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超声波直接转导外源基因转化八棱海棠的技术研究 被引量:3
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作者 丛郁 渠慎春 +2 位作者 乔玉山 姚泉洪 章镇 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期42-46,共5页
应用超声波直接转导法,对八棱海棠进行rolC基因转化,同时,利用gus基因瞬间表达的方法研究了超声波处理时间、处理功率和转化缓冲液中二甲基亚砜(DMSO)对rolC基因转化率的影响。结果表明:当DMSO为5%(体积分数)时,用80 W功率处理20 min,... 应用超声波直接转导法,对八棱海棠进行rolC基因转化,同时,利用gus基因瞬间表达的方法研究了超声波处理时间、处理功率和转化缓冲液中二甲基亚砜(DMSO)对rolC基因转化率的影响。结果表明:当DMSO为5%(体积分数)时,用80 W功率处理20 min,能够获得最佳的转化效果。在超声波最佳处理条件下转化486个八棱海棠叶片,共得到237个抗性愈伤组织和9株抗性苗,转化率为1.85%。GUS染色、PCR及Southern blotting检测结果显示,有8个八棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源rolC基因。 展开更多
关键词 八棱海棠 超声波转化 ROLC基因
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美国加州农业生产与农业研究的现状及特点 被引量:2
2
作者 郑玉生 张智奇 王少鸥 《上海农业学报》 CSCD 2003年第4期115-119,共5页
美国加州农业生产世界闻名。加州农业的成功取决于深入的农业研究和产、学、研相结合的re search development production(RDP)模式 ,它为大学、科研院所与农民之间提供了有机连接。学习和借鉴美国加州农业的先进技术与经验将有利于促... 美国加州农业生产世界闻名。加州农业的成功取决于深入的农业研究和产、学、研相结合的re search development production(RDP)模式 ,它为大学、科研院所与农民之间提供了有机连接。学习和借鉴美国加州农业的先进技术与经验将有利于促进上海地区和我国农业现代化的进程。因此 ,作者在介绍加州农业生产的现状和特点的同时 ,还就我国农业如何借鉴国外有益经验提出了若干建议。 展开更多
关键词 美国加州 农业 生产 科学研究 research—developmentt-production RDP 大学 科研院所 农民 上海地区 中国 农业现代化 经济作物 出口 观光农业 集团化经营
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磁化水灌溉番茄的效果研究 被引量:13
3
作者 韩佩来 王少鸥 +2 位作者 沈建英 时文兴 张保国 《上海农业学报》 CSCD 2004年第4期50-52,共3页
以“日本桃太郎”番茄品种为供试材料 ,定植后用美科能磁化水装置 (香港资讯自控科技有限公司提供 )处理的磁化水浇灌。实验结果表明 :(1)用磁化水浇灌番茄 ,对其园艺性状有影响 ,与对照组比较发根数增加了 3.5条、达 2 1% ,茎粗增加了 ... 以“日本桃太郎”番茄品种为供试材料 ,定植后用美科能磁化水装置 (香港资讯自控科技有限公司提供 )处理的磁化水浇灌。实验结果表明 :(1)用磁化水浇灌番茄 ,对其园艺性状有影响 ,与对照组比较发根数增加了 3.5条、达 2 1% ,茎粗增加了 0 .32cm、达 19.87% ,对其它性状也有不同程度的影响。 (2 )用磁化水浇灌番茄 ,其产量有较大的增产 ,每公顷比对照增产 6 5 73.2 7kg ,增产幅度达 10 .4 6 % ,达到极显著水平。 (3)用磁化水浇灌番茄 ,对其品质有明显改善 ,灰分、磷和粗蛋白含量明显提高 ,维生素C和可溶性固形物略有增加 ,而粗纤维、脂肪有下降的趋势。 展开更多
关键词 磁化水 灌溉 番茄 园艺性状 产量 品质
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通过DNA改组技术获得高活性β-葡萄糖苷酸酶 被引量:5
4
作者 熊爱生 姚泉洪 +3 位作者 彭日荷 陈建民 李贤 范惠琴 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期162-167,共6页
