利用转基因动物乳腺生物反应器生产溶栓药物的研究进展 被引量：2

1

作者 徐寒梅 成国祥 沈子龙 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期474-477,共4页

目前 ,溶栓试剂主要有七大类 ,其中 ,纤溶酶原激活剂 ( PA)及其突变体是急性心肌梗塞的常规用药 ,但是由于来源有限 ,价格昂贵 ,远远不能满足临床需要。利用转基因动物乳腺作为生物反应器来生产溶栓药物能够降低成本 ,是一种高效率的表... 目前 ,溶栓试剂主要有七大类 ,其中 ,纤溶酶原激活剂 ( PA)及其突变体是急性心肌梗塞的常规用药 ,但是由于来源有限 ,价格昂贵 ,远远不能满足临床需要。利用转基因动物乳腺作为生物反应器来生产溶栓药物能够降低成本 ,是一种高效率的表达系统 .转基因动物乳腺生物反应器是将目的基因构建于乳腺表达载体 ,通过显微注射等方法注入动物的受精卵中 ,使目的基因整合到动物的染色体中 ,最终在动物乳汁中获得目的蛋白的一种制药方法。到目前为止 ,转基因组织型纤溶酶原激活剂 ( t PA) ,尿激酶型纤溶酶原激活剂 ( u PA) ,长效组织型纤溶酶原激活剂 ( LAt PA)的转基因小鼠 ,及长效组织型纤溶酶原激活剂 ( LAt PA)的转基因羊都已产生 ,并且在从转基因羊乳汁中纯化长效组织型纤溶酶原激活剂 ( LAt PA)蛋白方面也取得了突破性的进展。可以预测 ,利用转基因动物乳腺生物反应器生产溶栓药物将会有广阔的前景。 展开更多

关键词 溶栓试剂 纤溶酶原激活剂 转基因动物 乳腺生物反应器 溶栓药物

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转基因动物在药理学研究中的应用及前景 被引量：1

2

作者 李凌云 王霆 成国祥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期244-248,共5页

转基因动物是指基因组中稳定整合外源基因 (或特定的DNA片段 )并且能遗传和表达的一类动物。啮齿类转基因技术最早是Gordon在 1980年开创的 ,这一技术的应用打开了生物技术和基因调节之门 ,通过建立整体模型转入基因调控成分 ,已经能在... 转基因动物是指基因组中稳定整合外源基因 (或特定的DNA片段 )并且能遗传和表达的一类动物。啮齿类转基因技术最早是Gordon在 1980年开创的 ,这一技术的应用打开了生物技术和基因调节之门 ,通过建立整体模型转入基因调控成分 ,已经能在复杂的细胞组织环境中再现或模拟人类的一部分疾病。药物研究的动物模型不断发展和运用 ,正在开辟新药研制和生产的新天地。 展开更多

关键词 转基因动物 动物模型 药理学 研究 分子药物靶

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重组人瑞替普酶基因在山羊胎儿成纤维细胞β-酪蛋白基因座的定点整合

3

作者 王宏 沈子龙 +5 位作者 奚涛 李治国 刘红如 赵周英 吴国祥 成国祥 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期73-77,共5页

目的 :利用体细胞基因打靶技术来获得定点整合有重组人瑞替普酶 (rPA)的山羊胎儿成纤维细胞株。方法 :构建了针对山羊 β- 酪蛋白基因座的定点打靶载体 ,其上游同源臂为 β 酪蛋白启动子端同时包含其信号肽编码区长约 6 .1kb的基因组片... 目的 :利用体细胞基因打靶技术来获得定点整合有重组人瑞替普酶 (rPA)的山羊胎儿成纤维细胞株。方法 :构建了针对山羊 β- 酪蛋白基因座的定点打靶载体 ,其上游同源臂为 β 酪蛋白启动子端同时包含其信号肽编码区长约 6 .1kb的基因组片段 ,下游同源臂为 3.3kb从 β- 酪蛋白外显子 6至外显子 9的基因组片段。rPA小基因起始密码子位于 β- 酪蛋白信号肽编码区下游。将载体瞬时转染C12 7小鼠乳腺癌细胞 ,并通过激素进行诱导 ,酶联免疫吸附分析 (ELISA)检测细胞培养上清中的rPA表达量来验证载体表达功能。将载体通过电穿孔的方法转染同基因型的山羊胎儿成纤维细胞。利用G4 18和GANC进行药物筛选 ,并通过PCR和southern杂交的方法进行基因组DNA检测。结果 :获得了一株定点整合的细胞克隆 ,绝对基因打靶效率为 2× 10 7。结论 :本实验结果为后续利用核移植技术制备乳腺生物反应器提供了坚实的实验基础。 展开更多

