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利用噬菌体展示技术筛选草鱼呼肠孤病毒VP39蛋白相互作用多肽被引量：1: 1; 作者龙晨徐宁 +1 位作者谢雅晴吕利群《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期859-865,共7页; VP39是草鱼呼肠孤Ⅲ型病毒(GCRV GenotypeⅢ,GCRV-Ⅲ)S9基因编码的蛋白,为研究VP39蛋白在GCRV-Ⅲ感染草鱼细胞过程中行使的生物学功能,将克隆VP39基因序列并构建原核表达载体pET32a-VP39,通过原核表达得到VP39-HIS融合蛋白;利用VP39蛋... 展开更多; 关键词 Ⅲ型草鱼呼肠孤病毒 VP39蛋白多克隆抗体噬菌体展示技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

转录因子NF-κB对鲤疱疹病毒Ⅱ型基因启动子的表达调控研究: 2; 作者谢雅晴龙晨吕利群《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期88-93,共6页; 为深入探究NF-κB信号通路对CyHV-2感染过程的影响,在CyHV-2感染的GiCF细胞中加入NF-κB激动剂,通过RT-qPCR和Western Blot分析在感染24、72、96 h后CyHV-2编码基因在转录和翻译水平的表达情况。结果显示,在加入NF-κB激动剂后的72、96 ... 展开更多; 关键词鲤疱疹病毒Ⅱ型 NF-ΚB 启动子转录调控双荧光素酶报告基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF66截短蛋白多克隆抗体的制备及互作多肽筛选被引量：3: 3; 作者张小米阙顺政 +2 位作者龙晨王浩吕利群《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期796-802,共7页; 为深入探究鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)在感染过程中的生物学功能,构建了ORF66截短基因的原核表达质粒pET28a-tORF66,转化至BL21感受态细胞后利用IPTG(Isopropyl-beta-Dthiogalactopyranoside)16℃诱导蛋白表达,经... 展开更多; 关键词鲤疱疹病毒Ⅱ型 ORF66截短蛋白原核表达多克隆抗体噬菌体展示; 在线阅读下载PDF 职称材料

肾上腺素对稀有鮈鲫热休克反应及GCRV-Ⅱ敏感性的影响: 4; 作者刘林怡倪秦伟吕利群《水生生物学报》 2025年第9期48-54,共7页; 为了探究肾上腺素对Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV-Ⅱ)感染的影响,实验以稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)感染GCRV-JX02为研究模型,利用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(Wes-tern Blot,WB)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等方... 展开更多; 关键词草鱼呼肠孤病毒肾上腺素 HSP70 稀有鮈鲫; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用噬菌体展示技术筛选草鱼呼肠孤病毒VP39蛋白相互作用多肽被引量：1: 1; 作者龙晨徐宁谢雅晴吕利群; 机构上海海洋大学国家水生动物病原库上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源与利用重点实验室; 出处《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期859-865,共7页; 基金国家现代农业产业技术体系项目(CARS-45)资助。; 文摘 VP39是草鱼呼肠孤Ⅲ型病毒(GCRV GenotypeⅢ,GCRV-Ⅲ)S9基因编码的蛋白,为研究VP39蛋白在GCRV-Ⅲ感染草鱼细胞过程中行使的生物学功能,将克隆VP39基因序列并构建原核表达载体pET32a-VP39,通过原核表达得到VP39-HIS融合蛋白;利用VP39蛋白溶液免疫小鼠,制备鼠抗VP39多克隆抗体,通过Western Blot对抗体进行评估;利用制备的多克隆抗体探究GCRV-Ⅲ感染细胞过程中VP39蛋白表达动力学;利用噬菌体展示技术筛选与VP39蛋白特异性结合的多肽序列并进行分析。SDS-PAGE电泳结果显示,VP39-HIS融合蛋白可良好溶于PBS中,蛋白大小约为39 kD;Western Blot检测表明实验所制备的VP39多克隆抗体在1﹕10000稀释比例下,既能识别原核表达的VP39-HIS融合蛋白,也能识别GCRV-Ⅲ感染CIK细胞后表达的VP39蛋白,具有良好的效价与特异性;在病毒侵染过程中,VP39前期表达量较少,在中后期大量表达;噬菌体展示技术筛选出两条多肽与VP39蛋白有高度亲和性,经过在NCBI上比对后发现草鱼基因组中有7个基因与筛出的多肽具有同源性,表明其可能与VP39存在相互作用。研究制备了鼠抗VP39多克隆抗体,为GCRV-Ⅲ的免疫学检测方法提供了新的路径;结合多肽的筛选也为VP39在GCRV-Ⅲ侵染过程中参与的生物学功能研究奠定了基础。; 关键词 Ⅲ型草鱼呼肠孤病毒 VP39蛋白多克隆抗体噬菌体展示技术; Keywords Grass carp reovirus typeⅢ VP39 protein Polyclonal antibody Phage display technology; 分类号 S943 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转录因子NF-κB对鲤疱疹病毒Ⅱ型基因启动子的表达调控研究: 2; 作者谢雅晴龙晨吕利群; 机构上海海洋大学国家水生动物病原库上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源与利用重点实验室; 出处《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期88-93,共6页; 基金国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-45-19)。