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新型温室设施装备技术在现代农业中的推广利用 被引量:2
1
作者 刘曼 《上海农业科技》 2014年第4期28-28,12,共2页
利用现代化的温室设施,在可控条件下进行蔬菜和花卉栽培是摆脱自然灾害、实现周年均衡供应、满足广大人民日益增长的高品质农副产品需求的重要途径,也是衡量达到农业现代化的重要标志之一。现对新型温室设施装备技术在现代农业中的推广... 利用现代化的温室设施,在可控条件下进行蔬菜和花卉栽培是摆脱自然灾害、实现周年均衡供应、满足广大人民日益增长的高品质农副产品需求的重要途径,也是衡量达到农业现代化的重要标志之一。现对新型温室设施装备技术在现代农业中的推广利用情况进行总结,以供参考。 展开更多
关键词 温室设施装备 技术系统 优势
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灵芝孢子粉和孢子油脂溶性成分分析 被引量:4
2
作者 严培兰 杨志空 +2 位作者 唐庆九 张劲松 王金艳 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期76-89,共14页
分析不同破壁时间、不同来源灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉,灵芝孢子油加工原料(破壁孢子粉)、中间体(制粒后孢子粉、一级萃取孢子油、二级萃取孢子油)和孢子油成品,不同来源灵芝孢子油,不同植物油的脂溶性成分含量和指纹图谱。结果表... 分析不同破壁时间、不同来源灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉,灵芝孢子油加工原料(破壁孢子粉)、中间体(制粒后孢子粉、一级萃取孢子油、二级萃取孢子油)和孢子油成品,不同来源灵芝孢子油,不同植物油的脂溶性成分含量和指纹图谱。结果表明:破壁处理能显著增加灵芝孢子粉中脂溶性成分溶出;不同来源灵芝孢子粉中脂溶性成分含量有差异,但不同来源孢子粉指纹图谱相似度均大于0.90,有18个共有峰;灵芝孢子油加工原料(破壁孢子粉)、制粒后孢子粉、一级萃取孢子油、二级萃取孢子油及孢子油成品脂溶性成分指纹图谱有22个共有峰,不考虑孢子油成品中维生素E峰,孢子油加工原料、中间体和孢子油成品间指纹图谱的相似度均大于0.99;不同来源灵芝孢子油指纹图谱峰组成和峰面积有差异,指纹图谱相似度为0.490~0.925,有23个共有峰;植物油的色谱峰与孢子油相比存在较大差异。研究结果为灵芝孢子粉和孢子油的质量控制提供参考。 展开更多
关键词 灵芝孢子粉 灵芝孢子油 脂溶性成分 指纹图谱
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酶法提取灵芝孢子粉胞壁水溶性糖的工艺优化及分子量分布 被引量:3
3
作者 罗童妍 唐庆九 +2 位作者 梁锐 王金艳 严培兰 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期76-84,共9页
为提高灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉胞壁水溶性糖的提取效率,以灵芝孢子粉胞壁残渣为研究对象,用单因素实验、响应面实验优化酶法胞壁水溶性糖提取工艺,并比较酶法和不同物理法处理的灵芝孢子粉胞壁水溶性糖的分子量分布。结果表明:... 为提高灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉胞壁水溶性糖的提取效率,以灵芝孢子粉胞壁残渣为研究对象,用单因素实验、响应面实验优化酶法胞壁水溶性糖提取工艺,并比较酶法和不同物理法处理的灵芝孢子粉胞壁水溶性糖的分子量分布。结果表明:最佳提取工艺为溶壁酶加量2%,酶解时间5 h,料液比1︰10(g︰m L)、温度40℃、pH6.5,在此条件下提取的灵芝孢子粉胞壁水溶性糖含量达到17.86%。分子量分布分析结果表明,酶解后的水溶性糖以低聚糖为主。研究结果可为有效利用和开发灵芝孢子粉提供参考。 展开更多
