喷雾诱导基因沉默技术在植物真菌病害防治中的研究进展 被引量：5

1

作者 莫芹 蒋玮 +1 位作者 陈一帆 吕贝贝 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2022年第5期1316-1324,共9页

植物病原真菌是农业上的第一大病原菌,能够持续性地给全球的作物和果蔬产量带来严重的损失。目前真菌病害的防治方法主要依赖化学农药的大量使用,这也带来了真菌耐药性、食品安全以及生态环境污染等问题,因此开发应对病原真菌的新型绿... 植物病原真菌是农业上的第一大病原菌,能够持续性地给全球的作物和果蔬产量带来严重的损失。目前真菌病害的防治方法主要依赖化学农药的大量使用,这也带来了真菌耐药性、食品安全以及生态环境污染等问题,因此开发应对病原真菌的新型绿色防控技术迫在眉睫。喷雾诱导基因沉默(spray induced gene silencing,SIGS)技术是一种通过外源施用双链RNA或小干扰RNA的方式来控制病原体关键靶标基因的生物技术,是农业生产上颇具潜力的新型绿色防控技术之一,目前已经成功应用于多种病原真菌的防控。本文主要综述了SIGS技术原理及其在植物真菌病害防治研究中的研究进展,旨在为开发用于防治植物病原真菌的生物农药提供研究基础。 展开更多

关键词 喷雾诱导基因沉默 RNA干扰 植物真菌病害 生物农药 植物保护

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裸大麦地方品种苗期耐盐性筛选和鉴定指标研究

2

作者 刘世森 杨华 +7 位作者 郭珍珠 冯世纪 张述伟 郭桂梅 周龙华 刘成洪 杜志钊 陈志伟 《大麦与谷类科学》 2024年第6期29-36,共8页

盐胁迫是作物生产面临的主要非生物逆境之一,而裸大麦作为一种耐盐性较强作物,在改良盐碱土壤和保障粮食安全上具有潜在价值。以18个上海裸大麦地方品种为材料,在苗期调查株高、根长、根干质量和地上部干质量4个形态学指标以及w(Na+)、w... 盐胁迫是作物生产面临的主要非生物逆境之一,而裸大麦作为一种耐盐性较强作物,在改良盐碱土壤和保障粮食安全上具有潜在价值。以18个上海裸大麦地方品种为材料,在苗期调查株高、根长、根干质量和地上部干质量4个形态学指标以及w(Na+)、w(K+)和w(Na+)/w(K+)等生理指标,进行耐盐性筛选与鉴定。方差分析表明,各性状在品种间和不同处理条件间差异均表现出高度统计学意义(P<0.01),并且除株高外,其余各性状在不同处理与品种间的互作也达到极显著水平(P<0.01)。变异系数分析表明,干质量相关指标的变异系数较大,并且株高、w(K+)和w(Na+)/w(K+)的变异系数在盐胁迫下升高了,而其余性状则降低了。相关性分析表明,在正常和盐胁迫条件下,根长、株高和地上部干质量间都呈极显著正相关;而w(Na+)、w(K+)仅分别与w(Na+)/w(K+)呈极显著正相关或负相关。研究获得了2个耐盐性较强的裸大麦品种,探讨了钠、钾相关性状与裸大麦耐盐性的关系。 展开更多

关键词 裸大麦 耐盐性 干质量 w(Na+)/w(K+)

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大麦单粒种子起源的小孢子培养再生频率研究 被引量：4

3

作者 郭桂梅 何婷 +6 位作者 刘成洪 高润红 徐红卫 李颖波 黄剑华 王亦菲 陆瑞菊 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期155-162,共8页

为提高单株小孢子培养的再生效率,以大麦品种花30为材料,在人工气候室研究了离体穗、离体小花预处理时间和诱导培养基中无机氮、有机氮含量以及添加PEG对愈伤组织产量、绿苗产量和再生能力的影响。结果表明,离体穗5℃处理19 d的愈伤组... 为提高单株小孢子培养的再生效率,以大麦品种花30为材料,在人工气候室研究了离体穗、离体小花预处理时间和诱导培养基中无机氮、有机氮含量以及添加PEG对愈伤组织产量、绿苗产量和再生能力的影响。结果表明,离体穗5℃处理19 d的愈伤组织和绿苗产量及再生能力均优于32 d的,离体小花预处理1～2 d可促进愈伤组织的形成和绿苗的分化;降低无机氮浓度[KNO_3降至707.5 mg·L^(-1),(NH_4)_2SO_4降至115.75 mg·L^(-1)]可提高愈伤组织和绿苗产量及再生能力;提高有机氮浓度(谷氨酰胺从400 mg·L^(-1)提高到1 600 mg·L^(-1),水解酪蛋白从100 mg·L^(-1)提高到400 mg·L^(-1))可增加小孢子愈伤组织和绿苗产量;培养基中添加4%PEG可提高小孢子愈伤组织产量和质量。 展开更多

