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生物技术在食品安全检测中的最新应用 被引量:13
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作者 李浩林 刘箐 +7 位作者 杨珏萍 刘程 韩舜愈 梁玮 陈艳 方水琴 郭慧琴 朱小青 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期163-168,共6页
食品安全事故的频繁发生,使得检测技术成为食品科学研究的热点。基于生物技术的快速检测方法正越来越广泛的应用于食品安全检测,同时,由生物、化学、物理等学科交叉衍生而来的新技术,也已逐步应用于食品安全检测领域。该文介绍了FTA-PC... 食品安全事故的频繁发生,使得检测技术成为食品科学研究的热点。基于生物技术的快速检测方法正越来越广泛的应用于食品安全检测,同时,由生物、化学、物理等学科交叉衍生而来的新技术,也已逐步应用于食品安全检测领域。该文介绍了FTA-PCR、环介导等温扩增、核酸探针、基质分子印迹、生物芯片、免疫层析、生物传感器等新技术,并对这些新技术的优缺点及运用前景,予以系统的分析和介绍。 展开更多
关键词 生物技术 食品安全 检测
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乳制品中有害成分检测技术研究进展 被引量:6
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作者 刘程 李浩林 +6 位作者 刘箐 梁玮 韩舜愈 杨玉萍 方水琴 郭慧琴 陈艳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第21期425-430,共6页
乳制品安全是我国近年来食品安全的焦点,检测新技术运用滞后,部分标准缺乏,是乳制品安全事件屡禁不绝的原因之一。本文对乳制品中各种污染源及检测技术进行分析和总结,重点介绍色谱、分析化学、免疫学、分子生物学、环介导等温扩增、生... 乳制品安全是我国近年来食品安全的焦点,检测新技术运用滞后,部分标准缺乏,是乳制品安全事件屡禁不绝的原因之一。本文对乳制品中各种污染源及检测技术进行分析和总结,重点介绍色谱、分析化学、免疫学、分子生物学、环介导等温扩增、生物芯片等技术,并通过比较分析各种技术的优缺点,对乳制品未来检测技术进行综合分析,以期为快速、准确地检测乳品中有害成分及检测技术的发展提供一定的参考。 展开更多
关键词 乳制品 有害成分 检测技术 研究进展
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抗瓜类细菌性果斑病菌单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量:5
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作者 曾海娟 王广彬 +6 位作者 郭慧琴 邱实 李建武 翟绪昭 丁承超 宋春美 刘箐 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第23期228-232,共5页
以瓜类细菌性果斑病菌燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)野生型菌株SD01免疫BALB/c小鼠,间接酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法筛选获得4株稳定分泌抗SD01菌株的单克隆杂交瘤细胞株6F... 以瓜类细菌性果斑病菌燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)野生型菌株SD01免疫BALB/c小鼠,间接酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法筛选获得4株稳定分泌抗SD01菌株的单克隆杂交瘤细胞株6F、6D、7E、4F,腹水抗体效价分别为1∶102 400、1∶102 400、1∶25 600、1∶51 200。采用饱和硫酸铵沉淀及Protein-G亲和层析法纯化腹水,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)显示纯化后的单克隆抗体(m Ab)纯度较高,纯化后单克隆抗体(2 mg/m L)效价分别为1∶12 800、1∶6 400、1∶3 200、1∶6 400,亚型鉴定结果表明4种单克隆抗体均为Ig G2 a。间接ELISA结果表明,4种单克隆抗体对8种果斑病菌结合能力不同:6F可以结合6种,6D、4F可以结合8种,7E可以结合5种。与3种非Aac近源种植物病原菌交叉反应情况为:6F、4F与2种非Aac近源种植物病原菌存在交叉反应,6D、7E与3种非Aac近源种植物病原菌均无交叉反应。 展开更多
关键词 细菌性果斑病菌 单克隆抗体 制备 特性鉴定
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出血性大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体制备及免疫胶体金试纸条的研制 被引量:7
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作者 刘程 刘芳 +5 位作者 刘箐 韩舜愈 董庆利 杨标 胡津津 马丽萍 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期199-205,共7页