关键词 灵芝孢子粉 胞壁水溶性糖 溶壁酶 分子量分布
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固态复合酶解法和纳米球磨法处理对猴头菌子实体粉物理和营养特性及体外免疫活性的影响
4
作者 杜敏杰 杨焱 +5 位作者 刘朋 张忠 陈万超 李文 吴迪 金月玲 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期69-80,共12页
以超微粉碎的猴头菌(Hericium erinaceus)子实体粉为对照,分别采用固态复合酶解法、纳米球磨法处理子实体粉,通过对子实体粉微观形貌、消化率、营养功效成分及体外免疫活性分析,探究不同加工处理方式对猴头菌子实体粉物理和营养特性及... 以超微粉碎的猴头菌(Hericium erinaceus)子实体粉为对照,分别采用固态复合酶解法、纳米球磨法处理子实体粉,通过对子实体粉微观形貌、消化率、营养功效成分及体外免疫活性分析,探究不同加工处理方式对猴头菌子实体粉物理和营养特性及体外免疫活性的影响。结果表明:与超微粉碎法处理的子实体粉(PS)相比,纳米球磨法处理的子实体粉(PN)粒径降低,其纤维柱状结构改变;固态复合酶解法处理的子实体粉(PE)表面孔隙度增多,比表面积增加,体外模拟胃肠消化率提高。固态复合酶解法和纳米球磨法处理使猴头菌子实体粉多糖、可溶性固形物、可溶性蛋白、肽等含量均增加。与超微粉碎法所得的粗多糖(PLS)相比,固态复合酶解法所得的粗多糖(PLE)得率(13.42±0.64)%和多糖含量(67.05±0.18)%均增加,纳米球磨法所得的粗多糖(PLN)得率(12.30±0.44)%提高,但多糖含量增加不显著。与PLS相比,PLE的百万级分子量组分(P1)占比减少,PLN的占比增加。PLE显著提高RAW264.7巨噬细胞NO、TNF-α和IL^(-1)β的释放水平,具有较好的体外免疫活性。固态复合酶解法可显著提高猴头菌子实体粉的物理和营养特性及功效特征,为猴头菌应用于健康食品的开发提供参考。 展开更多
关键词 猴头菌 子实体粉 加工方式 品质特性 免疫活性
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基于核酸分子学方法的肉类成分鉴别技术研究进展 被引量:12
5
作者 王金斌 李文 +5 位作者 白蓝 刘华 蒋玮 吴潇 王荣谈 唐雪明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第11期318-327,共10页
近年来,肉类掺假问题频繁发生。基于核酸的分子生物学肉类成分鉴别技术已成为研究热点,其具有灵敏度高、特异性强、检测时间短以及成本低的优点。本文综述了基于核酸分子学的肉类成分种属鉴别技术在肉类掺假检验中的应用,着重于量化各... 近年来,肉类掺假问题频繁发生。基于核酸的分子生物学肉类成分鉴别技术已成为研究热点,其具有灵敏度高、特异性强、检测时间短以及成本低的优点。本文综述了基于核酸分子学的肉类成分种属鉴别技术在肉类掺假检验中的应用,着重于量化各种方法的检测限,并重点对实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和数字PCR技术在动物成分鉴别定量分析的研究现状与前景做介绍。探讨不同来源的靶基因(核DNA和线粒体DNA)在动物成分鉴别中,定性和定量检测灵敏度与特异性的区别。 展开更多
关键词 掺假 肉类制品 数字PCR 物种测定
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青稞慢消化淀粉酶法制备技术研究 被引量:6
6
作者 王金斌 李文 +6 位作者 张倩倩 刘华 白蓝 吴潇 蒋玮 王荣谈 唐雪明 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2160-2170,共11页
