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高糖环境下ARPE-19细胞中不同VEGFA剪接体表达变化
1
作者
程蕾
程姗
+1 位作者
朱冉
徐国旭
《中华实验眼科杂志(中英文)》
北大核心
2025年第10期892-902,共11页
目的探讨高糖环境下人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19细胞中不同血管内皮生长因子A(VEGFA)剪接体的表达变化。方法将ARPE-19细胞分为空白对照组、对照组1、对照组2、HG1组、HG2组, 分别用5.5 mmol/L葡萄糖、5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L...
目的探讨高糖环境下人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19细胞中不同血管内皮生长因子A(VEGFA)剪接体的表达变化。方法将ARPE-19细胞分为空白对照组、对照组1、对照组2、HG1组、HG2组, 分别用5.5 mmol/L葡萄糖、5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇、5.5 mmol/L葡萄糖+44.5 mmol/L甘露醇、25.0 mmol/L葡萄糖和50.0 mmol/L葡萄糖处理, 其中空白对照组、对照组1和对照组2处理细胞72 h, HG1组和HG2组分别处理24、48和72 h。采用荧光定量PCR检测VEGFA不同剪接体mRNA相对表达量;采用Western blot法检测总VEGFA、VEGF信号的负调控因子SERPINF1[色素上皮衍生因子(PEDF)]和VEGF165(V4, 5, 10)蛋白相对表达量。结果 25和50 mmol/L葡萄糖浓度下各时间点ARPE-19细胞中总VEGFA mRNA和蛋白相对表达量总体比较差异均有统计学意义(mRNA:F=114.60、143.60, 均P<0.05;蛋白:F=10.00、8.04, 均P<0.05), 其中与各自对照组比较, 处理24、48和72 h后总VEGFA mRNA和蛋白相对表达量均明显升高, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。25和50 mmol/L葡萄糖浓度下各时间点ARPE-19细胞中SERPINF1(PEDF)mRNA和蛋白相对表达量总体比较差异均无统计学意义(mRNA:F=0.86、0.32, 均P>0.05;蛋白:F=1.25、0.08, 均P>0.05)。ARPE-19细胞中各剪接体mRNA表达水平由高到低依次为VEGF165(V4, 5, 10)、VEGF121(V6)、VEGF189(V2)、VEGF111(V8)和VEGF165b(V7)。HG1-24 h组VEGF111(V8) mRNA相对表达量低于对照组1, HG1-48 h组VEGF189(V2)和VEGF121(V6) mRNA相对表达量高于对照组1, HG1-72 h组VEGF121(V6)和VEGF165b(V7) mRNA相对表达量高于对照组1, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。HG2-24 h组VEGF111(V8)和VEGF165(V4, 5, 10)mRNA相对表达量均高于对照组2, HG2-48 h组VEGF165(V4, 5, 10)和VEGF165b(V7) mRNA相对表达量均高于对照组2, HG2-72 h组VEGF189(V2)、VEGF111(V8)、VEGF165(V4, 5, 10)和VEGF165b(V7) mRNA相对表达量均高于对照组2, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。空白对照组、对照组1、HG1-24 h组、HG1-48 h组和HG1-72 h组VEGF165(V4, 5, 10)蛋白相对表达量分别为1.01±0.07、1.05±0.07、1.16±0.06、1.37±0.08和1.28±0.05, 总体比较差异有统计学意义(F=10.36, P<0.05), 其中HG1-48 h组VEGF165(V4, 5, 10)蛋白相对表达量高于对照组1, 差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组、对照组2、HG2-24 h组、HG2-48 h组和HG2-72 h组VEGF165(V4, 5, 10)蛋白相对表达量分别为1.02±0.05、1.12±0.00、1.22±0.05、1.53±0.21和1.77±0.04, 总体比较差异有统计学意义(F=16.55, P<0.001), 其中HG2-48 h组和HG2-72 h组VEGF165(V4, 5, 10)蛋白相对表达量均高于对照组2, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 ARPE-19细胞中VEGFA各剪接体mRNA丰度从高到低依次为VEGF165(V4, 5, 10)、VEGF121(V6)、VEGF189(V2)、VEGF111(V8)和VEGF165b(V7)。VEGF121(V6)mRNA表达水平在25 mmol/L的高糖浓度下显著升高, 而VEGF165(V4, 5, 10)mRNA在50 mmol/L高糖浓度下才显著升高。2种高糖浓度下, mRNA表达水平均明显升高的剪接体是VEGF189(V2)和VEGF165b(V7), SERPINF1(PEDF)表达无显著变化。
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关键词
血管内皮生长因子A
剪接体
糖尿病视网膜病变
视网膜色素上皮细胞
血管内皮生长因子xxxb
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职称材料
题名
高糖环境下ARPE-19细胞中不同VEGFA剪接体表达变化