关键词 体细胞 基因打靶 胎儿成纤维细胞 乳腺生物反应器 重组人瑞替普酶

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波尔山羊超数排卵方案的研究 被引量：34

4

作者 张锁林 王述宇 《中国草食动物》 2001年第4期10-14,共5页

在不同季节 ,应用不同FSH剂量对不同年龄、体重、是否经产以及不同利用次数的 66头次波尔山羊进行超数排卵处理。结果表明 :在繁殖季节 ,应用FSH总剂量为 2 0 0～ 3 0 0IU ,年龄为 2～ 5岁、经产的波尔山羊超排效果好。每头平均获卵 18 ... 在不同季节 ,应用不同FSH剂量对不同年龄、体重、是否经产以及不同利用次数的 66头次波尔山羊进行超数排卵处理。结果表明 :在繁殖季节 ,应用FSH总剂量为 2 0 0～ 3 0 0IU ,年龄为 2～ 5岁、经产的波尔山羊超排效果好。每头平均获卵 18 5枚。并且重复超数排卵的波尔山羊也具有较好的超排效果 (首次平均获卵 2 1 9枚 ,第二次平均获卵 17 8枚 )。同时对影响波尔山羊超数排卵效果的其它因素也进行了研究分析 ,获得了波尔山羊超数排卵的技术参数 。 展开更多

关键词 波尔山羊 超数排卵 胚胎移植 重体促卵泡素

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B型超声妊娠诊断技术在布尔山羊胚胎移植产业化中的研究应用 被引量：2

5

作者 李福刚 周西权 徐刚 《中国草食动物》 2002年第3期13-14,共2页

应用B型超声断层扫描仪对 2 79只布尔山羊胚胎移植受体白山羊和 87只自然交配布尔山羊进行早期妊娠检查。在胚胎移植后 2 0～ 10 0天试验羊妊娠诊断阴性 (B超判断未怀孕 )的准确率为 10 0 % ;正常交配羊妊娠诊断阳性 (B超判断怀孕 )的... 应用B型超声断层扫描仪对 2 79只布尔山羊胚胎移植受体白山羊和 87只自然交配布尔山羊进行早期妊娠检查。在胚胎移植后 2 0～ 10 0天试验羊妊娠诊断阴性 (B超判断未怀孕 )的准确率为 10 0 % ;正常交配羊妊娠诊断阳性 (B超判断怀孕 )的准确率为 10 0 % ;部分胚胎移植后 2 0天左右的受体羊出现假阳性 ,这可能与胚胎移植后胎儿发育停止或出现流产或手术造成的粘连有关。试验证明 ,在胚胎移植 (2～ 8细胞胚胎 ) 30天以后进行B超妊娠检查 ,不仅可准确判断妊娠情况 ,而且能得到胚胎移植羊流产或妊娠中止的数据 ,试验说明 。 展开更多

关键词 B型超声 妊娠诊断技术 布尔山羊 胚胎移植 产业化 研究应用

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用FSH-PGF_(2a)-Gn-RH法对波尔山羊进行超数排卵的研究 被引量：2

