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人外周血单个核细胞BLyS_(127-285)的克隆、表达和纯化
被引量：
1
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作者
周演武
谢菲
+4 位作者
周琳
娄加陶
侯彦强
耿红莲
仲人前
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第12期1335-1337,共3页
目的:从人外周血单个核细胞中克隆出B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLys)胞外区片段BLyS127-285,并进行表达和纯化。方法:采用RT-PCR技术,从人外周血单个核细胞中扩增BLyS127-285,测序后构建原核表达载体,经IPTG诱导表达及...
目的:从人外周血单个核细胞中克隆出B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLys)胞外区片段BLyS127-285,并进行表达和纯化。方法:采用RT-PCR技术,从人外周血单个核细胞中扩增BLyS127-285,测序后构建原核表达载体,经IPTG诱导表达及Ni-NTA纯化,以SDS-PAGE和Western印迹法进行鉴定。结果:RT-PCR扩增出一个480 bp的DNA片段,序列分析与GenBank中报道的人BLyS127-285的cDNA序列一致,该胞外区片段在大肠杆菌中得到高效表达,表达量可达菌体总蛋白的49.8％,纯化后纯度可达97.0％。结论:成功地从人外周血单个核细胞中扩增出入BLyS127-285,并获得高效表达,其纯化产物为进一步研究其功能、开发与临床应用奠定了基础。
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关键词
人外周血单个核细胞
BLyS127-285
基因表达
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题名
人外周血单个核细胞BLyS_(127-285)的克隆、表达和纯化
被引量：
1
1
作者
周演武
谢菲
周琳
娄加陶
侯彦强
耿红莲
仲人前
机构
第二军医大学长征
医院
实验诊断
科
上海市杨思医院检验科
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第12期1335-1337,共3页
基金
国家自然科学基金(30080027)上海市基础研究重大项目(02JC14005)上海市卫生系统百人跨世纪优秀学科带头人培养基金(沪卫科9713)
文摘
目的:从人外周血单个核细胞中克隆出B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLys)胞外区片段BLyS127-285,并进行表达和纯化。方法:采用RT-PCR技术,从人外周血单个核细胞中扩增BLyS127-285,测序后构建原核表达载体,经IPTG诱导表达及Ni-NTA纯化,以SDS-PAGE和Western印迹法进行鉴定。结果:RT-PCR扩增出一个480 bp的DNA片段,序列分析与GenBank中报道的人BLyS127-285的cDNA序列一致,该胞外区片段在大肠杆菌中得到高效表达,表达量可达菌体总蛋白的49.8％,纯化后纯度可达97.0％。结论:成功地从人外周血单个核细胞中扩增出入BLyS127-285,并获得高效表达,其纯化产物为进一步研究其功能、开发与临床应用奠定了基础。
关键词
人外周血单个核细胞
BLyS127-285
基因表达
分类号
R593.2 [医药卫生—内科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人外周血单个核细胞BLyS_(127-285)的克隆、表达和纯化
周演武
谢菲
周琳
娄加陶
侯彦强
耿红莲
仲人前
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
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