目的 克隆小鼠慢性视网膜变性 /盘膜边缘蛋白基因 ,并构建其重组质粒载体。方法 以正常小鼠视网膜 RNA为模板 ,采用 RT- PCR方法扩增出 c DNA目的片段 ,PCR扩增 ,克隆至 p Bluescript II KS(+ )质粒 ,进行限制性内切酶 Bam H I和测序...目的 克隆小鼠慢性视网膜变性 /盘膜边缘蛋白基因 ,并构建其重组质粒载体。方法 以正常小鼠视网膜 RNA为模板 ,采用 RT- PCR方法扩增出 c DNA目的片段 ,PCR扩增 ,克隆至 p Bluescript II KS(+ )质粒 ,进行限制性内切酶 Bam H I和测序分析 ;再克隆到带有 CMV启动子的 pc DNA3质粒 Bam H I位点 ,Bam H I和 Eco R I限制性内切酶及测序证实。结果 限制性内切酶分析及测序证实 p Bluescript II KS(+ )质粒和 pc DNA 3质粒中插入的 1.2 kb片段 ,与小鼠慢性视网膜变性 /盘膜边缘蛋白基因全部编码区相吻合。结论 获得小鼠慢性视网膜变性 /盘膜边缘蛋白基因的全部编码区序列 ,并构建到带有CMV启动子的 pc DNA3载体中 ,为进一步研究打下基础。[眼科新进展 2 0 0 1;2 1(1)∶ 7- 11]展开更多
文摘目的 克隆小鼠慢性视网膜变性 /盘膜边缘蛋白基因 ,并构建其重组质粒载体。方法 以正常小鼠视网膜 RNA为模板 ,采用 RT- PCR方法扩增出 c DNA目的片段 ,PCR扩增 ,克隆至 p Bluescript II KS(+ )质粒 ,进行限制性内切酶 Bam H I和测序分析 ;再克隆到带有 CMV启动子的 pc DNA3质粒 Bam H I位点 ,Bam H I和 Eco R I限制性内切酶及测序证实。结果 限制性内切酶分析及测序证实 p Bluescript II KS(+ )质粒和 pc DNA 3质粒中插入的 1.2 kb片段 ,与小鼠慢性视网膜变性 /盘膜边缘蛋白基因全部编码区相吻合。结论 获得小鼠慢性视网膜变性 /盘膜边缘蛋白基因的全部编码区序列 ,并构建到带有CMV启动子的 pc DNA3载体中 ,为进一步研究打下基础。[眼科新进展 2 0 0 1;2 1(1)∶ 7- 11]