为了探索酶解处理对青稞慢消化淀粉含量的影响,以青稞淀粉为原料,分别以α-淀粉酶法,β-淀粉酶法,转葡糖苷酶协同α-淀粉酶处理法,转葡糖苷酶协同β-淀粉酶处理法等4种方法制备慢消化淀粉(SDS),通过单因素试验和正交试验确定最佳制备方... 为了探索酶解处理对青稞慢消化淀粉含量的影响,以青稞淀粉为原料,分别以α-淀粉酶法,β-淀粉酶法,转葡糖苷酶协同α-淀粉酶处理法,转葡糖苷酶协同β-淀粉酶处理法等4种方法制备慢消化淀粉(SDS),通过单因素试验和正交试验确定最佳制备方案。结果表明,制备SDS的最佳方法为转葡糖苷酶协同β-淀粉酶处理法,具体处理条件为:β-淀粉酶的添加量0.032%,转葡糖苷酶的添加量0.192%,酶解时间8h,冷藏回生时间5d,淀粉乳浓度15%。此条件下制备的SDS含量为32.53%。本研究结果为青稞慢性消化淀粉产品的开发利用提供了科学依据和技术参考。 展开更多
关键词 青稞 慢性消化淀粉 制备方法 优化
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QX200微滴式数字PCR方法检测转基因大豆GTS-40-3-2 被引量:12
7
作者 吴潇 吕贝贝 +5 位作者 蒋玮 王金斌 白蓝 武国干 胡为一 唐雪明 《上海农业学报》 CSCD 2018年第1期14-19,共6页
首次以转基因大豆中结构特异性基因为靶基因,建立了特异的微滴式数字QX200 PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,对其进行准确定量。结果表明:ddPCR对结构特异性基因的检出限为2拷贝/(20μL),检测灵敏度高于国标中qPCR方法。微滴式... 首次以转基因大豆中结构特异性基因为靶基因,建立了特异的微滴式数字QX200 PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,对其进行准确定量。结果表明:ddPCR对结构特异性基因的检出限为2拷贝/(20μL),检测灵敏度高于国标中qPCR方法。微滴式数字PCR方法是一种准确、高灵敏度的基因拷贝数的分析方法,操作简便,可在转基因检测领域广泛应用。 展开更多
关键词 QX200微滴式数字PCR 转基因大豆GTS-40-3-2 灵敏度
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同步检测动物源性成分的五重PCR的条件优化和检出限分析 被引量:11
8
作者 王金斌 白蓝 +4 位作者 李文 张俊沛 王荣谈 吴文慧 唐雪明 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期506-514,共9页
为获得肉制品中牛、羊、猪、鸡、鸭等动物源性成分的快速高效多重PCR检测方法,利用5对牛、羊、猪、鸭和鸡等动物源性成分特异性PCR引物(靶基因序列来源于线粒体基因组),对多重PCR反应条件引物浓度和退火温度进行优化,并确定该检测方法... 为获得肉制品中牛、羊、猪、鸡、鸭等动物源性成分的快速高效多重PCR检测方法,利用5对牛、羊、猪、鸭和鸡等动物源性成分特异性PCR引物(靶基因序列来源于线粒体基因组),对多重PCR反应条件引物浓度和退火温度进行优化,并确定该检测方法的检出限。结果表明,多重PCR方法最佳反应条件为鸭源特异性引物浓度0.12μmol·L^(-1),鸡源特异性引物浓度0.16μmol·L^(-1),猪源特异性引物浓度0.16μmol·L^(-1),羊源特异性引物浓度0.32μmol·L^(-1),牛源特异性引物浓度0.24μmol·L^(-1),退火温度58℃,d NTPs浓度0.20 mmol·L^(-1),Taq DNA聚合酶添加量5 U,循环次数40。在最佳反应条件下,所建立的牛、羊、猪、鸡和鸭等5种动物源性成分多重PCR的g DNA检出限达到20 pg。应用优化后的多重PCR方法对21份市售肉制品样本进行盲样检测,验证鉴别方法的准确性,结果与现行标准的检测结果一致,掺假率达42.86%。本试验结果为肉制品中该5种动物源性成分的快速检测提供了技术支撑。 展开更多
关键词 动物源性成分 五重PCR 优化 检出限
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青稞慢性消化淀粉制备条件优化的研究 被引量:6