β 葡萄糖苷酸酶是在植物转基因中广泛应用的报告基因 .以质粒pBI12 1中的GUS基因为基础 ,利用DNA改组方法 ,经DNaseⅠ降解 ,PrimerlessPCR ,PrimerPCR对GUS基因进行了突变和改组 ,然后将改组的GUS基因连接到原核表达载体pG2 5 1中 ,构... β 葡萄糖苷酸酶是在植物转基因中广泛应用的报告基因 .以质粒pBI12 1中的GUS基因为基础 ,利用DNA改组方法 ,经DNaseⅠ降解 ,PrimerlessPCR ,PrimerPCR对GUS基因进行了突变和改组 ,然后将改组的GUS基因连接到原核表达载体pG2 5 1中 ,构建了库容为 10 8的突变体库 .经过活性的筛选 ,得到活性提高的克隆 ,再以此为基础 ,经过新的改组、筛选得到活性大幅度提高的克隆GUS2 4 .基因测序显示 ,GUS2 4与GUS基因之间的同源性为 99 7% ,共有 6个核苷酸位点发生了改变 ,分别是 :379位的A突变为G ,396位的T突变为C ,711位的G突变为A ,95 8位T突变为C ,990位的T突变为C ,1649位的A突变为G .核苷酸序列推导的氨基酸序列显示 ,3个氨基酸发生了突变 ,12 7位的Ser突变为Gly ,32 0位的Trp突变为Arg ,5 5 0位的Asn突变为Ser.X gluc染色检测和荧光测活结果显示GUS2 4基因表达的 β 葡萄糖苷酸酶基较GUS基因表达产物活性提高 展开更多
关键词 β-葡萄糖苷酸酶 植物 转基因 报告基因 DNA改组技术 酶活性 体外分子进化
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霍山石斛细胞再生物的诱导和培养 被引量:6
5
作者 王亦菲 陆瑞菊 +2 位作者 孙月芳 周润梅 黄剑华 《上海农业学报》 CSCD 2004年第4期8-10,共3页
以野生霍山石斛 (DendrobiumhuoshanenseC .Z .TangetS .J .Cheng)茎尖及带芽点的节段为外植体 ,研究了基本培养基、各种激素对细胞团的诱导及分化作用 ,确定了以MS为基本培养基与 6 BA、NAA配合使用进行诱导 ;以大量元素减半 ,并降低... 以野生霍山石斛 (DendrobiumhuoshanenseC .Z .TangetS .J .Cheng)茎尖及带芽点的节段为外植体 ,研究了基本培养基、各种激素对细胞团的诱导及分化作用 ,确定了以MS为基本培养基与 6 BA、NAA配合使用进行诱导 ;以大量元素减半 ,并降低蔗糖浓度至 2 0 %的MS培养基进行分化 ,获得了大量再生芽簇。 展开更多
关键词 霍山石斛 细胞再生物 诱导 增殖 分化
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韩国特种稻米的研究和利用现状与展望 被引量:5
6
作者 李胜源 金胜男 +4 位作者 朴钟泽 沈革志 袁勤 顾琳珠 袁洁萍 《上海农业学报》 CSCD 2002年第B12期47-52,共6页
介绍了韩国特种稻米 (功能米 )育种研究、利用现状及近几年育成的主要特种稻新品种 (系 )和目前韩国市场上销售的特种米产品、特点与用途 。
关键词 遗传性状 分子标记 韩国 特种稻米 利用现状
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发根农杆菌Ri质粒转化康乃馨初步研究 被引量:2
7
作者 范惠琴 姚泉洪 +2 位作者 彭日荷 黄晓敏 李贤 《上海农业学报》 CSCD 2001年第1期35-38,共4页
利用具有Ri质粒的发根农杆菌 (Agrobacteriumrhizogenes)Pri15834对康乃馨组培苗的带叶茎节进行转化试验。转化后的外植体在K0 附加 50 0mg/L羧苄青霉素培养基上培养 2~ 3周后 ,受感染的伤口部位长出无向地性的毛状根 ,频率为 37.0 7%... 利用具有Ri质粒的发根农杆菌 (Agrobacteriumrhizogenes)Pri15834对康乃馨组培苗的带叶茎节进行转化试验。转化后的外植体在K0 附加 50 0mg/L羧苄青霉素培养基上培养 2~ 3周后 ,受感染的伤口部位长出无向地性的毛状根 ,频率为 37.0 7%。将毛状根切碎分别在K0 、K1、K2 培养基上继续培养 3周 ,毛状根在K0 上表现为无限生长 ,在K1上主要表现为长愈伤组织 ,频率为 51.4 2 % ,而在K2 上则主要表现为长绿苗 ,频率为 2 5%。 展开更多
关键词 康乃馨 发根农杆菌 RI质粒 毛状根 转化
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禾谷类作物外源基因导入及表达的研究进展 被引量:8
