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抗人TIM-3单克隆抗体的纯化及其体外生物学功能的研究
1
作者
岳翠华
孙润孜
+2 位作者
陈建新
蒋敬庭
卢斌峰
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
2018年第5期375-379,共5页
目的纯化抗人T细胞免疫球蛋白粘蛋白3(TIM-3)单克隆抗体4E8,检测TIM-3单克隆抗体4E8的体外生物学功能。方法利用单克隆抗体纯化技术获取4E8;用细胞转染技术获得表达人TIM-3分子的细胞系,流式细胞术检测4E8与人TIM-3分子结合的能力以及...
目的纯化抗人T细胞免疫球蛋白粘蛋白3(TIM-3)单克隆抗体4E8,检测TIM-3单克隆抗体4E8的体外生物学功能。方法利用单克隆抗体纯化技术获取4E8;用细胞转染技术获得表达人TIM-3分子的细胞系,流式细胞术检测4E8与人TIM-3分子结合的能力以及阻断人TIM-3融合蛋白(TIM-3 Ig-hu Fc)与凋亡细胞表面TIM-3配体磷脂酰丝氨酸(Ptd Ser)结合的能力;混合淋巴细胞反应(MLR)及ELISA法检测4E8对CD4+T细胞分泌IFN-γ的影响。结果 4E8可与人TIM-3分子结合,但不可阻断TIM-3与Ptd Ser的结合。与阴性对照组(958.3±153.2)相比,4E8(10μg/m L组:2 563±150.3,3.33μg/m L组:1 981±211.5)可增强MLR实验中CD4+T细胞分泌IFN-γ的能力,差异有统计学意义(P<0.05)。并且与单独使用4E8(10μg/m L组:1 981±211.5,0.33μg/m L组:844±76.2)相比,4E8与程序性死亡受体1(PD-1)抗体nivolumab联合使用(10μg/m L组:3 049±80.5,0.33μg/m L组:1 957±321.3)有协同作用,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功纯化出抗人TIM-3单克隆抗体4E8。4E8具有增强CD4+T细胞分泌IFN-γ的能力,但对CD4+T细胞的作用不依赖于阻断TIM-3与其配体Ptd Ser的结合。
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关键词
免疫卡控点
抗体纯化
TIM-3
T细胞
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题名
抗人TIM-3单克隆抗体的纯化及其体外生物学功能的研究
1
作者
岳翠华
孙润孜
陈建新
蒋敬庭
卢斌峰
机构
苏州大学附属第三医院肿瘤
生物
诊疗中心江苏省肿瘤免疫治疗工程
技术
研究中心苏州大学细胞治疗研究院
上海德思特力生物技术有限公司
美国匹兹堡大学免疫系
出处
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
2018年第5期375-379,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(31570877
31570908)
+1 种基金
国家自然科学基金海外及港澳学者合作研究基金(31729001)
国家科技支撑计划资助项目(2015BAI12B12)
文摘
目的纯化抗人T细胞免疫球蛋白粘蛋白3(TIM-3)单克隆抗体4E8,检测TIM-3单克隆抗体4E8的体外生物学功能。方法利用单克隆抗体纯化技术获取4E8;用细胞转染技术获得表达人TIM-3分子的细胞系,流式细胞术检测4E8与人TIM-3分子结合的能力以及阻断人TIM-3融合蛋白(TIM-3 Ig-hu Fc)与凋亡细胞表面TIM-3配体磷脂酰丝氨酸(Ptd Ser)结合的能力;混合淋巴细胞反应(MLR)及ELISA法检测4E8对CD4+T细胞分泌IFN-γ的影响。结果 4E8可与人TIM-3分子结合,但不可阻断TIM-3与Ptd Ser的结合。与阴性对照组(958.3±153.2)相比,4E8(10μg/m L组:2 563±150.3,3.33μg/m L组:1 981±211.5)可增强MLR实验中CD4+T细胞分泌IFN-γ的能力,差异有统计学意义(P<0.05)。并且与单独使用4E8(10μg/m L组:1 981±211.5,0.33μg/m L组:844±76.2)相比,4E8与程序性死亡受体1(PD-1)抗体nivolumab联合使用(10μg/m L组:3 049±80.5,0.33μg/m L组:1 957±321.3)有协同作用,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功纯化出抗人TIM-3单克隆抗体4E8。4E8具有增强CD4+T细胞分泌IFN-γ的能力,但对CD4+T细胞的作用不依赖于阻断TIM-3与其配体Ptd Ser的结合。
关键词
免疫卡控点
抗体纯化
TIM-3
T细胞
Keywords
immune check point
antibody purification
T cell immunoglobulin mucin-3
T lymphocyte
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
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1
抗人TIM-3单克隆抗体的纯化及其体外生物学功能的研究
岳翠华
孙润孜
陈建新
蒋敬庭
卢斌峰
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
2018
0
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