6

作者 贾敏 《畜禽业》 2000年第10期18-18,共1页

ＦＳＨ－ＰＧＦ２ａ－Ｇｎ－ＲＨ法是目前波尔山羊种质扩繁与推广生产中常用的一种超数排卵法（简称超排）：该法是由ＦＳＨ、ＰＧＦ２ａ，Ｇｎ－ＲＨ三种激素按一定配比经肌肉注射于羊体内，人为诱发卵巢上的多卵泡发育并排出具有受精... ＦＳＨ－ＰＧＦ２ａ－Ｇｎ－ＲＨ法是目前波尔山羊种质扩繁与推广生产中常用的一种超数排卵法（简称超排）：该法是由ＦＳＨ、ＰＧＦ２ａ，Ｇｎ－ＲＨ三种激素按一定配比经肌肉注射于羊体内，人为诱发卵巢上的多卵泡发育并排出具有受精能力的卵子。本文就按ＦＳＨ－ＰＧＦ２ａ－Ｇｎ－ＲＨ法的三个不同剂量配比水平时１５头波尔山羊进行超数排卵试验，结果表明：Ｉ剂量配比超排效果最好、Ⅱ剂量配比最差。 展开更多

关键词 FSH-PGF2a-Gn-RH法 波尔山羊 超数排卵 剂量

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乳腺生物反应器表达载体的检测方法 被引量：31

7

作者 徐曼妮 厉曙光 +1 位作者 赵建阳 成国祥 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第5期23-26,共4页

乳腺生物反应器研究和开发的周期长 ,成本大 ,风险高 ,在生产转基因动物之前有必要对乳腺特异性表达载体构建的合理性和有效性进行检测。综述了国内外载体检测研究的进展 ,以及这些检测方法在转基因小鼠。

关键词 乳腺生物反应器 表达载体 检测 转基因动物 细胞培养

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浅谈抗菌药物在兽医临床中的合理应用 被引量：4

8

作者 李福刚 周西权 高士钦 《中国兽药杂志》 2002年第10期46-47,45,共3页

结合科研与临床实践,简要阐述抗菌药物在兽医临床中的合理应用,以期为临床用药提供一点参考。

关键词 抗菌药物 兽医临床 应用

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B型超声妊娠诊断技术在波尔山羊胚胎移植产业化中的应用 被引量：3

9

作者 李福刚 高功奇 +2 位作者 徐旭俊 袁玉国 聂春应 《河北畜牧兽医》 2003年第8期17-18,共2页

应用B型超声断层扫描仪对279只波尔山羊胚胎移植受体白山羊和87只自然交配波尔山羊进行早期妊娠检查。在胚胎移植后20～100d试验羊妊娠断阴性(B超判断未怀孕)的准确率为100%,正常交配羊妊娠诊断阳性(B超判断怀孕)的准确率为100%;部分胚... 应用B型超声断层扫描仪对279只波尔山羊胚胎移植受体白山羊和87只自然交配波尔山羊进行早期妊娠检查。在胚胎移植后20～100d试验羊妊娠断阴性(B超判断未怀孕)的准确率为100%,正常交配羊妊娠诊断阳性(B超判断怀孕)的准确率为100%;部分胚胎移植后20d左右的受体羊出现假阳性,这可能与胚胎移植后胎儿发育停止或出现流产或手术造成的粘连有关。试验证明,在胚胎移植(2～8细胞胚胎)30d以后进行B超妊娠检查不仅可准确判断妊娠情况,而且能得到胚胎移植羊流产或妊娠中止的数据,试验说明,B超妊娠诊断是目前波尔山羊胚胎移植产业化过程中的一个重要环节。 展开更多

关键词 B型超声断层扫描仪 妊娠诊断技术 波尔山羊 胚胎移植 产业化 流产 自然配种

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羔羊败血性大肠杆菌病的诊断和防治 被引量：3

10

作者 李福刚 《畜牧兽医杂志》 2002年第1期43-44,共2页

羔羊败血性大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的一种羔羊急性、致死性传染病 ,对养羊业危害很大 ,根据上海某羊场的发病情况 ,通过临床特征 ,病理变化和实验室检查进行诊断 ,并给予一定的预防和治疗措施 ,收到了良好的效果。

关键词 羔羊 败血性大肠杆菌病 症状 病理变化 诊断 防治

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超排处理山羊获可注射受精卵技术应用中的八个问题 被引量：2