关键词 大麦 单株 小孢子培养 愈伤组织产量 绿苗产量

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利用青花菜单倍体茎尖筛选耐热变异体 被引量：9

4

作者 陆瑞菊 王亦菲 +2 位作者 孙月芳 周润梅 黄剑华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期388-391,370,共5页

用平阳霉素对青花菜“上海4号”和“东村交配”的单倍体茎尖进行诱变处理,以高温作为选择压力,获得一批耐热性明显比原始品种提高的单倍体变异体。经过染色体加倍后,通过热胁迫条件下电导率的测定,筛选出9份细胞膜热稳定性比原始品种明... 用平阳霉素对青花菜“上海4号”和“东村交配”的单倍体茎尖进行诱变处理,以高温作为选择压力,获得一批耐热性明显比原始品种提高的单倍体变异体。经过染色体加倍后,通过热胁迫条件下电导率的测定,筛选出9份细胞膜热稳定性比原始品种明显提高的变异体材料。 展开更多

关键词 青花菜 单倍体茎尖 平阳霉素 热胁迫 电导率 耐热变异体

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低氮胁迫下大麦谷氨酰胺酶基因的表达分析 被引量：12

5

作者 陈志伟 陆瑞菊 +6 位作者 王亦菲 何婷 杜志钊 高润红邹 磊单 丽丽 黄剑华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1182-1184,1207,共4页

谷氨酰胺酶是氮代谢中的关键酶,在氨同化和谷氨酰胺生物合成中起着重要的作用。为研究谷氨酰胺酶基因在大麦耐低氮中的作用机理,本研究利用荧光定量PCR技术检测了大麦中这两类谷氨酰胺酶基因(GS1和GS2)在低氮胁迫下的表达情况,并分析了... 谷氨酰胺酶是氮代谢中的关键酶,在氨同化和谷氨酰胺生物合成中起着重要的作用。为研究谷氨酰胺酶基因在大麦耐低氮中的作用机理,本研究利用荧光定量PCR技术检测了大麦中这两类谷氨酰胺酶基因(GS1和GS2)在低氮胁迫下的表达情况,并分析了谷氨酰胺酶基因在耐低氮大麦基因型BI-04和低氮敏感大麦基因型BI-45间的表达差异。结果表明,GS1基因在BI-04中表现为上调表达,而在BI-45中表现为下调表达,但随着时间的延长其表达量恢复并超过对照;而GS2基因在两种大麦基因型中的表达差不多,都表现为下调表达。另外,本文也观察到大麦谷氨酰胺酶基因的表达在黑暗条件下受到抑制,因此推测其也受到光照条件的影响。 展开更多

关键词 大麦 谷氨酰胺酶基因 耐低氮 荧光定量反转录PCR

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诱变结合小孢子培养创制大麦黄花叶病不同抗性突变体 被引量：7

6

作者 刘成洪 陆瑞菊 +8 位作者 郭桂梅 黄亦辰 杜志钊 何婷 陈志伟 徐红卫 高润红 王亦菲 黄剑华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2065-2070,共6页

为了创制具有不同黄花叶病抗性的大麦突变体材料,对大麦品种花30的干种子和游离小孢子分别采用物理和化学诱变处理,结合小孢子培养技术获得了一批纯合稳定的加倍单倍体(double haploid,DH)株系,并利用黄花叶病种植鉴定圃进行突变体DH株... 为了创制具有不同黄花叶病抗性的大麦突变体材料,对大麦品种花30的干种子和游离小孢子分别采用物理和化学诱变处理,结合小孢子培养技术获得了一批纯合稳定的加倍单倍体(double haploid,DH)株系,并利用黄花叶病种植鉴定圃进行突变体DH株系的大田抗性筛选与鉴定,比较2种诱变方式结合小孢子培养的诱变效果。结果表明:以400 Gy剂量60Co-γ射线处理干种子诱变方式对小孢子培养的愈伤组织诱导能力和绿苗成活率有较大影响,获得的大部分株系(84.2%)对黄花叶病表现感病(感病或高感),未筛选到比亲本抗性增强(高抗)的材料;以3 mg·L-1剂量EMS处理游离小孢子诱变方式对小孢子培养相对影响较小,筛选到少量(5.5%)比亲本抗性增强(高抗)的株系,只有近1/3的材料(31.1%)表现为感病(感病或高感),进一步鉴定筛选到2份高感和1份高抗黄花叶病的大麦突变体材料。综上所述,EMS处理游离小孢子结合小孢子培养诱变效果较好。本研究为利用大麦黄花叶病抗性突变体材料进行其抗病机理研究奠定了基础。 展开更多

