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基于核酸适体功能化纳米磁珠的石斑鱼虹彩病毒检测
1
作者
夏悦婷
余庆
+10 位作者
黄琳
黄静
覃向谋
赵明明
韦冬冬
王浩
凌飞
常彦磊
许伟江
刘明珠
李鹏飞
《广东海洋大学学报》
北大核心
2025年第3期21-27,共7页
【目的】开发一种基于核酸适体功能化纳米磁珠的石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)快速检测新方法,以解决传统病毒检测技术操作繁琐、耗时长、设备依赖性强等问题。【方法】将前期筛选获得的可特异性识别SGIV的核酸适...
【目的】开发一种基于核酸适体功能化纳米磁珠的石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)快速检测新方法,以解决传统病毒检测技术操作繁琐、耗时长、设备依赖性强等问题。【方法】将前期筛选获得的可特异性识别SGIV的核酸适配体进行优化及修饰,获得核酸适配体Q5c,并将其与纳米磁珠进行偶联,构建核酸适配体偶联磁性纳米探针(Aptamer magnetic nanobeads,Q5c-MNPs)。利用多病原交叉实验验证Q5c-MNPs对SGIV感染细胞的特异性靶向识别,采用流式细胞术、荧光定量PCR等技术系统评价探针的稳定性、灵敏度等关键性能指标。【结果】Q5c-MNPs可特异性识别SGIV感染的细胞,并在500 nmol/L浓度下孵育时间短至1 min,在4~37℃温度范围内检测性能稳定。检测灵敏度达1×10^(3)个/mL,与RT-qPCR检测灵敏度相当。而本方法检测周期仅需2h,较常规分子检测方法效率显著提升。【结论】成功构建Q5c-MNPs检测体系,该体系兼具高特异性、高灵敏度和快速响应等优势,为开发水产病害现场快速检测试剂盒奠定重要技术基础。
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关键词
石斑鱼虹彩病毒
核酸适配体Q5c
纳米磁珠
快速检测
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职称材料
题名
基于核酸适体功能化纳米磁珠的石斑鱼虹彩病毒检测
1
作者
夏悦婷
余庆
黄琳
黄静
覃向谋
赵明明
韦冬冬
王浩
凌飞
常彦磊
许伟江
刘明珠
李鹏飞
机构
广西科学院广西
海洋
科学院/广西
水产
生物技术与现代生态养殖
重点
实验室
/广西渔业重大疫病防控与高效健康养殖产业技术工程研究中心
上海海洋大学国家水生动物病原库/农业农村部淡水水产种质资源重点实验室
西北农林科技
大学
动物
科技学院
广州双螺旋基因技术有限公司
广东
海洋大学
北部湾
大学
海洋
学院/广西北部湾
海洋
生物多样性养护
重点
实验室
出处
《广东海洋大学学报》
北大核心
2025年第3期21-27,共7页
基金
广西自然科学基金(AD23026331,2022JJA130281,2024GXNSFFA010017)
广西科技项目(GUIKEFA[2024]102-2)
+1 种基金
国家现代农业产业技术体系广西创新团队建设项目(nycytxgxcxtd-2021-08-02)
来宾科技计划(Laikechan 241519)。
文摘
【目的】开发一种基于核酸适体功能化纳米磁珠的石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)快速检测新方法,以解决传统病毒检测技术操作繁琐、耗时长、设备依赖性强等问题。【方法】将前期筛选获得的可特异性识别SGIV的核酸适配体进行优化及修饰,获得核酸适配体Q5c,并将其与纳米磁珠进行偶联,构建核酸适配体偶联磁性纳米探针(Aptamer magnetic nanobeads,Q5c-MNPs)。利用多病原交叉实验验证Q5c-MNPs对SGIV感染细胞的特异性靶向识别,采用流式细胞术、荧光定量PCR等技术系统评价探针的稳定性、灵敏度等关键性能指标。【结果】Q5c-MNPs可特异性识别SGIV感染的细胞,并在500 nmol/L浓度下孵育时间短至1 min,在4~37℃温度范围内检测性能稳定。检测灵敏度达1×10^(3)个/mL,与RT-qPCR检测灵敏度相当。而本方法检测周期仅需2h,较常规分子检测方法效率显著提升。【结论】成功构建Q5c-MNPs检测体系,该体系兼具高特异性、高灵敏度和快速响应等优势,为开发水产病害现场快速检测试剂盒奠定重要技术基础。
关键词
石斑鱼虹彩病毒
核酸适配体Q5c
纳米磁珠
快速检测
Keywords
Singapore grouper iridovirus
aptamer
magnetic nanoparticles
rapid detection technique
分类号
S941.41 [农业科学—水产养殖]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
基于核酸适体功能化纳米磁珠的石斑鱼虹彩病毒检测
夏悦婷
余庆
黄琳
黄静
覃向谋
赵明明
韦冬冬
王浩
凌飞
常彦磊
许伟江
刘明珠
李鹏飞
《广东海洋大学学报》
北大核心
2025
0
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