9
作者 张倩倩 王金斌 +9 位作者 吴潇 蒋玮 李鹏 刘华 吕贝贝 武国干 白蓝 常晓蕾 王荣谈 唐雪明 《上海农业学报》 CSCD 2015年第5期6-12,共7页
以青稞淀粉为原料,分别以普鲁兰酶法、α-淀粉酶法、β-淀粉酶法制备慢消化淀粉(Slow digestion of starch,SDS),并优化SDS的制备条件。通过正交实验确定制备SDS的最佳方案为普鲁兰酶法,制备得到的SDS含量为32.72%。普鲁兰酶法处理条件... 以青稞淀粉为原料,分别以普鲁兰酶法、α-淀粉酶法、β-淀粉酶法制备慢消化淀粉(Slow digestion of starch,SDS),并优化SDS的制备条件。通过正交实验确定制备SDS的最佳方案为普鲁兰酶法,制备得到的SDS含量为32.72%。普鲁兰酶法处理条件为:普鲁兰酶的添加量200 U,酶解时间10 h,冷藏回生时间1 d,淀粉浓度15%。 展开更多
关键词 青稞 慢性消化淀粉 制备 优化
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环介导等温扩增技术在鸭源成分检测中的研究 被引量:3
10
作者 吴潇 吕贝贝 +6 位作者 蒋玮 白蓝 武国干 王金斌 王荣谈 潘爱虎 唐雪明 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期126-133,共8页
为了建立肉产品中鸭源成分的现场快速检测技术,根据动物种间特异性的原则,筛选出一对品种特异的PCR引物,在此引物扩增片段的基础上,设计了环介导等温扩增(LAMP)引物序列,能特异检测鸭源成分。通过条件优化实验,发现在25μL的扩增体系中... 为了建立肉产品中鸭源成分的现场快速检测技术,根据动物种间特异性的原则,筛选出一对品种特异的PCR引物,在此引物扩增片段的基础上,设计了环介导等温扩增(LAMP)引物序列,能特异检测鸭源成分。通过条件优化实验,发现在25μL的扩增体系中,内外引物浓度比为1∶4,温度为63.5℃,MgSO4添加量为5mM/μL,dNTPs添加量为1.75mM/μL,BstDNA聚合酶添加量为0.4U/μL,甜菜碱添加量为0.25μmol/μL,LAMP反应时间为30min时,LAMP检测体系检测效果达到最优,鸭肉DNA的检测灵敏度可达到10pg/μL。对牛羊肉中鸭源成分比例的检测灵敏度为0.0001%。应用该方法对上海市闵行区市场中的牛羊肉产品进行抽样检测,结果从21份样品中成功检测出5份含鸭源成分的混合肉。本研究建立的LAMP检测方法灵敏、快捷,可以实现鸭源成分的现场速测,为肉制品市场的监管提供了一种新方法。 展开更多
关键词 牛、羊肉制品 等温扩增技术 环介导等温扩增技术 可视化检测
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猪流行性腹泻疫苗研究和开发进展 被引量:2
11
作者 李春华 王荣谈 +4 位作者 何锡忠 丁卫星 蒋凤英 倪建平 赵本进 《上海农业学报》 CSCD 2017年第5期139-144,共6页
猪流行性腹泻是危害养猪业的重要疫病之一,在世界各地的养猪业中均有暴发流行,近年来在全国猪场出现了大范围的暴发。为了降低猪流行性腹泻造成的巨大损失,世界各国的猪病研究人员一直致力于研发安全、高效的PED疫苗。通过从灭活疫苗、... 猪流行性腹泻是危害养猪业的重要疫病之一,在世界各地的养猪业中均有暴发流行,近年来在全国猪场出现了大范围的暴发。为了降低猪流行性腹泻造成的巨大损失,世界各国的猪病研究人员一直致力于研发安全、高效的PED疫苗。通过从灭活疫苗、活疫苗和基因工程疫苗等方面对国内外的PED疫苗研究和开发进展进行综述,汇总了国内外近几年来审批许可的PED商品化新疫苗和正在进行临床试验的PED疫苗,以及疫苗研发的新技术,为开发更好的PED疫苗产品提供参考和前景展望。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 灭活疫苗 活疫苗 基因工程疫苗