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作者 褚启人 叶承道 《上海农业学报》 CSCD 1991年第1期90-96,共7页
本文就国际上八十年代植物重组DNA在单子叶作物上的研究作了综述。介绍了水稻、小麦、玉米等不同物种的转基因系统。阐述了化学导入法(PEG)、电穿孔法、注射法,粒子轰击法、花粉管萌导法及使用其它载体系统的成功实例。评价了上述技术... 本文就国际上八十年代植物重组DNA在单子叶作物上的研究作了综述。介绍了水稻、小麦、玉米等不同物种的转基因系统。阐述了化学导入法(PEG)、电穿孔法、注射法,粒子轰击法、花粉管萌导法及使用其它载体系统的成功实例。评价了上述技术在外源基因导入单子叶作物的利弊。 展开更多
关键词 禾谷类作物 外源基因导入 PEG
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杂交粳稻亲本随机扩增多态性DNA(RAPD)分析(研究简报) 被引量:4
9
作者 梁婉琪 黄亚红 +6 位作者 潘爱虎 曾令珂 张大兵 袁勤 全立勇 曹黎明 倪林娟 《上海农业学报》 CSCD 2001年第2期33-36,共4页
选用 6 0个随机引物对 15份杂交粳稻亲本材料进行了RAPD分析 ,其中 10种引物的扩增结果具有明显的多态性。在这 15份杂交粳稻亲本材料中共扩增得到 153条条带 ,其中的86条为多态性条带。聚类分析结果表明 ,所有供试材料可以被明确区分... 选用 6 0个随机引物对 15份杂交粳稻亲本材料进行了RAPD分析 ,其中 10种引物的扩增结果具有明显的多态性。在这 15份杂交粳稻亲本材料中共扩增得到 153条条带 ,其中的86条为多态性条带。聚类分析结果表明 ,所有供试材料可以被明确区分。在此基础上分析了这15个水稻品种的亲缘关系 ,对田间育种有一定的参考价值。 展开更多
关键词 杂交粳稻 RAPD分析 亲本选育
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应用花药培养选育适应上海生态环境的粳稻光敏核不育系 被引量:3
10
作者 杨竹平 赵全发 褚启人 《上海农业学报》 CSCD 1995年第4期34-40,共7页
1990年以粳型光敏核不育系7001S、5047S、5088S、农垦58S为母本,常规粳稻品种或高代品系为父本配制杂种F1,翌年进行花药培养,获得二倍体花粉植株群体。各组合(PGMSR/粳稻)F1的花粉植株在海南岛短... 1990年以粳型光敏核不育系7001S、5047S、5088S、农垦58S为母本,常规粳稻品种或高代品系为父本配制杂种F1,翌年进行花药培养,获得二倍体花粉植株群体。各组合(PGMSR/粳稻)F1的花粉植株在海南岛短日条件下育性正常。在上海自然长日条件下育性表现明显的分离,不育与可育花粉植株之比符合1:3。(PGMSR/粳稻)各组合杂种F1的自交F2群体在上海自然长日条件下不育株与可育株分离比符合1:15。表明粳型光敏核不育水稻雄性不育性受控于2对隐性主效基因。从这些杂种F1花药培养后代群体中选育出15个农艺性状较好,具有明显的育性转换期的光敏核不育花粉株系。分期播种后,大多数于8月上中旬始穗,9月2~9日从不育转为可育,不育期长,不育期内不育性彻底。在上海可以安全制种和繁殖,并具有矮秆、株型较佳、抗稻瘟病和白叶枯病等优点,为利用亚种间杂种优势提供了优良种质。这也表明花药培养是研究光敏核不育水稻雄性不育性遗传及转育光敏核不育基因,快速选育适应上海生态环境的粳型光敏核不育系的有效方法。 展开更多
关键词 光敏核雄性不育 粳稻 花药培养 育性转换 遗传
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大麦细胞工程育种研究的一些进展 被引量:6
11
作者 黄剑华 《上海农业学报》 CSCD 1998年第4期92-96,共5页
综述了大麦花药培养技术和体细胞无性系变异技术在大麦遗传育种中应用的一些新进展。并对大麦小孢子培养,细胞悬浮培养,原生质体培养和原生质体融合研究的最新进展作了简要介绍。
关键词 大麦 花药培养 无性系变异 育种 细胞工程
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农杆菌转染的植物病理学研究和应用状况
12
作者 叶承道 褚启人 《上海农业学报》 CSCD 1992年第1期91-96,共6页
