
C/EBPε
U937细胞
PI3K
Γ基因
磷脂酰肌醇-3激酶
增强子结合蛋白
Western
PCDNA3
真核表达载体
RT-PCR
核内转录因子
过量表达
电穿孔转染
细胞克隆
稳定转染
blot
转染细胞
转录调控
水平
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职称材料
题名
阳离子脂质体介导的基因转染真核细胞的研究
被引量:
8
1
作者
李劲松
叶展
赵涵芳
陈诗书
机构
上海第二医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室
出处
《上海第二医科大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第10期1025-1029,共5页
基金
上海市教委重点项目(转化02)
上海教委第四期重点学科(ZDXK2001)资助项目
文摘
目的研究高效的阳离子转染NIH3T3的方法.方法以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,利用流式细胞仪比较三种脂质体转染效果,用不同的细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间优化转染条件.结果转染效率 LipofectAMINE2000>GenePORTs>LipofectAMINE.在细胞融合度为60% ~ 70%,脂质体/DNA为3 μL/μg,脂质体的量为3 μL,转染时间为5 h时,转染效率最高.转染结束后表达时间可以达一个月.结论 LipofectAMINE2000转染效率最佳,并优化了其最佳转染条件.
关键词
脂质体
转染
绿色荧光蛋白
Keywords
cationic liposome
transfection
green fluorescence protein
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
2型糖尿病相关基因的研究进展
被引量:
7
2
作者
吴怡
赵涵芳
机构
上海第二医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室
出处
《上海第二医科大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第6期634-637,共4页
文摘
随着分子生物新技术新方法的不断发展,近年来,人们发现了一些与2型糖尿病发病有关的基因,如:组织蛋白酶L基因(CathepsinL基因),胰岛素能上调该基因的表达,从而降低血糖,所以该基因可能是参与血糖调节的中间环节。CAPN10基因,该基因存在很多多态性位点,如:该基因SNP43、SNP19、SNP64等,都与糖尿病发病有一定关联。青少年起病的成人型糖尿病(MODY)是2型糖尿病的一种,其特点是早期发病(通常25岁以下),伴有胰岛素分泌功能障碍。肝细胞核因子4α(HNF4α)、葡萄糖激酶(GCK)、肝细胞因子1α(HNF1α)、胰岛素启动因子(IPF1)、肝细胞因子1β(HNF1β)和神经元分化因子/β细胞E框反式激活物2(NeuroD1/BETA2)是分别引起6种MODY的因素。这些基因的突变可导致代谢功能障碍,从而引发对β细胞的毒性作用,还可以引起胰腺发育不良。还有一些细胞因子基因,如:IL6基因,该基因的启动子的多态性也与2型糖尿病发病有很大关联。
关键词
相关基因
2型糖尿病发病
胰岛素分泌功能障碍
cAPN10基因
肝细胞核因子4
组织蛋白酶L
成人型糖尿病
HNF-4Α
HNF-1α
代谢功能障碍
细胞因子基因
IL-6基因
多态性位点
青少年起病
葡萄糖激酶
分子生物
胰岛素能
降低血糖
Keywords
type 2 diabetes
cathepsin L
CAPN10
MODY
cytokine
分类号
R587.1 [医药卫生—内分泌]
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职称材料
题名
核骨架/核基质结合区及其功能研究的进展
被引量:
2
3
作者
李颖
卢健
机构
上海第二医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室
出处
《上海第二医科大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第5期525-527,共3页
文摘
长期以来的研究只能用结合试验来证明核基质结合区(MARs)的存在,对其真正的功能了解甚少。直到最近,人们才发现了MARs的一些生物学活性,MARs参与襻环的形成和染色体的高级包装,在真核生物的转录调控和凋亡方面起到了重要作用。对MARs的生物学功能仍在进一步的研究中,本文主要就MARs的结构、在转录调控中的作用及其它一些研究进展作一综述。
关键词
核基质结合区
功能研究
核骨架
MARS
转录调控
生物学活性
生物学功能
结合试验
真核生物
染色体
Keywords
scaffold/matrix attachment regions
base unpairing regions
transcriptional regulation
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
C/EBPε增强U937细胞中PI3Kγ基因的表达
4
作者
蔡蓉
戴冰冰
梅文瀚
李珂
卢健
机构
上海第二医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室
人类基因治疗中心
出处
《上海第二医科大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第6期562-564,571,共4页
基金
国家自然科学基金(30300066)
上海市教委第四期重点学科(ZDXK2001)资助项目.
文摘
目的研究过量表达转录因子CCAAT-增强子结合蛋白ε(CCAAT/enhancerbindingproteins,C/EBPε)对磷脂酰肌醇-3激酶γ(phosphoinositide3kinase,PI3Kγ)基因的影响。方法将C/EBPε基因的真核表达载体pcDNA3.1C/EBPε电穿孔转染U937细胞,G418筛选出稳定转染的混合细胞克隆后,用RTPCR与Westernblot的方法,分别检测转染细胞与对照细胞中C/EBPε与PI3Kγ基因的表达水平。结果过量表达转录因子C/EBPε后,可以显著提高U937细胞中PI3Kγ基因的表达水平。结论核内转录因子C/EBPε可能参与了PI3Kγ基因的转录调控。
关键词
C/EBPε
U937细胞
PI3K
Γ基因
磷脂酰肌醇-3激酶
增强子结合蛋白
Western
PCDNA3
真核表达载体
RT-PCR
核内转录因子
过量表达
电穿孔转染
细胞克隆
稳定转染
blot
转染细胞
转录调控
水平
Keywords
phosphoinositide 3-kinase γ
CCAAT/enhancer binding proteins ε
gene expression and regulation
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
阳离子脂质体介导的基因转染真核细胞的研究
李劲松
叶展
赵涵芳
陈诗书
《上海第二医科大学学报》
CSCD
北大核心
2005
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
2型糖尿病相关基因的研究进展
吴怡
赵涵芳
《上海第二医科大学学报》
CSCD
北大核心
2005
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
核骨架/核基质结合区及其功能研究的进展
李颖
卢健
《上海第二医科大学学报》
CSCD
北大核心
2005
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
C/EBPε增强U937细胞中PI3Kγ基因的表达
蔡蓉
戴冰冰
梅文瀚
李珂
卢健
《上海第二医科大学学报》
CSCD
北大核心
2005
0
在线阅读
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职称材料
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