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繁殖候选基因Lhx8的真核表达和定位分析 被引量:1
12
作者 王晶晶 潘雪男 +2 位作者 何晓芳 毛慧 王荣谈 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期5-8,共4页
从猪卵巢组织中提取总RNA为模板,采用RT-PCR方法获得了猪Lhx8基因的完整开放阅读框,将该基因克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,经酶切分析和测序证明成功构建了真核重组质粒pEGFP-N1-Lhx8。将成功构建的pEGFP-N1-Lhx8分别转染猪肾细胞PK-1... 从猪卵巢组织中提取总RNA为模板,采用RT-PCR方法获得了猪Lhx8基因的完整开放阅读框,将该基因克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,经酶切分析和测序证明成功构建了真核重组质粒pEGFP-N1-Lhx8。将成功构建的pEGFP-N1-Lhx8分别转染猪肾细胞PK-15和猪颗粒细胞(GCs),转染后48 h,通过荧光显微镜观察对猪Lhx8基因在这2种细胞中的定位特点进行分析。结果显示:绿色荧光呈点状分布,根据绿色荧光分布的位置,推测Lhx8蛋白很可能位于细胞核中。 展开更多
关键词 Lhx8基因 真核表达 定位分析
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华东地区猪病毒性腹泻感染状况调查 被引量:5
13
作者 张佩华 倪建平 +4 位作者 缪德年 何锡忠 张春玲 蒋凤英 李春华 《上海畜牧兽医通讯》 2017年第2期25-27,共3页
为了解华东地区猪病毒性腹泻的感染状况,我们应用RT-PCR方法对2013~2014年间采集的156份临床样品(粪便、肠内容物、肠系膜淋巴结等)进行了病原学检测。检测结果显示:PEDV阳性样品98份,阳性率为62.8%;TGEV阳性样品14份,阳性率为9.0%;PoR... 为了解华东地区猪病毒性腹泻的感染状况,我们应用RT-PCR方法对2013~2014年间采集的156份临床样品(粪便、肠内容物、肠系膜淋巴结等)进行了病原学检测。检测结果显示:PEDV阳性样品98份,阳性率为62.8%;TGEV阳性样品14份,阳性率为9.0%;PoRV阳性样品6份,阳性率为3.8%,上海、江苏、浙江、安徽、江西和山东等地区腹泻猪群中均存在PEDV感染,部分猪场还存在TGEV和PoRV感染,但PEDV的感染率最高,这与国内的其他研究报道较为一致。本调查掌握了我国华东地区猪病毒性腹泻的感染状况,为猪病毒性腹泻病的防控提供了参考依据。 展开更多
关键词 猪病毒性腹泻 猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪轮状病毒 感染状况
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高产高含油量甘蓝型油菜双低杂交种‘向农08’的选育
14
作者 蒋美艳 孙超才 +4 位作者 王伟荣 李延莉 杨立勇 周熙荣 刘曼 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第6期54-56,共3页
‘向农08'是通过三系杂交方法和小孢子培养技术选育而成的高产、高含油量甘蓝型油菜新品种,其芥酸含量0.59%,硫苷含量19.9μmol/g,种子含油率49.06%。在上海市油菜区域试验中平均产量2 836.80 kg/hm^2,较对照‘沪油21'增产9.86%... ‘向农08'是通过三系杂交方法和小孢子培养技术选育而成的高产、高含油量甘蓝型油菜新品种,其芥酸含量0.59%,硫苷含量19.9μmol/g,种子含油率49.06%。在上海市油菜区域试验中平均产量2 836.80 kg/hm^2,较对照‘沪油21'增产9.86%;产油量1 314.15 kg/hm^2,比对照‘沪油21'增产9.68%。在2013年上海市油菜生产试验中,平均产量2 508.40 kg/hm^2,比对照‘沪油21'减产3.45%;产油量1 170.15 kg/hm^2,比对照‘沪油21'减产6.85%。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 杂交种 选育 高产 含油量 '向农08