; 文摘为深入探究NF-κB信号通路对CyHV-2感染过程的影响,在CyHV-2感染的GiCF细胞中加入NF-κB激动剂,通过RT-qPCR和Western Blot分析在感染24、72、96 h后CyHV-2编码基因在转录和翻译水平的表达情况。结果显示,在加入NF-κB激动剂后的72、96 h,CyHV-2编码基因转录和翻译水平均明显高于对照组,提示NF-κB促进CyHV-2编码基因的转录及翻译。为进一步阐明NF-κB如何影响CyHV-2的转录和翻译,利用生物信息学软件预测CyHV-2部分编码基因的启动子序列中和NF-κB的结合位点,采用双荧光素酶报告基因实验分析NF-κB对启动子活性的影响。结果表明,NF-κB过表达提高了病毒基因启动子活性,提示NF-κB可以通过促进CyHV-2基因的启动子活性来增强病毒复制水平。研究结果有助深入探究CyHV-2基因的表达翻译机制,也为开发基于NF-κB信号通路靶点的新的抗病毒抑制剂提供理论支撑。; 关键词鲤疱疹病毒Ⅱ型 NF-ΚB 启动子转录调控双荧光素酶报告基因; Keywords CyHV-2 NF-κB promoter transcriptional regulation dual luciferase reporter gene; 分类号 Q753 [生物学—分子生物学] S941.41 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF66截短蛋白多克隆抗体的制备及互作多肽筛选被引量：3: 3; 作者张小米阙顺政龙晨王浩吕利群; 机构上海海洋大学国家水生动物病原库上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源与利用重点实验室; 出处《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期796-802,共7页; 基金国家现代农业产业技术体系项目(CARS-45-16)资助。; 文摘为深入探究鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)在感染过程中的生物学功能,构建了ORF66截短基因的原核表达质粒pET28a-tORF66,转化至BL21感受态细胞后利用IPTG(Isopropyl-beta-Dthiogalactopyranoside)16℃诱导蛋白表达,经尿素溶解透析获得溶解的重组蛋白后免疫6周龄小鼠,制备鼠抗tORF66多克隆抗体。将纯化后重组蛋白进行噬菌体展示以此来筛选互作蛋白。经Western Blot检测显示,抗体能够识别感染鲫鳍条细胞系GICF细胞中的鲤疱疹病毒Ⅱ型,效价较高,特异性较好。噬菌体淘选结果通过生物信息学分析显示,得到一条出现频次最高的多肽N′-LHLHQNRMSLSR-C′。该多肽与金鱼基因组中的3个基因有较高的同源性,推断其可能与rORF66重组蛋白相互作用。这将为深入探究ORF66在CyHV-2病毒感染过程中的生物学功能、开发抗CyHV-2病毒新药物及寻找潜在的药物靶点提供新依据。; 关键词鲤疱疹病毒Ⅱ型 ORF66截短蛋白原核表达多克隆抗体噬菌体展示; Keywords CyHV-2 ORF66 truncated protein Polyclonal antibody Prokaryotic expression Phage display; 分类号 S941.4 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肾上腺素对稀有鮈鲫热休克反应及GCRV-Ⅱ敏感性的影响: 4; 作者刘林怡倪秦伟吕利群; 机构上海海洋大学国家水生动物病原库; 出处《水生生物学报》 2025年第9期48-54,共7页; 基金国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-45-16)资助。; 文摘为了探究肾上腺素对Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV-Ⅱ)感染的影响,实验以稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)感染GCRV-JX02为研究模型,利用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(Wes-tern Blot,WB)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法研究肾上腺素在稀有鮈热休克反应与GCRV-JX02感染宿主中的作用。结果显示,稀有鮈鲫腹腔注射浓度为5μg/mL肾上腺素后,体内肾上腺素呈先上升后下降的趋势,并在30min时浓度最高。注射肾上腺素后0、15min、30min、45min和60min收集稀有鮈鲫的肝脏、肠道、脑和肌肉组织,通过RT-qPCR与WB检测HSP70的表达水平,发现肝脏与脑组织中HSP70的表达随时间上升,在45min时达到最高水平;WB检测肝脏与脑组织中的HSP70在转录翻译水平随时间上升。将肾上腺素(5μg/mL)与GCRV-JX02病毒(2.1×10^(8)个/mL)液混合腹腔注射后,稀有鮈鲫死亡率明显上升。实验结果表明注射肾上腺素能够引起稀有鮈鲫的热休克反应,导致HSP70表达显著上调,并增强了GCRV-JX02感染稀有鮈鲫的能力。研究建立了稀有鮈鲫腹腔注射肾上腺素的应激模型,初步阐明了肾上腺素促进GCRV-Ⅱ感染宿主的反应机制,有助于了解应激反应在草鱼出血病流行中的作用,且为草鱼呼肠孤病毒的防控提供了新思路与理论依据。; 关键词草鱼呼肠孤病毒肾上腺素 HSP70 稀有鮈鲫; Keywords Grass carp eutherian virus Epinephrine HSP70 Gobiocypris rarus; 分类号 Q344.1 [生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	利用噬菌体展示技术筛选草鱼呼肠孤病毒VP39蛋白相互作用多肽	龙晨徐宁谢雅晴吕利群	《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	转录因子NF-κB对鲤疱疹病毒Ⅱ型基因启动子的表达调控研究	谢雅晴龙晨吕利群	《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF66截短蛋白多克隆抗体的制备及互作多肽筛选	张小米阙顺政龙晨王浩吕利群	《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	肾上腺素对稀有鮈鲫热休克反应及GCRV-Ⅱ敏感性的影响	刘林怡倪秦伟吕利群	《水生生物学报》	2025		在线阅读下载PDF 职称材料