近几年来,农转染(Agroinfection)已被国际上用作抗病基因导入植物的方法。以根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)Ti质粒为载体,将抗性基因插入T-DNA,经转染导入植物细胞,并在核中发生整合,再经逆转录或重组产生有侵染性的病毒分子,... 近几年来,农转染(Agroinfection)已被国际上用作抗病基因导入植物的方法。以根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)Ti质粒为载体,将抗性基因插入T-DNA,经转染导入植物细胞,并在核中发生整合,再经逆转录或重组产生有侵染性的病毒分子,向整株扩散。该法已成为双子叶及部分单子叶植物转病毒基因的重要途径,可避免使用昆虫媒介转染,也不必用离体病毒核酸作为侵染源,是一种具有潜力的转基因方法。 展开更多
关键词 农转染 根癌农杆菌 植物病理学
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石刁柏花培品系后代农艺性状的初步研究
13
作者 韩佩来 祝明福 《上海农业学报》 CSCD 2000年第3期61-63,共3页
通过对石刁柏四个品种花药培养后代 38个株系的初步研究 ,考察产量与出茎数、茎长、茎粗的相关性。结果表明 :1)花粉植株间的分离较小 ,性状间相关性的可靠性大于品种间植株的相关性。 2 )产量与三个性状的相关性都很显著 ,但依次为 :... 通过对石刁柏四个品种花药培养后代 38个株系的初步研究 ,考察产量与出茎数、茎长、茎粗的相关性。结果表明 :1)花粉植株间的分离较小 ,性状间相关性的可靠性大于品种间植株的相关性。 2 )产量与三个性状的相关性都很显著 ,但依次为 :出茎数 ,茎粗 ,茎长。出茎数与茎粗也相关密切。 3)在培育粗茎的基础上提高出茎数可以显著提高石刁柏产量。 展开更多
关键词 石刁柏 相关性 农艺性状 花药培养品系 品种选育
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高通量筛选蛋白质突变体库方法的研究进展 被引量:1
14
作者 黄国庆 姚泉洪 《上海农业学报》 CSCD 2004年第2期20-23,共4页
定向进化已经被广泛用于修饰和加强蛋白质性能的研究。蛋白质突变体库筛选方法的改变和完善进一步加强了定向进化技术在理解和设计新蛋白质实验中的运用。近年来报道了许多新的高通量筛选方法 ,这些方法已经越来越多地用于蛋白质工程的... 定向进化已经被广泛用于修饰和加强蛋白质性能的研究。蛋白质突变体库筛选方法的改变和完善进一步加强了定向进化技术在理解和设计新蛋白质实验中的运用。近年来报道了许多新的高通量筛选方法 ,这些方法已经越来越多地用于蛋白质工程的研究 ,并且解决了此领域中一些具有争论性的前沿问题。 展开更多
关键词 蛋白质 突变体库 定向进化 高通量筛选 流式细胞术
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优质特种西瓜规范化栽培技术要点
15
作者 祝明福 韩佩来 《上海蔬菜》 1999年第1期27-28,共2页
西瓜是人们夏天最喜欢的消暑解渴果品。果实汁多味甜爽口,一般含糖量在11—13度,并含有多种维生素、矿物盐,有利尿、治肾脏病的功效。我国西瓜栽培面积在100万hm^2左右。随着人民生活水平的提高,人们对优质特种西瓜的需求越来越大。
关键词 西瓜 优质特种 栽培 催芽 播种 育苗 生育管理
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大麦花药离体诱变及铝胁迫下的培养反应 被引量:11
16
作者 孙月芳 陆瑞菊 +2 位作者 王亦菲 周润梅 黄剑华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期95-98,共4页
2份大麦品系的离体麦穗经辐照处理后 ,其花药在铝胁迫培养基上诱导愈伤组织 ,愈伤组织在铝胁迫培养基上进行分化。试验结果表明 ,离体麦穗辐照处理显著降低花药离体培养的愈伤组织诱导率和而后的绿苗分化率 ,诱导培养基中的较高铝浓度... 2份大麦品系的离体麦穗经辐照处理后 ,其花药在铝胁迫培养基上诱导愈伤组织 ,愈伤组织在铝胁迫培养基上进行分化。试验结果表明 ,离体麦穗辐照处理显著降低花药离体培养的愈伤组织诱导率和而后的绿苗分化率 ,诱导培养基中的较高铝浓度胁迫降低愈伤组织诱导率 ,分化培养基中的铝胁迫降低绿苗分化率。辐照处理后花药在铝胁迫培养基上诱导形成愈伤组织并在铝胁迫培养基上分化形成绿苗。 展开更多
关键词 铝胁迫 离体诱变 大麦 愈伤组织诱导率 绿苗分化率 反应 辐照处理 花药离体培养 诱导培养基 分化培养基 试验结果 诱导形成 铝浓度 麦穗 迫降