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转基因产品检测方法研究进展 被引量:12
15
作者 王荣谈 张建中 +2 位作者 刘冬儿 张大兵 杨立桃 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期116-119,共4页
综述了国内外转基因生物(Genetically modified organisms,GMOs)及其产品检测方法的研究进展,并重点介绍了目前广泛应用的一些检测方法。
关键词 转基因生物 核酸 蛋白质 检测方法
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猴头菌β-葡聚糖-壳聚糖纳米颗粒制备及其体外生物活性 被引量:5
16
作者 葛梅丽 吴迪 +3 位作者 李文 陈万超 张忠 杨焱 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2023年第1期79-90,共12页
采用自组装的方法通过静电相互作用制备硫酸化猴头菌β-葡聚糖-壳聚糖纳米颗粒(sulfated Hericiumerinaceusβ-glucan-chitosan nanoparticles,DS-CSNPs),以粒径为指标,通过单因素实验和响应面分析,优化DS-CS NPs的制备工艺,并评价最佳... 采用自组装的方法通过静电相互作用制备硫酸化猴头菌β-葡聚糖-壳聚糖纳米颗粒(sulfated Hericiumerinaceusβ-glucan-chitosan nanoparticles,DS-CSNPs),以粒径为指标,通过单因素实验和响应面分析,优化DS-CS NPs的制备工艺,并评价最佳工艺条件下纳米颗粒的粒径、形态以及体外生物活性。结果表明,纳米颗粒最佳制备工艺参数:硫酸化猴头菌β-葡聚糖(sulfated H.erinaceusβ-glucan,DS)质量浓度为1mg·mL^(-1),搅拌速度为800 r·min^(-1),壳聚糖(chitosan,CS)初始pH为4,DS-CS NPs的粒径为128.41 nm,且分布较窄。与DS相比,DS-CS NPs体外抗氧化活性显著提高,同时,DS-CS NPs对LPS诱导的巨噬细胞RAW 264.7产生NO以及促炎因子TNF-α分泌有显著抑制作用,并呈浓度依赖性。硫酸化猴头菌β-葡聚糖-壳聚糖纳米颗粒具有体外抗氧化和抗炎活性。 展开更多
关键词 硫酸化猴头菌β-葡聚糖 纳米颗粒 壳聚糖 抗氧化活性 抗炎活性
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香菇中污染真菌的分离与鉴定 被引量:6
17
作者 冯智红 严培兰 +3 位作者 王建华 韩铮 邢增涛 武爱波 《上海农业学报》 CSCD 2015年第4期50-53,共4页
从上海及周边地区的香菇子实体和培养料中分离污染真菌,并进行形态学观察和分子生物学鉴定。提取菌株基因组DNA,利用真菌通用引物ITS1和ITS4扩增菌株rDNA ITS区序列,测序后在数据库中进行比对分析,并利用软件:MEGA5构建菌株分子系统发... 从上海及周边地区的香菇子实体和培养料中分离污染真菌,并进行形态学观察和分子生物学鉴定。提取菌株基因组DNA,利用真菌通用引物ITS1和ITS4扩增菌株rDNA ITS区序列,测序后在数据库中进行比对分析,并利用软件:MEGA5构建菌株分子系统发育树。结果表明:香菇栽培到储藏过程中主要污染真菌有木霉属(Trichoderma)、曲霉属(Aspergillus)、附球菌属(Epicoccum)、镰孢属(Fusarium)、青霉属(Penicillium)和节菱孢属(Arthrinium)等。 展开更多
