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嗜水气单胞菌BYKAH2008AC株外膜蛋白和溶血素双基因的融合表达及免疫原性分析
被引量：
4
1
作者
刘玮
倪穗
+2 位作者
邱军强
乐韵
王建平
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2012年第4期17-21,共5页
嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的外膜蛋白基因(OmpTS)和溶血素基因(Hly)是其重要的保护性抗原。根据Genbank已发表的两个基因的序列设计引物,扩增其去除信号肽部分的基因片段,再将二者通过柔性片段融合,定向插入到质粒pET32a中构...
嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的外膜蛋白基因(OmpTS)和溶血素基因(Hly)是其重要的保护性抗原。根据Genbank已发表的两个基因的序列设计引物,扩增其去除信号肽部分的基因片段,再将二者通过柔性片段融合,定向插入到质粒pET32a中构建重组融合表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得与预期大小108 kD相吻合的融合蛋白条带。用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备兔抗血清。ELISA和Western Blot检测该抗体效价为1∶4000以上,且该重组蛋白与抗OmpTS兔血清和抗Hly兔血清都呈阳性反应,表明该融合蛋白保留了外膜蛋白和溶血素的免疫原性,可作为基因工程亚单位疫苗的候选成分。
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关键词
嗜水气单胞菌
外膜蛋白
溶血素基因
融合表达
免疫原性
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职称材料
题名
嗜水气单胞菌BYKAH2008AC株外膜蛋白和溶血素双基因的融合表达及免疫原性分析
被引量：
4
1
作者
刘玮
倪穗
邱军强
乐韵
王建平
机构
宁波
大学
生命
学院
上海海洋大学水产与生命科学学院国家水生动物病原库
宁波市
海洋
与渔业执法支队
宁波市
海洋
与渔业研究院
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2012年第4期17-21,共5页
基金
现代农业产业技术体系建设专项资金(项目编号:nycytx-49-17)
宁波市重大科技攻关项目"淡水养殖鱼类对重大灾害的应激响应及防灾减灾技术"(项目编号2008C10022号)
文摘
嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的外膜蛋白基因(OmpTS)和溶血素基因(Hly)是其重要的保护性抗原。根据Genbank已发表的两个基因的序列设计引物,扩增其去除信号肽部分的基因片段,再将二者通过柔性片段融合,定向插入到质粒pET32a中构建重组融合表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得与预期大小108 kD相吻合的融合蛋白条带。用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备兔抗血清。ELISA和Western Blot检测该抗体效价为1∶4000以上,且该重组蛋白与抗OmpTS兔血清和抗Hly兔血清都呈阳性反应,表明该融合蛋白保留了外膜蛋白和溶血素的免疫原性,可作为基因工程亚单位疫苗的候选成分。
关键词
嗜水气单胞菌
外膜蛋白
溶血素基因
融合表达
免疫原性
Keywords
Aeromonas hydrophila
outer membrane protein
hemolysin gene
fusion expression
immunogenicity
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
嗜水气单胞菌BYKAH2008AC株外膜蛋白和溶血素双基因的融合表达及免疫原性分析
刘玮
倪穗
邱军强
乐韵
王建平
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2012
4
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