关键词 大麦 ^60CO-Γ射线辐照 甲基磺酸乙酯诱变 小孢子培养 黄花叶病抗性

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盐预处理对大麦种子萌发和小孢子愈伤形成的影响 被引量：4

7

作者 徐红卫 郭桂梅 +7 位作者 高润红 何婷 杜志钊 李静 陈志伟 陆瑞菊 王亦菲 刘成洪 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期123-129,共7页

为探究盐预处理对大麦种子萌发和小孢子培养的影响,以大麦耐盐品种花11和盐敏感品种花30为材料,比较了它们在不同盐浓度预处理下,种子萌发过程中的发芽率、主根长以及小孢子培养过程中的愈伤组织产量差异,同时对2个品种在小孢子时期响... 为探究盐预处理对大麦种子萌发和小孢子培养的影响,以大麦耐盐品种花11和盐敏感品种花30为材料,比较了它们在不同盐浓度预处理下,种子萌发过程中的发芽率、主根长以及小孢子培养过程中的愈伤组织产量差异,同时对2个品种在小孢子时期响应盐胁迫的4个关键基因的表达进行了研究。结果显示:花30的种子和小孢子在无NaCl和低浓度NaCl预处理时,对盐胁迫的耐受性均低于花11,但经高浓度NaCl(萌发期为15 g/L,小孢子时期为300 mg/L)预处理后,花30的种子和小孢子对高浓度盐胁迫的耐受性均显著增强,且发芽率、主根长和愈伤产量均显著高于花11;通过对2个品种在盐预处理下的发芽率、主根长以及愈伤产量相对值的相关性分析发现,2个品种在种子萌发期和小孢子时期响应盐预处理的相对值呈显著正相关。同时,在小孢子培养阶段,经过300 mg/L NaCl预处理后,花30中小热激蛋白基因HvsHSP1和翻译起始因子1基因HveIF1A的表达量在高浓度盐胁迫下较花11显著上调。因此,供试品种间在种子萌发过程和小孢子培养过程对盐预处理的响应差异在某种程度上可能具有一致性,HvsHSP1和HveIF1A基因可能与盐敏感品种在小孢子时期响应NaCl盐诱导存在关系。 展开更多

关键词 大麦 盐胁迫 盐预处理 光锋作物 小孢子培养

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NaCl处理对高、低芥酸油菜种子萌发和离体茎尖生长的影响 被引量：4

8

作者 王亦菲 黄剑华 +1 位作者 陆瑞菊 周润梅 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期762-765,共4页

以2份高芥酸油菜绵油13号、高芥4号和2份低芥酸油菜绵恢PS-1-2、绵恢8号为试验供体材料,观察了组织培养条件下,NaCl胁迫对高、低芥酸油菜种子萌发和离体茎尖生长的影响。结果表明:经4g/L NaCl浸种和培养基中添加10g/L NaCl均对种子萌发... 以2份高芥酸油菜绵油13号、高芥4号和2份低芥酸油菜绵恢PS-1-2、绵恢8号为试验供体材料,观察了组织培养条件下,NaCl胁迫对高、低芥酸油菜种子萌发和离体茎尖生长的影响。结果表明:经4g/L NaCl浸种和培养基中添加10g/L NaCl均对种子萌发率产生抑制作用,且高芥酸油菜种子的萌发率明显高于低芥酸油菜。比较2种方式浸种11d的萌发率,为4g/L NaCl浸种的低芥酸油菜材料高于无菌水浸种的材料,高芥酸油菜的表现则相反。培养基中添加6g/L NaCl对离体培养茎尖的存活率产生明显的抑制作用,高芥酸油菜茎尖生长的受抑制程度明显低于低芥酸油菜。可以得出结论,供试的高芥酸油菜在萌发和离体培养阶段的耐NaCl性明显优于低芥酸油菜。 展开更多