1
作者
程蕾
程姗
朱冉
徐国旭
机构
徐州市第一人民医院、徐州医科大学附属徐州市立医院、徐州市眼病防治研究所
上海生物人培训中心
苏州大学附属第二医院眼科
出处
《中华实验眼科杂志(中英文)》
北大核心
2025年第10期892-902,共11页
文摘
目的探讨高糖环境下人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19细胞中不同血管内皮生长因子A(VEGFA)剪接体的表达变化。方法将ARPE-19细胞分为空白对照组、对照组1、对照组2、HG1组、HG2组, 分别用5.5 mmol/L葡萄糖、5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇、5.5 mmol/L葡萄糖+44.5 mmol/L甘露醇、25.0 mmol/L葡萄糖和50.0 mmol/L葡萄糖处理, 其中空白对照组、对照组1和对照组2处理细胞72 h, HG1组和HG2组分别处理24、48和72 h。采用荧光定量PCR检测VEGFA不同剪接体mRNA相对表达量;采用Western blot法检测总VEGFA、VEGF信号的负调控因子SERPINF1[色素上皮衍生因子(PEDF)]和VEGF165(V4, 5, 10)蛋白相对表达量。结果 25和50 mmol/L葡萄糖浓度下各时间点ARPE-19细胞中总VEGFA mRNA和蛋白相对表达量总体比较差异均有统计学意义(mRNA:F=114.60、143.60, 均P<0.05;蛋白:F=10.00、8.04, 均P<0.05), 其中与各自对照组比较, 处理24、48和72 h后总VEGFA mRNA和蛋白相对表达量均明显升高, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。25和50 mmol/L葡萄糖浓度下各时间点ARPE-19细胞中SERPINF1(PEDF)mRNA和蛋白相对表达量总体比较差异均无统计学意义(mRNA:F=0.86、0.32, 均P>0.05;蛋白:F=1.25、0.08, 均P>0.05)。ARPE-19细胞中各剪接体mRNA表达水平由高到低依次为VEGF165(V4, 5, 10)、VEGF121(V6)、VEGF189(V2)、VEGF111(V8)和VEGF165b(V7)。HG1-24 h组VEGF111(V8) mRNA相对表达量低于对照组1, HG1-48 h组VEGF189(V2)和VEGF121(V6) mRNA相对表达量高于对照组1, HG1-72 h组VEGF121(V6)和VEGF165b(V7) mRNA相对表达量高于对照组1, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。HG2-24 h组VEGF111(V8)和VEGF165(V4, 5, 10)mRNA相对表达量均高于对照组2, HG2-48 h组VEGF165(V4, 5, 10)和VEGF165b(V7) mRNA相对表达量均高于对照组2, HG2-72 h组VEGF189(V2)、VEGF111(V8)、VEGF165(V4, 5, 10)和VEGF165b(V7) mRNA相对表达量均高于对照组2, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。空白对照组、对照组1、HG1-24 h组、HG1-48 h组和HG1-72 h组VEGF165(V4, 5, 10)蛋白相对表达量分别为1.01±0.07、1.05±0.07、1.16±0.06、1.37±0.08和1.28±0.05, 总体比较差异有统计学意义(F=10.36, P<0.05), 其中HG1-48 h组VEGF165(V4, 5, 10)蛋白相对表达量高于对照组1, 差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组、对照组2、HG2-24 h组、HG2-48 h组和HG2-72 h组VEGF165(V4, 5, 10)蛋白相对表达量分别为1.02±0.05、1.12±0.00、1.22±0.05、1.53±0.21和1.77±0.04, 总体比较差异有统计学意义(F=16.55, P<0.001), 其中HG2-48 h组和HG2-72 h组VEGF165(V4, 5, 10)蛋白相对表达量均高于对照组2, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 ARPE-19细胞中VEGFA各剪接体mRNA丰度从高到低依次为VEGF165(V4, 5, 10)、VEGF121(V6)、VEGF189(V2)、VEGF111(V8)和VEGF165b(V7)。VEGF121(V6)mRNA表达水平在25 mmol/L的高糖浓度下显著升高, 而VEGF165(V4, 5, 10)mRNA在50 mmol/L高糖浓度下才显著升高。2种高糖浓度下, mRNA表达水平均明显升高的剪接体是VEGF189(V2)和VEGF165b(V7), SERPINF1(PEDF)表达无显著变化。
关键词
血管内皮生长因子A
剪接体
糖尿病视网膜病变
视网膜色素上皮细胞
血管内皮生长因子xxxb
Keywords
Vascular endothelial growth factor A
Isoform
Diabetic retinopathy
Retinal pigment epithelial cells
VEGFxxxb
分类号
R587.2 [医药卫生—内分泌]
R774.1 [医药卫生—眼科]
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高糖环境下ARPE-19细胞中不同VEGFA剪接体表达变化
程蕾
程姗
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北大核心
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