11

作者 贾敏 张锁林 +3 位作者 李海 徐旭俊 潘勇 李福刚 《四川畜牧兽医》 2001年第3期28-29,共2页

据多年的实验研究和生产应用表明：超排处理山羊是获得可注射和胚胎分割的受精卵最为有效技术途径；如在单个羊只上获得胚胎的数量质量、在大批量胚胎的发育同期性、在获得胚胎的自由性、技术超作可行性等方面，该技术途径比其它技术途... 据多年的实验研究和生产应用表明：超排处理山羊是获得可注射和胚胎分割的受精卵最为有效技术途径；如在单个羊只上获得胚胎的数量质量、在大批量胚胎的发育同期性、在获得胚胎的自由性、技术超作可行性等方面，该技术途径比其它技术途径（自然发情配种、人工诱导取卵、分离卵泡体外培养等）都有明显的优越性。 展开更多

关键词 超排处理 山羊 可注射受精卵 动物乳腺生物反应器 胚胎分割

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超排处理山羊获可注射受精卵技术应用中的八个问题 被引量：1

12

作者 贾敏 张锁林 +3 位作者 李海 徐旭俊 潘勇 李福刚 《畜禽业》 2001年第1期38-39,共2页

据多年的实验研究和生产应用表明:超排处理山羊是获得可注射或胚胎分割的受精卵最为有效的技术途径;如在单个羊只上获得胚胎的数量质量、在大批量胚胎的发育同期性、在获得胚胎的自由性、技术超作可行性等方面,该技术途径比其它技术途... 据多年的实验研究和生产应用表明:超排处理山羊是获得可注射或胚胎分割的受精卵最为有效的技术途径;如在单个羊只上获得胚胎的数量质量、在大批量胚胎的发育同期性、在获得胚胎的自由性、技术超作可行性等方面,该技术途径比其它技术途径自然发情配种、人工诱导取卵、分离卵泡体外培养等都有明显的优越性。 展开更多

关键词 山羊 可注射受精卵 超排技术 激素 超排方法 受精卵收集法 超排效果判定 超排反应

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建立中国种羊数据库和网上交易查询系统的设想与实践

13

作者 沈军 《中国草食动物》 2002年第S1期177-179,共3页

关键词 数据库 代码 数据库系统 种羊场 杂交羊 网上交易 中华人民共和国

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波尔山羊胚胎移植

14

作者 陈建泉 张锁林 +10 位作者 江国永 葛来香 张成林 潘勇 周汝江 孙长美 王述宇 成国祥 秦建良 金云新 张振波 《中国草食动物》 2001年第S1期122-124,共3页

波尔山羊是一种著名的肉用山羊品种。为了提高波尔山羊繁殖效率 ,采用激素处理波尔山羊群 ,超数排卵 ,经与纯种波尔山羊公羊配种 ,手术从输卵管中冲出发育至 2～ 4细胞的胚胎 ,再经手术移回同步发情的受体莎能奶山羊输卵管内 ,妊娠产仔... 波尔山羊是一种著名的肉用山羊品种。为了提高波尔山羊繁殖效率 ,采用激素处理波尔山羊群 ,超数排卵 ,经与纯种波尔山羊公羊配种 ,手术从输卵管中冲出发育至 2～ 4细胞的胚胎 ,再经手术移回同步发情的受体莎能奶山羊输卵管内 ,妊娠产仔。结果 :①超排 4头波尔山羊 ,获卵 6 9枚早期胚胎 ,其中 6 4枚为 4细胞 ,3枚 2细胞 ,2枚 1细胞 :②移植 34头受体 (每头受体移植 2枚胚胎 ) ,怀孕 17头 ,怀孕率 5 0 % ;产仔 2 2头 ,其中产双胎的有 7只受体 ,占妊娠总数的 35 % (7/17) ;③羔羊出生重平均为 3 8kg± 0 86kg ,最重达 6kg。每头波尔山羊经过一次超数排卵、胚胎移植平均可产 5 5头羔羊 ,若一年内进行 4次可获得 2 2头羊羔 ,将极大地提高纯种波尔羊的繁殖速度。 展开更多

关键词 波尔山羊 超数排卵 胚胎移植

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羔羊败血性大肠杆菌病的诊断和防治

15

作者 李福刚 《上海畜牧兽医通讯》 2001年第6期40-40,共1页

关键词 羔羊 败血性大肠杆菌病 症状 病理变化 诊断 防治

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