将骨髓瘤细胞SP2/0与出血性大肠杆菌O157∶H7免疫小鼠得到的脾细胞融合,通过筛选得到3株稳定分泌抗出血性大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体的杂交瘤细胞株D3、E7、B9,D3和B9亚类为IgG1,E7亚类为IgG2a,轻链亚型均为κ。交叉反应结果显示这3株... 将骨髓瘤细胞SP2/0与出血性大肠杆菌O157∶H7免疫小鼠得到的脾细胞融合,通过筛选得到3株稳定分泌抗出血性大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体的杂交瘤细胞株D3、E7、B9,D3和B9亚类为IgG1,E7亚类为IgG2a,轻链亚型均为κ。交叉反应结果显示这3株单抗仅结合出血性大肠杆菌O157∶H7,对15株其他细菌无反应,测得胶体金标记单抗最佳pH、最佳结合量分别为D3:pH 7.5~8.0、24μg/mL;B9:pH 7.5、12μg/mL;E7∶pH7.5、18μg/mL,抗体配对选择胶体金结合D3喷涂金标垫、E7以1 mg/mL喷涂NC膜作T线为最优组合,试纸条检测出血性大肠杆菌O157∶H7灵敏度为2.1×106CFU/mL,且仅可检出出血性大肠杆菌O157∶H7,对25株其他细菌均无交叉反应,模拟带菌实验表明,对市售面包、牛奶、果冻各25 g(mL)均添加约200 CFU出血性大肠杆菌O157∶H7,增菌培养8、10、10 h即可检出。研究表明,实验自主制备的抗体性能良好,试纸条特异性、灵敏度达到国外同类产品,可在政府食源性致病菌监管部门、食品企业推广运用。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌O157∶H7 单克隆抗体 免疫胶体金 检测
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基于可视化抗体宏阵列技术的出血性大肠杆菌O157∶H7定量检测 被引量:2
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作者 李浩林 刘箐 +5 位作者 刘芳 董庆利 邱实 杨玉萍 郭慧琴 韩舜愈 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第20期185-191,共7页
目的:探索建立一种新的出血性大肠杆菌O157∶H7(Escherichia coli O157∶H7)的快速定量检测技术。方法:以硝酸纤维素膜为基片,用生物芯片点样仪制作抗体宏阵列,采用'双抗夹心'原理,对出血性大肠杆菌O157∶H7进行定量检测研究。... 目的:探索建立一种新的出血性大肠杆菌O157∶H7(Escherichia coli O157∶H7)的快速定量检测技术。方法:以硝酸纤维素膜为基片,用生物芯片点样仪制作抗体宏阵列,采用'双抗夹心'原理,对出血性大肠杆菌O157∶H7进行定量检测研究。结果:本方法对出血性大肠杆菌O157∶H7的检出限为3.4×105 CFU/mL,在105~107CFU/mL细菌浓度范围内,宏阵列的灰度值与细菌浓度之间有较好的线性关系。该方法可在2.5 h内同步检测多个样品中出血性大肠杆菌O157∶H7的浓度。结论:通过用标准菌株、模拟带菌等研究显示,用宏阵列技术快速定量检测出血性大肠杆菌O157∶H7,结果肉眼可见,稳定准确,同时操作简便、成本低廉、无需大型设备,制作好的抗体宏阵列可用于快速评估食品中出血性大肠杆菌O157∶H7的污染状况,尤其适合于基层实验室进行快速高通量样品筛查。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌O157∶H7 抗体宏阵列 可视化 定量检测
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免疫磁珠捕获PCR快速检测单核细胞增生李斯特氏菌 被引量:9
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作者 李婧姮 郭慧琴 +7 位作者 高晓强 刘芳 邱实 李建武 曾海娟 刘兰 宋春美 刘箐 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期226-229,共4页
利用免疫磁珠富集单核细胞增生李斯特氏菌,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增进行快速检测。所制备的免疫磁珠选取在37℃条件下均匀振荡1 h为最佳包被条件,1 mg磁珠偶联抗体的最佳量为100μg/mg,制备的免疫磁珠捕... 利用免疫磁珠富集单核细胞增生李斯特氏菌,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增进行快速检测。所制备的免疫磁珠选取在37℃条件下均匀振荡1 h为最佳包被条件,1 mg磁珠偶联抗体的最佳量为100μg/mg,制备的免疫磁珠捕获率为45%。所建立的免疫磁珠捕获-PCR技术在样品细菌浓度达到104 CFU/m L即可被检出,其灵敏度是直接PCR检测限(105 CFU/m L)的10倍,可为病原菌的富集和快速检测提供新方法。 展开更多
关键词 免疫磁珠 单核细胞增生李斯特氏菌 聚合酶链式反应
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大肠杆菌O157:H7的免疫捕获PCR快速检测 被引量:1
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作者 陈艳 朱小清 +2 位作者 方水琴 郭慧琴 刘箐 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期188-192,共5页
研究用特异性的出血性大肠杆菌O157:H7单克隆抗体包被处理的PCR管,对样品中的病原菌进行特异性免疫富集,以免疫捕获-PCR(Immunocaptured PCR,IC-PCR)管中捕获到的病原菌作为模板进行PCR扩增。结果显示免疫捕获-PCR对病原菌出血性大肠杆... 研究用特异性的出血性大肠杆菌O157:H7单克隆抗体包被处理的PCR管,对样品中的病原菌进行特异性免疫富集,以免疫捕获-PCR(Immunocaptured PCR,IC-PCR)管中捕获到的病原菌作为模板进行PCR扩增。结果显示免疫捕获-PCR对病原菌出血性大肠杆菌O157:H7检测灵敏度达到102CFU/mL,比直接PCR和ELISA提高了103倍;特异性验证实验证实,对其他10株食源性致病菌进行检测均无目标条带。该方法将免疫学和分子生物学检测结合起来,灵敏度高,特异性强,检测周期短,检测迅速,是适合检测一线进行快速检测的新方法。 展开更多
关键词 出血性大肠杆菌O157 H7 免疫反应 PCR 快速检测
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