关键词 油菜 高芥酸 低芥酸 NACL胁迫 萌发

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大麦旗叶距对小孢子发育时期、愈伤组织诱导以及绿苗再生的影响 被引量：3

9

作者 高润红 郭桂梅 +4 位作者 何婷 杜志钊 任金宝 刘成洪 陆瑞菊 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期36-41,共6页

[目的]为提高大麦游离小孢子培养效率,在幼穗取材时建立更为精细的形态学指标,以获得更多处于适宜时期的小孢子进行培养。[方法]以大麦(Hordeum vulgare L.)品种‘花30’为材料,将同一天取材的幼穗根据旗叶与倒2叶的叶耳间距离(旗叶距)... [目的]为提高大麦游离小孢子培养效率,在幼穗取材时建立更为精细的形态学指标,以获得更多处于适宜时期的小孢子进行培养。[方法]以大麦(Hordeum vulgare L.)品种‘花30’为材料,将同一天取材的幼穗根据旗叶与倒2叶的叶耳间距离(旗叶距)分为6组,观察每组材料低温处理前、后小孢子发育时期的变化,研究不同旗叶距对小孢子愈伤组织诱导及绿苗再生的影响,鉴定不同分组材料来源的小孢子再生植株的倍性。[结果]取材当天的幼穗不论旗叶距大小,所有游离的小孢子均处于单核期;而低温处理17 d后,处于单核时期的小孢子比例随旗叶距的增大而显著降低。随旗叶距增大,小孢子愈伤产量提高但差异不显著;而绿苗分化数量却显著降低。按旗叶距分组获得的小孢子再生植株不同倍性比例分布相近,二倍体占70%左右,单倍体和四倍体为30%左右。对于‘花30’而言,0.5~2.0 cm旗叶距的小孢子再生绿苗数量最高。[结论]旗叶距可作为大麦小孢子培养中幼穗取材的一个形态学指标,适宜的旗叶距可确保低温处理后获得更多单核时期游离小孢子和更高的再生绿苗数量。 展开更多

关键词 大麦 旗叶距 小孢子 愈伤诱导 再生能力

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抗病转基因水稻M12及其产品成分的定性、定量PCR检测方法 被引量：2

10

作者 李鹏 张琳 +4 位作者 叶吉妮 贺诗瑶 贾军伟 潘爱虎 唐雪明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期949-955,共7页

通过定性PCR扩增了转基因水稻M12转化体特异性片段和水稻内标基因(sps)片段,将PCR产物酶切连接后构建到T载体,得到适于转基因水稻M12品系特异性PCR检测的质粒分子p M12,建立了事件特异性定性、定量PCR检测方法。定性PCR结果表明,本方法... 通过定性PCR扩增了转基因水稻M12转化体特异性片段和水稻内标基因(sps)片段,将PCR产物酶切连接后构建到T载体,得到适于转基因水稻M12品系特异性PCR检测的质粒分子p M12,建立了事件特异性定性、定量PCR检测方法。定性PCR结果表明,本方法可特异性检测出M12,检测限可达100拷贝单倍体水稻基因组;定量PCR结果表明,M12和sps定量PCR标准曲线R2为0.998和0.997,扩增效率为95.3%和108.4%,重复性分析标准偏差范围为0.043~0.276,定量极限和检测极限可达100和10拷贝。对转基因含量为1.0%的混合样品定量结果的相对偏差在8.0%以内。本研究建立的方法可用于转基因水稻M12及其加工产品成分的检测。 展开更多

关键词 品系特异性 定性PCR 定量PCR M12

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小白菜耐盐变异体的诱导及离体筛选 被引量：1

11

作者 王亦菲 黄剑华 +3 位作者 陆瑞菊 陈志伟 何婷 周润梅 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期951-957,963,共8页

