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左金丸联合西妥昔单抗诱导KRAS突变肠癌细胞铁死亡作用研究
被引量:
8
1
作者
卫真真
隋华
+3 位作者
姜宇朗
孙明瑜
闫化茹
王子元
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2023年第2期130-137,共8页
目的:探讨左金丸(ZJW)对KRAS突变的人结肠癌细胞西妥昔单抗(CET)抵抗的效果及机制。方法:采用Sanger测序法检测SW620、Lovo、HCT116、HT29和Caco2细胞KRAS基因突变状态;采用CCK-8法检测ZJW、CET、ZJW联合CET以及联合不同细胞死亡抑制剂...
目的:探讨左金丸(ZJW)对KRAS突变的人结肠癌细胞西妥昔单抗(CET)抵抗的效果及机制。方法:采用Sanger测序法检测SW620、Lovo、HCT116、HT29和Caco2细胞KRAS基因突变状态;采用CCK-8法检测ZJW、CET、ZJW联合CET以及联合不同细胞死亡抑制剂对上述细胞存活率的影响,并观察ZJW联合CET对KRAS突变型细胞(SW620、Lovo及HCT116)耐药性的影响;流式细胞术、比色法和FerroOrange荧光探针检测和观察ZJW、CET以及它们联合作用对KRAS突变型细胞内ROS、GSH及Fe^(2+)水平的影响;Western blot和Real-time PCR法检测ZJW联合CET对铁死亡相关通路蛋白和mRNA的调控作用。结果:KRAS突变型细胞为HCT116(KRAS^(G13D)),Lovo(KRAS^(G13D)),SW620(KRAS^(G12V)),KRAS野生型细胞为HT29和Caco2;与125μg/mL CET处理组比较,相同浓度CET明显降低KRAS野生型细胞Caco2和HT29的存活率,分别为34.03%和40.68%(P<0.01);与空白对照组比较,ZJW(50μg/mL)联合CET(125μg/mL)后,HCT116、Lovo和SW620细胞存活率均有显著下降,分别为59.97%,59.47%,52.58%(P<0.05);ZJW能够增强KRAS突变细胞内ROS和Fe^(2+)水平,降低GSH水平;当ZJW联合CET后,效果更加显著(P<0.05,P<0.01)。ZJW联合CET抑制SW620细胞SLC7A11、GPX4、Nrf2、MDM2蛋白和mRNA的表达,增强p53蛋白的表达,但不影响p53 mRNA的水平。结论:ZJW能够调控KRAS突变细胞Nrf2和p53途径从而抑制SLC7A11和GPX4促进铁死亡,可能是逆转CET耐药的机制。
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关键词
结直肠癌
西妥昔单抗
KRAS突变
铁死亡
左金丸
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题名
左金丸联合西妥昔单抗诱导KRAS突变肠癌细胞铁死亡作用研究
被引量:
8
1
作者
卫真真
隋华
姜宇朗
孙明瑜
闫化茹
王子元
机构
上海
中医药大学附属曙光
医院
病理科
上海市第一人民医院嘉定分院实验医学中心
上海
中医药大学附属曙光
医院
肿瘤科
上海
中医药大学附属曙光
医院
肝病研究所
出处
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2023年第2期130-137,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(81703885,81874399)
上海中医药大学附属曙光医院“四明临床研究专项”(SGKJLC-202030)
+5 种基金
上海市临床重点专科建设项目(shslczdzk01201)
国家中医药管理局中医肝胆病重点学科、慢性肝病虚损重点研究室和上海市中医临床重点实验室(20DZ2272200)
国家中医药管理局第四批中医优才(2017-124)
上海市科委专项(19401972300)
上海中医药大学研究生创新课程建设(2017)
山东省重点研发计划(重大科技创新工程,2021CXGC010509)。
文摘
目的:探讨左金丸(ZJW)对KRAS突变的人结肠癌细胞西妥昔单抗(CET)抵抗的效果及机制。方法:采用Sanger测序法检测SW620、Lovo、HCT116、HT29和Caco2细胞KRAS基因突变状态;采用CCK-8法检测ZJW、CET、ZJW联合CET以及联合不同细胞死亡抑制剂对上述细胞存活率的影响,并观察ZJW联合CET对KRAS突变型细胞(SW620、Lovo及HCT116)耐药性的影响;流式细胞术、比色法和FerroOrange荧光探针检测和观察ZJW、CET以及它们联合作用对KRAS突变型细胞内ROS、GSH及Fe^(2+)水平的影响;Western blot和Real-time PCR法检测ZJW联合CET对铁死亡相关通路蛋白和mRNA的调控作用。结果:KRAS突变型细胞为HCT116(KRAS^(G13D)),Lovo(KRAS^(G13D)),SW620(KRAS^(G12V)),KRAS野生型细胞为HT29和Caco2;与125μg/mL CET处理组比较,相同浓度CET明显降低KRAS野生型细胞Caco2和HT29的存活率,分别为34.03%和40.68%(P<0.01);与空白对照组比较,ZJW(50μg/mL)联合CET(125μg/mL)后,HCT116、Lovo和SW620细胞存活率均有显著下降,分别为59.97%,59.47%,52.58%(P<0.05);ZJW能够增强KRAS突变细胞内ROS和Fe^(2+)水平,降低GSH水平;当ZJW联合CET后,效果更加显著(P<0.05,P<0.01)。ZJW联合CET抑制SW620细胞SLC7A11、GPX4、Nrf2、MDM2蛋白和mRNA的表达,增强p53蛋白的表达,但不影响p53 mRNA的水平。结论:ZJW能够调控KRAS突变细胞Nrf2和p53途径从而抑制SLC7A11和GPX4促进铁死亡,可能是逆转CET耐药的机制。
关键词
结直肠癌
西妥昔单抗
KRAS突变
铁死亡
左金丸
Keywords
colorectal cancer
cetuximab
KRAS mutation
ferroptosis
Zuo Jin Wan
分类号
R735 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
左金丸联合西妥昔单抗诱导KRAS突变肠癌细胞铁死亡作用研究
卫真真
隋华
姜宇朗
孙明瑜
闫化茹
王子元
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2023
8
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