关键词 香菇 污染真菌 形态观察 分子鉴定
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重组猪γ-干扰素的表达与纯化 被引量:1
18
作者 王荣谈 郭佳宏 +4 位作者 彭丽英 廖学文 姚慧娟 樊生超 缪德年 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期10-14,共5页
将猪γ-干扰素(Porcine interferon-γ,PolFN-γ)成熟蛋白的基因合成克隆到表达载体pET30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达。对重组菌的表达条件进行优化,发现在IPTG体积浓度为0.04mmol/L、诱导时间为3h、诱导温度为30℃的条... 将猪γ-干扰素(Porcine interferon-γ,PolFN-γ)成熟蛋白的基因合成克隆到表达载体pET30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达。对重组菌的表达条件进行优化,发现在IPTG体积浓度为0.04mmol/L、诱导时间为3h、诱导温度为30℃的条件下,目的蛋白大部分以可溶形式表达。重组蛋白经亲和柱纯化后的纯度大于90%,表达量达40mg/L菌液。重组蛋白在MDBK细胞上抗滤泡性口炎病毒的活性为2×10^6U/mg。 展开更多
关键词 猪Γ-干扰素 可溶性表达 纯化
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猪流行性腹泻病毒检测与S蛋白中和抗原表位基因分析 被引量:1
19
作者 丁卫星 王荣谈 +2 位作者 郭佳宏 廖学文 缪德年 《上海农业学报》 CSCD 2016年第1期19-22,共4页
应用RT-PCR对2015年江苏、安徽、山东9个猪场的腹泻样品(新鲜粪便、肠道组织等)进行PEDV和TGV检测,并对检测到的一株PEDV(CHNJPK2015)的纤突蛋白中和抗原表位基因进行克隆测序和遗传进化分析。结果表明:9个猪场PEDV检测阳性率为100%,PED... 应用RT-PCR对2015年江苏、安徽、山东9个猪场的腹泻样品(新鲜粪便、肠道组织等)进行PEDV和TGV检测,并对检测到的一株PEDV(CHNJPK2015)的纤突蛋白中和抗原表位基因进行克隆测序和遗传进化分析。结果表明:9个猪场PEDV检测阳性率为100%,PEDV个体阳性率为63.89%,TGEV均未检出,说明本次流行的仔猪腹泻病主要是由PEDV感染引起的。所测毒株与参考毒株可分为3个群,CHNJPK2015株与AVCT12、Br1/87、CHM2013、LZC、SM98等毒株的S蛋白中和抗原表位基因的遗传距离较近,核苷酸序列同源性达99.5%—99.8%,处于同一群;而与2014年中国各地分离的CH/GDZQ/2014、FJ-FQ 2014、FJ-ZP 2014、PEDV-LY、PEDV-WS、PZ1406、SC1402、SH1404和疫苗株CV777序列的遗传距离较远,核苷酸序列同源性为92.9%—96.2%,处于不同的群。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 S蛋白 进化树
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鸡新城疫疫苗预防鸽Ⅰ型副黏病毒病的免疫研究 被引量:7
20
作者 丁卫星 王荣谈 +1 位作者 孙明昌 陈庆汉 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期72-74,共3页
利用鸡新城疫、鸽I型副黏病毒病可交叉免疫的共性,采用成熟的鸡新城疫灭活油佐剂疫苗连续免疫鸽,使鸽产生有效的保护抗体到8log2以上,使得种鸽持有较高的母源抗体保护乳鸽,并通过免疫试验提出了免疫程序推荐应用于鸽群。
关键词 鸽病 副黏病毒 新城疫疫苗 母源抗体 免疫程序
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