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大鼠胰岛分离纯化技术的改进 被引量:15
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作者 李永翔 李戈 +3 位作者 董维平 陈静 卢大儒 谭建明 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期266-268,共3页
目的探索成年大鼠胰岛的分离纯化理想方法,并对获得的胰岛进行体外功能鉴定。方法通过用胶原酶P液灌注分离成年SD大鼠胰岛,不连续密度梯度离心法纯化胰岛,STZ染色鉴定胰岛,AO/PI染色鉴定胰岛活率,胰岛素释放试验判定胰岛功能,光镜观察... 目的探索成年大鼠胰岛的分离纯化理想方法,并对获得的胰岛进行体外功能鉴定。方法通过用胶原酶P液灌注分离成年SD大鼠胰岛,不连续密度梯度离心法纯化胰岛,STZ染色鉴定胰岛,AO/PI染色鉴定胰岛活率,胰岛素释放试验判定胰岛功能,光镜观察体外培养胰岛的形态学变化。结果纯化后每只大鼠胰岛收获量为(629±102)IEQ,胰岛纯度>90%,胰岛细胞活率>90%,胰岛细胞体外培养液中胰岛素含量在低糖和高糖刺激下的浓度分别为(3.701 5±0.492 0)mIU/L和(10.477 1±2.233 4)mIU/L,刺激指数为2.837 8±0.102 3,体外培养48h几乎完全贴壁,培养3周生长状况仍良好。结论分离条件把握好后,胶原酶P消化、Fi-coll400非连续密度梯度离心法可获得高纯度高活率的大鼠胰岛。 展开更多
关键词 胰岛 分离 纯化
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NO-1886对培养的胰岛细胞凋亡和β细胞功能的影响 被引量:5
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作者 付国香 涂玉林 +2 位作者 堤一彦 董维平 尹卫东 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期66-69,共4页
目的 研究甘油三酯 (triglycerides,TG)对胰岛细胞的作用 ,并探讨NO 1886对TG诱导的胰岛细胞凋亡的作用和对胰岛 β细胞功能的作用。 方法 用TG处理原代培养的胰岛 ,MTT法检测细胞活性 ,原位凋亡法及ELISA法检测细胞凋亡 ,放射免疫法... 目的 研究甘油三酯 (triglycerides,TG)对胰岛细胞的作用 ,并探讨NO 1886对TG诱导的胰岛细胞凋亡的作用和对胰岛 β细胞功能的作用。 方法 用TG处理原代培养的胰岛 ,MTT法检测细胞活性 ,原位凋亡法及ELISA法检测细胞凋亡 ,放射免疫法检测胰岛素的含量。结果 TG对细胞生长呈浓度及时间依赖性抑制作用。原位凋亡法及ELISA法证实TG可诱导胰岛细胞凋亡 ,而NO 1886可抑制TG诱导的胰岛细胞凋亡 ;放射免疫法结果显示NO 1886处理的胰岛分泌的胰岛素与对照组相比增加 (P <0 0 5 )。结论 TG对胰岛的细胞毒作用与其作用剂量及作用时间有关 ;高浓度的TG可能通过致胰岛细胞凋亡的途径使胰岛素分泌减少 ;NO 1886可对TG诱导的胰岛细胞凋亡起保护作用 。 展开更多
关键词 细胞凋亡 Β细胞功能 甘油三酯 胰岛 NO-1886 高甘油三酯血症 Ⅱ型糖尿病
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西罗莫司和FTY720对大鼠胰岛细胞体外分泌功能的影响 被引量:1
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作者 蔡锦全 谭建明 +2 位作者 董维平 王煜菲 王鉴波 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1257-1258,共2页
目的 :探讨西罗莫司 (sirolim us)和 FTY 72 0对大鼠胰岛细胞体外分泌胰岛素功能的影响。方法 :将大鼠胰岛细胞分别与西罗莫司和 FTY 72 0共培养后进行糖刺激胰岛素释放试验 ,用 EL ISA方法检测培养液中胰岛素含量并进行比较研究。结果 ... 目的 :探讨西罗莫司 (sirolim us)和 FTY 72 0对大鼠胰岛细胞体外分泌胰岛素功能的影响。方法 :将大鼠胰岛细胞分别与西罗莫司和 FTY 72 0共培养后进行糖刺激胰岛素释放试验 ,用 EL ISA方法检测培养液中胰岛素含量并进行比较研究。结果 :FTY72 0和西罗莫司对大鼠胰岛细胞胰岛素分泌无明显影响。 结论 :FTY72 0和西罗莫司对大鼠胰岛细胞及分泌功能无明显影响 ,FTY72 0和西罗莫司有可能作为临床胰岛细胞移植的主要免疫抑制剂使用。 展开更多
关键词 胰岛 细胞移植 免疫抑制剂
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