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周期蛋白A在白血病细胞中表达意义的临床与实验研究(英文) 被引量：3
1
作者 俞翚 谢彦晖 +2 位作者 范华骅 郑滨 谢毅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期146-152,共7页
不断增殖是肿瘤的基本特征。一些基本的细胞周期调控分子参与了肿瘤的形成。细胞周期蛋白A(cyclinA)是在G1/S期表达的细胞周期蛋白 (cyclin) ,其异常高表达参与了肿瘤的形成。为了探讨cyclinA异常高表达与白血病细胞恶性增殖的关系 ,采... 不断增殖是肿瘤的基本特征。一些基本的细胞周期调控分子参与了肿瘤的形成。细胞周期蛋白A(cyclinA)是在G1/S期表达的细胞周期蛋白 (cyclin) ,其异常高表达参与了肿瘤的形成。为了探讨cyclinA异常高表达与白血病细胞恶性增殖的关系 ,采用流式细胞仪胞浆内间接免疫荧光 /DNA双染色法半定量分析了急性白血病患者、门诊接受骨髓穿刺的患者、健康献血者这三种不同来源的外周血或骨髓标本细胞 ,以及白血病细胞系 (HL 6 0 )cyclinA表达水平。为了进一步研究cyclinA在白血病细胞增殖中的作用 ,用在体内、体外均有抗肿瘤作用的六亚甲基二乙酰胺 (HMBA)在体外抑制白血病细胞系HL 6 0增殖 ,并诱导其分化。增殖抑制效应采用四唑盐还原试验和细胞周期分析来检测。细胞表面分化抗原CD33、CD11b改变来检测分化。结果发现 ,两组来自白血病标本的细胞S期cyclinA (即急性白血病患者外周血或骨髓幼稚细胞和白血病细胞系 )表达阳性率要远远高于另两组 (门诊骨髓穿刺的患者骨髓细胞和健康献血员外周血细胞 ) ;在HMBA抗肿瘤细胞系HL 6 0增殖实验中发现随药物剂量的加大 ,增殖抑制和分化程度呈剂量依赖性 ;同时 ,胞内cyclinA蛋白表达水平被明显下调了 ,也呈剂量依赖性。结论 :白血病细胞S期cyclinA异常高表达 。 展开更多
关键词 周期蛋白A 细胞表达 实验研究 细胞周期 肿瘤形成 急性白血病
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抗caspase-3核酶M1 RNA的体外制备与活性鉴定
2
作者 肖娟 邹萍 +3 位作者 陆华中 刘芳 范华骅 高峰 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期390-392,共3页
目的　针对凋亡关键蛋白酶caspase 3设计核酶M1RNA GS ,对其体外制备及切割活性进行探讨。 方法　以RNaseP催化亚基M1RNA为模板 ,PCR合成并克隆特异性针对人caspase 3的一组核酶 pM 1 GS 716 ,pM1 GS 337和 pM1 GS 2 35 ,3 2 P标记转录... 目的　针对凋亡关键蛋白酶caspase 3设计核酶M1RNA GS ,对其体外制备及切割活性进行探讨。 方法　以RNaseP催化亚基M1RNA为模板 ,PCR合成并克隆特异性针对人caspase 3的一组核酶 pM 1 GS 716 ,pM1 GS 337和 pM1 GS 2 35 ,3 2 P标记转录。应用RT PCR方法从人外周血单个核细胞扩增底物caspase 3mRNA目的片段 ,体外转录物作为靶RNA ,核酶与靶RNA按 1∶1比例进行体外切割实验。结果　pM1 GS 716和 pM 1 GS 337在 37℃均有切割活性 ,pM 1 GS 716的切割效率为 93% ,pM1 GS 337为 4 2 % ,而 pM1 GS 2 35几无切割效应。 结论　体外制备的pM 1 GS 716具有良好的特异催化切割活性 ,有望通过切割caspase 3而抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 RNASE P核酶类 CASPASE-3 细胞凋亡 体外切割活性
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抗Caspase-3核酶M1RNA的制备与体内外活性鉴定
3
作者 肖娟 邹萍 +4 位作者 范华骅 高峰 郑滨 高砾 陆华中 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期653-657,共5页
为评价抗caspase 3核酶在阻抑细胞凋亡发生中的潜在价值 ,以RNaseP催化亚基M1RNA为模板 ,设计合成 3个特异性针对人caspase 3的核酶pM1 GS716、pM1 GS337和pM1 GS2 35 ,并对它们的体内外切割活性进行探讨 .3 2 P标记的caspase 3基因片... 为评价抗caspase 3核酶在阻抑细胞凋亡发生中的潜在价值 ,以RNaseP催化亚基M1RNA为模板 ,设计合成 3个特异性针对人caspase 3的核酶pM1 GS716、pM1 GS337和pM1 GS2 35 ,并对它们的体内外切割活性进行探讨 .3 2 P标记的caspase 3基因片段体外转录物作为靶RNA ,体外切割实验表明 ,pM1 GS716和pM1 GS337均有切割活性 ,其中pM1 GS716的切割效率可达到 93% .3个核酶转染HeLa细胞 ,评价其在体内的切割活性 .在TNF α作用下 ,转染pM1 GS716的HeLa细胞内caspase 3mRNA下降了 75 % ,蛋白含量下降了 6 9% ,caspase 3蛋白酶活性下降了 5 2 % .Hoechst 332 5 8染色表明 ,细胞凋亡率较对照明显下降 (分别为 2 1 6± 0 7%和 4 9 4± 0 2 % ,P <0 0 1) .提示体外制备的pM1 GS716具有良好的特异催化切割活性 ,有望通过切割caspase 3而抑制细胞凋亡 . 展开更多
关键词 核酶 制备 活性鉴定 细胞凋亡
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