以3份优良小白菜品种为供试材料,研究了培养基中不同NaCl浓度对种子萌发和茎端组织存活及生长的影响;不同平阳霉素浓度及不同时间的处理对种子萌发和茎端组织存活及生长的影响。结果表明:供试种子的萌发率和茎端组织的存活率随培养基中N... 以3份优良小白菜品种为供试材料,研究了培养基中不同NaCl浓度对种子萌发和茎端组织存活及生长的影响;不同平阳霉素浓度及不同时间的处理对种子萌发和茎端组织存活及生长的影响。结果表明:供试种子的萌发率和茎端组织的存活率随培养基中NaCl浓度的上升急剧下降,平阳霉素处理对茎端组织存活率的抑制明显大于对种子萌发率的影响,平阳霉素处理后存活的种子和茎端组织经NaCl胁迫筛选,筛选出耐NaCl胁迫力明显提高的存活苗,存活苗经无性繁殖,可以保持较高的耐NaCl能力。 展开更多

关键词 小白菜 NACL胁迫 平阳霉素 种子萌发 茎端组织 耐盐变异体

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大麦赤霉病抗性不同突变体的创制及其相关基因表达 被引量：1

12

作者 高润红 马运涛 +10 位作者 方春燕 刘成洪 李颖波 陈志伟 何婷 郭桂梅 黄赛华 徐红卫 王亦菲 陆瑞菊 黄剑华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期417-423,共7页

为了快速创制大麦赤霉病抗性存在差异的加倍单倍体(DH)株系,采用单花滴注法和喷雾法对诱变结合小孢子培养的379份大麦DH株系和原始品种花30的赤霉病抗扩展性和抗侵染性进行评价,同时对获得的抗性突变体材料和花30进行赤霉菌诱导下的大... 为了快速创制大麦赤霉病抗性存在差异的加倍单倍体(DH)株系,采用单花滴注法和喷雾法对诱变结合小孢子培养的379份大麦DH株系和原始品种花30的赤霉病抗扩展性和抗侵染性进行评价,同时对获得的抗性突变体材料和花30进行赤霉菌诱导下的大麦病程相关基因非表达子(NPR1、NPR2、NPR3)、茉莉酸介导的植物防御的调控因子(JAV1)以及乙烯响应因子(ERF1)的基因表达分析。结果表明,通过连续2年大田人工接种鉴定,从中获得了5份抗扩展性和抗侵染性均优于花30的候选株系,9份抗扩展性和抗侵染性均劣于花30的候选株系;赤霉病抗性突变体A1-190与原始品种花30在上述基因表达上存在明显差异,推测这些基因的表达与其抗病性的变化相关。研究结果表明诱变结合小孢子培养可以创制的DH株系在大麦赤霉病抗性存在差异。本研究结果为大麦抗赤霉病基因定位克隆及分子育种奠定了材料基础。 展开更多

关键词 大麦 赤霉病 纯合突变体 基因表达

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水稻F_(1)小孢子培养再生DH系的耐盐性鉴定及稻米品质分析 被引量：2

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作者 代金英 郭桂梅 +6 位作者 程新杰 刘成洪 岳红亮 张梦龙 宛柏杰 孙一标 孙明法 《大麦与谷类科学》 2022年第6期1-5,10,共6页

以水稻种质M8G与韭菜青杂交的F_(1)代经小孢子培养技术得到的34份DH株系为供试材料,进行耐盐性鉴定及稻米品质分析。结果表明:对DH株系及其亲本进行分蘖期—成熟期耐盐性评价,耐盐等级达1级的材料1份,达3级的材料10份,达5级的材料12份,... 以水稻种质M8G与韭菜青杂交的F_(1)代经小孢子培养技术得到的34份DH株系为供试材料,进行耐盐性鉴定及稻米品质分析。结果表明:对DH株系及其亲本进行分蘖期—成熟期耐盐性评价,耐盐等级达1级的材料1份,达3级的材料10份,达5级的材料12份,达7级的材料12份,达9级的材料1份。对DH株系及其亲本的稻米品质性状进行分析,DH株系及其亲本的水份、蛋白质质量分数、直链淀粉质量分数、透明度、垩白粒率、垩白度的变异系数分别为2.00%、13.00%、6.00%、43.03%、48.96%、88.85%。水稻DH株系及其亲本的稻米品质性状之间具有一定的相关性。通过聚类分析将36份材料的品质性状分成4大类。第Ⅳ类材料直链淀粉和蛋白质质量分数最高。综合DH株系及其亲本分蘖期—成熟期耐盐性评价和稻米品质分析发现,分蘖期—成熟期耐盐性较好的材料大部分在第Ⅳ类。 展开更多

关键词 水稻 小孢子培养 耐盐性鉴定 稻米品质 聚类分析

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