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不同基因型大麦离体培养花药对赤霉病菌粗毒素的反应 被引量:7
17
作者 孙月芳 陆瑞菊 +2 位作者 王亦菲 周润梅 黄剑华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期172-174,共3页
研究了在离体培养条件下,大麦耐、感赤霉病基因型花药对赤霉病菌粗毒素的反应。结果表明:随着赤霉病菌粗毒素预处理浓度的提高,大麦花药愈伤组织诱导率降低,愈伤组织的绿苗分化率降低。耐病基因型的愈伤组织诱导率和绿苗分化率的降低幅... 研究了在离体培养条件下,大麦耐、感赤霉病基因型花药对赤霉病菌粗毒素的反应。结果表明:随着赤霉病菌粗毒素预处理浓度的提高,大麦花药愈伤组织诱导率降低,愈伤组织的绿苗分化率降低。耐病基因型的愈伤组织诱导率和绿苗分化率的降低幅度均小于感病材料。说明大麦个体水平的耐、感赤霉病性与花药水平对赤霉病粗毒素反应具有一致性。 展开更多
关键词 赤霉病菌 粗毒素 基因型 花药 大麦 反应 愈伤组织诱导率 绿苗分化率 离体培养条件 预处理 低幅度 一致性 水平 感病 耐病 病性
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植物遗传转化的新方法:Floral Dip 被引量:16
18
作者 徐芳 熊爱生 +2 位作者 彭日荷 侯喜林 姚泉洪 《中国蔬菜》 北大核心 2005年第3期29-31,共3页
目前,遗传转化效率低一直制约着许多作物的分子育种和基因功能研究。Floraldip技术已成为模式植物拟南芥遗传转化的主要手段,该方法在十字花科植物中有广阔的应用前景。本文介绍了此种方法的发展过程和技术原理,并对进一步的研究工作提... 目前,遗传转化效率低一直制约着许多作物的分子育种和基因功能研究。Floraldip技术已成为模式植物拟南芥遗传转化的主要手段,该方法在十字花科植物中有广阔的应用前景。本文介绍了此种方法的发展过程和技术原理,并对进一步的研究工作提出了建议。 展开更多
关键词 植物 遗传转化 FLORAL Dip技术 技术原理 农杆菌介导 蘸花法 拟南芥
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观赏水草的离体培养 被引量:25
19
作者 孙月芳 陆瑞菊 +1 位作者 周润梅 王亦菲 《上海农业学报》 CSCD 2004年第2期17-19,共3页
以二个观赏水草为供试材料 ,进行离体培养研究。供体植株经消毒、短时间修复培养的重复 ,达到减少植株带菌量以及提高成活率的目的 ;确定以MS为基本培养基 ,6 BA 0 .5mg/L与 0 .2 5mg/L交替使用能有效提高增殖率和控制玻璃苗 ,添加NAA ... 以二个观赏水草为供试材料 ,进行离体培养研究。供体植株经消毒、短时间修复培养的重复 ,达到减少植株带菌量以及提高成活率的目的 ;确定以MS为基本培养基 ,6 BA 0 .5mg/L与 0 .2 5mg/L交替使用能有效提高增殖率和控制玻璃苗 ,添加NAA 0 .0 2mg/L能使试管苗健壮 ,转入 1/ 2MS无激素培养基即能获得 98%以上的生根率 ,炼苗后移栽水培 ,成活率可达 10 0 %。 展开更多
关键词 观赏水草 离体培养 培养基 外植体 表面灭菌 组织培养
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梨ACC氧化酶基因(ACO)的片段克隆及其RNAi载体构建 被引量:10
20
作者 胡钟东 乔玉山 +2 位作者 王三红 姚泉洪 章镇 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期877-879,共3页
以若光梨成熟果实为材料,提取总RNA,在ACC氧化酶基因(ACO)cDNA序列同源性较高区域设计一对特异引物,利用RT-PCR克隆了ACC氧化酶(ACO)基因片段。将ACO反义基因、与副球菌中类胡罗卜素合成有关的间隔基因YYT和ACO正义基因3个片段串联在一... 以若光梨成熟果实为材料,提取总RNA,在ACC氧化酶基因(ACO)cDNA序列同源性较高区域设计一对特异引物,利用RT-PCR克隆了ACC氧化酶(ACO)基因片段。将ACO反义基因、与副球菌中类胡罗卜素合成有关的间隔基因YYT和ACO正义基因3个片段串联在一起,经鉴定后,插入到植物表达载体中,构建成能够表达ACC氧化酶基因的双链RNA的植物载体pYF028,为耐贮砂梨的遗传转化创造条件。 展开更多
关键词 ACC氧化酶(ACO) RT-PCR 克隆 RNAI载体构建
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